| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第9-24页 |
| 1.1 抗生素简介 | 第9-10页 |
| 1.2 抗生素分类研究 | 第10-13页 |
| 1.3 氨基糖苷类抗生素的概况 | 第13-19页 |
| 1.3.1 氨基糖苷类抗生素的结构 | 第13-16页 |
| 1.3.2 氨基糖苷类抗生素的作用机理 | 第16-19页 |
| 1.4 庆大霉素简介 | 第19-24页 |
| 1.4.1 庆大霉素研究价值 | 第19页 |
| 1.4.2 庆大霉素化学结构 | 第19-20页 |
| 1.4.3 庆大霉素研究基础 | 第20-24页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-30页 |
| 2.1.1 菌株 | 第24-25页 |
| 2.1.2 质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第26-27页 |
| 2.1.4 培养基与溶液 | 第27-29页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-37页 |
| 2.2.1 大肠杆菌和棘孢小单孢菌培养及菌种保藏 | 第30页 |
| 2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第30页 |
| 2.2.3 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.4 大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第31页 |
| 2.2.5 小单孢菌总DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.6 DNA片段的回收 | 第32页 |
| 2.2.7 PCR反应 | 第32-33页 |
| 2.2.8 DNA酶切 | 第33页 |
| 2.2.9 DNA连接 | 第33页 |
| 2.2.10 DNA序列的测序与分析 | 第33-34页 |
| 2.2.11 棘孢小单孢菌总DNA的快速提取 | 第34页 |
| 2.2.12 大肠杆菌与棘孢小单孢菌之间的属间接合转移 | 第34-35页 |
| 2.2.13 棘孢小单孢菌基因敲除双交换突变株的筛选 | 第35页 |
| 2.2.14 庆大霉素棘孢小单孢菌的发酵及庆大霉素的提取分离 | 第35-37页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第37-54页 |
| 3.1 庆大霉素生物合成基因簇中抗性基因gmrA的确定 | 第37-41页 |
| 3.1.1 gmrA同框敲除突变株的筛选 | 第37-38页 |
| 3.1.2 gmrA同框敲除改进实验 | 第38-40页 |
| 3.1.3 抗性候选基因gmrA的抗性敏感性测试 | 第40-41页 |
| 3.2 庆大霉素生物合成基因簇中抗性相关基因的探索 | 第41-54页 |
| 3.2.1 抗性基因快速筛选系统建立 | 第41-45页 |
| 3.2.2 抗性候选基因的筛选 | 第45-54页 |
| 第4章 总结与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
