摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-26页 |
引言 | 第14页 |
1 LPA的来源 | 第14-15页 |
2 LPA受体 | 第15-16页 |
3 LPA介导的信号通路 | 第16-18页 |
4 LPA生物学效应 | 第18-20页 |
参考文献 | 第20-26页 |
第二部分 实验研究 | 第26-62页 |
第一章 LPA对绵羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响 | 第26-47页 |
引言 | 第26-27页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
1.1 实验材料 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-32页 |
2.1 发情母绵羊血清(ESS)的制备 | 第28页 |
2.2 绵羊卵母细胞的体外成熟、体外受精及受精卵体外培养 | 第28-30页 |
2.3 实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
2.4 数据统计学分析 | 第32页 |
3 结果 | 第32-41页 |
3.1 绵羊卵母细胞的体外收集与体外成熟 | 第33-34页 |
3.2 体外受精体系的筛选 | 第34-35页 |
3.3 不同浓度的LPA对成熟率、卵裂率、囊胚率的影响 | 第35-37页 |
3.4 LPARs、OCT-4及CDX-2在绵羊植入前胚胎中mRNA水平上的表达 | 第37-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
第二章 LPA对绵羊囊胚接种细胞体外培养的影响 | 第47-62页 |
引言 | 第47页 |
1 材料 | 第47-49页 |
1.1 实验材料 | 第47-48页 |
1.2 主要试验仪器 | 第48页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第48-49页 |
2 方法 | 第49-53页 |
2.1 羊胎儿成纤维细胞(GFF)饲养层的制备 | 第49-50页 |
2.2 绵羊体外受精囊胚接种细胞的培养 | 第50-52页 |
2.3 OCT4、CDX2和SOX2免疫荧光染色 | 第52页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第52-53页 |
2.5 数据统计学分析 | 第53页 |
3 结果 | 第53-58页 |
3.1 囊胚接种细胞在不同培养体系中的培养情况 | 第53-55页 |
3.2 不同培养体系中的绵羊囊胚接种细胞OCT4与CDX2的免疫荧光检测 | 第55-57页 |
3.3 不同培养体系中绵羊囊胚接种细胞OCT4与CDX2的实时荧光定量PCR检测 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-59页 |
小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
总结 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |