| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1.前言 | 第10-15页 |
| 1.1 课题的提出与意义 | 第10-11页 |
| 1.2 启动子的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 启动子概述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 果实特异性启动子研究现状及应用 | 第12-13页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第13-14页 |
| 1.4 技术路线 | 第14-15页 |
| 2.材料与方法 | 第15-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 转化受体材料 | 第15页 |
| 2.1.2 农杆菌菌株和质粒 | 第15页 |
| 2.1.3 工具酶及主要生化试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.4 转化所用培养及配方 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 果实特异表达基因的筛选 | 第17-18页 |
| 2.2.2 启动子的序列分析 | 第18页 |
| 2.2.3 基因的克隆 | 第18-21页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第22-23页 |
| 2.2.6 pCitPDILP启动子瞬时转化的GUS鉴定 | 第23页 |
| 2.2.7 质粒DNA抽提(试剂盒法) | 第23-24页 |
| 2.2.8 根癌农杆菌介导转化早实枳 | 第24-26页 |
| 2.2.8.1 早实枳外植体的准备 | 第24页 |
| 2.2.8.2 农杆菌侵染液的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.8.3 侵染与共培养 | 第25页 |
| 2.2.8.4 筛选与培养 | 第25页 |
| 2.2.8.5 再生与生根 | 第25-26页 |
| 3.结果与分析 | 第26-34页 |
| 3.1 果实特异表达基因的挖掘和鉴定 | 第26页 |
| 3.2 pCit PDILP启动子的克隆与分析 | 第26-30页 |
| 3.2.1 pCitPDILP启动子的序列的分析 | 第26-28页 |
| 3.2.2 pCitPDILP启动子的克隆 | 第28页 |
| 3.2.3 pCitPDILP启动子表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 3.3 pCitPDILP启动子瞬时转化的GUS鉴定分析 | 第30-31页 |
| 3.4 早实枳上胚轴切段为外植体的pCitPDILP启动子的遗传转化 | 第31-34页 |
| 3.4.1 早实枳实生苗上胚轴切段的转化再生 | 第31-32页 |
| 3.4.2 再生率的统计 | 第32-34页 |
| 4.讨论 | 第34-38页 |
| 4.1 pCitPDILP启动子序列分析的结果讨论 | 第34页 |
| 4.2 载体选择上的优化建议 | 第34页 |
| 4.3 影响农杆菌介导的遗传转化的因素 | 第34-35页 |
| 4.4 实验不足与进一步研究思路 | 第35页 |
| 4.5 果实特异性启动子的应用和前景 | 第35-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
