| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第13-21页 |
| 1.1 低温胁迫 | 第13-14页 |
| 1.2 植物膜质与植物抗逆 | 第14-15页 |
| 1.3 植物耐寒基因研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4 GPAT研究进展 | 第17-19页 |
| 1.5 连翘研究进展 | 第19-21页 |
| 第二章 连翘属GPAT基因克隆与序列分析 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 酶与其他试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 溶液和培养基配制 | 第21页 |
| 2.1.5 仪器及生物学软件 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 连翘属总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 反转录合成第一链cDNA | 第23页 |
| 2.2.3 金钟连翘FsGPAT基因5'端克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.4 连翘属GPAT基因全长克隆 | 第25-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-38页 |
| 2.3.1 连翘属GPAT基因克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.2 连翘属GPAT基因序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3.3 GPATN端结构域 | 第31-32页 |
| 2.3.4 LPLAT结构域 | 第32页 |
| 2.3.5 连翘GPAT蛋白亚细胞定位预测 | 第32-33页 |
| 2.3.6 连翘GPAT蛋白质膜定位预测 | 第33-35页 |
| 2.3.7 连翘GPAT蛋白结构预测 | 第35页 |
| 2.3.8 同源性比对分析 | 第35-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 FsGPAT基因载体构建及遗传转化 | 第39-49页 |
| 3.1 材料 | 第39页 |
| 3.1.1 菌种和载体 | 第39页 |
| 3.1.2 酶和试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 溶液和培养基配制 | 第39页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 pCAMBIA-FsGPAT真核表达载体构建 | 第39-42页 |
| 3.2.2 pCAMBIA1302-F sGPAT重组质粒转化农杆菌LBA4404 | 第42-43页 |
| 3.2.3 转FsGPAT基因农杆菌侵染烟草 | 第43-44页 |
| 3.2.4 转FsGPAT基因烟草检测 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 3.3.1 pCAMBIA1302-FsGPAT重组质粒 | 第45-46页 |
| 3.3.2 转FsGPAT基因转农杆菌 | 第46页 |
| 3.3.3 转FsGPAT基因农杆菌PCR检测 | 第46-47页 |
| 3.3.4 转FsGPAT基因烟草检测 | 第47页 |
| 3.4 小结 | 第47-49页 |
| 第四章 连翘属GPAT表达量分析 | 第49-56页 |
| 4.1 qPCR法分析连翘中GPAT相对表达量变化 | 第49-51页 |
| 4.1.1 试验方法 | 第49-50页 |
| 4.1.2 结果分析 | 第50-51页 |
| 4.2 酶联免疫吸附法分析连翘中GPAT含量变化 | 第51-54页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第51-52页 |
| 4.2.2 其他试剂 | 第52页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第52页 |
| 4.2.4 试验方法 | 第52页 |
| 4.2.5 结果分析 | 第52-54页 |
| 4.3 小结 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第66-67页 |
