摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第12-29页 |
1.1 水稻白叶枯病菌Xoo研究概况 | 第12-16页 |
1.1.1 Xoo基因组研究 | 第12-13页 |
1.1.2 Xoo致病因子研究 | 第13-16页 |
1.2 c-di-GMP信号研究概况 | 第16-27页 |
1.2.1 c-di-GMP的合成酶 | 第17页 |
1.2.2 c-di-GMP的降解酶 | 第17-18页 |
1.2.3 c-di-GMP的受体类型 | 第18-20页 |
1.2.4 c-di-GMP的调控功能 | 第20-26页 |
1.2.5 水稻白叶枯病菌中c-di-GMP信号系统 | 第26-27页 |
1.3 双组份信号转导系统 | 第27页 |
1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第27-29页 |
第二章 PDER互作蛋白的筛选和鉴定 | 第29-48页 |
2.1 实验材料 | 第29-31页 |
2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第29-30页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第30页 |
2.1.3 培养基和菌株培养条件 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-34页 |
2.2.1 Xoo cDNA文库构建 | 第31页 |
2.2.2 融合筛选 | 第31-32页 |
2.2.3 酵母系统互作验证 | 第32-33页 |
2.2.4 GST pull-down体外验证 | 第33-34页 |
2.2.5 ITC检测与c-di-GMP结合 | 第34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-46页 |
2.3.1 Xoo cDNA文库构建及酵母双杂交文库筛选 | 第34-35页 |
2.3.2 酵母双杂交互作验证 | 第35-39页 |
2.3.3 GST pull-down验证TriP、PXO_00987与PdeR互作 | 第39-42页 |
2.3.4 结构域互作检测 | 第42-45页 |
2.3.5 c-di-GMP对Tri P与PdeR互作的影响 | 第45页 |
2.3.6 ITC检测TriP与c-di-GMP的结合 | 第45-46页 |
2.4 讨论 | 第46-48页 |
第三章 转录调控因子TRIP功能研究 | 第48-66页 |
3.1 实验材料 | 第48-49页 |
3.1.1 菌株与质粒 | 第48页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第48-49页 |
3.1.3 培养基及菌株培养条件 | 第49页 |
3.2 实验方法 | 第49-51页 |
3.2.1 突变体及互补菌株构建 | 第49-50页 |
3.2.2 突变体表型测定 | 第50页 |
3.2.3 RNA-seq测序分析 | 第50-51页 |
3.3 实验结果 | 第51-64页 |
3.3.1 突变体及互补菌株构建 | 第51-54页 |
3.3.2 Δtri P突变体及互补菌株表型测定 | 第54-56页 |
3.3.3 RNA-seq测序结果与数据分析 | 第56-64页 |
3.4 讨论 | 第64-66页 |
第四章 乙酰转移酶PXO_00987功能研究 | 第66-77页 |
4.1 实验材料 | 第66页 |
4.1.1 菌株与质粒 | 第66页 |
4.1.2 主要试剂和仪器 | 第66页 |
4.1.3 培养基及菌株培养条件 | 第66页 |
4.2 实验方法 | 第66-68页 |
4.2.1 突变体及互补菌株构建 | 第66-67页 |
4.2.2 鞭毛蛋白提取及糖蛋白测定 | 第67页 |
4.2.3 突变体表型测定 | 第67-68页 |
4.3 实验结果 | 第68-76页 |
4.3.1 PXO_00987同源性比对 | 第68-69页 |
4.3.2 突变体及互补菌株构建 | 第69-71页 |
4.3.3 鞭毛蛋白提取及糖基化检测 | 第71-72页 |
4.3.4 ΔPXO_00987突变体表型测定 | 第72-76页 |
4.4 讨论 | 第76-77页 |
第五章 PDER亚细胞定位及其影响因素 | 第77-83页 |
5.1 实验材料 | 第77页 |
5.1.1 菌株和质粒 | 第77页 |
5.1.2 主要试剂盒仪器 | 第77页 |
5.1.3 培养基及菌株培养条件 | 第77页 |
5.2 实验方法 | 第77-78页 |
5.2.1 pBGFP载体构建 | 第77页 |
5.2.2 融合载体构建 | 第77-78页 |
5.2.3 GFP融合菌株筛选及荧光定位观察 | 第78页 |
5.3 结果与分析 | 第78-82页 |
5.3.1 pBGFP载体构建 | 第78页 |
5.3.2 融合载体构建 | 第78-79页 |
5.3.3 GFP融合菌株筛选 | 第79-80页 |
5.3.4 荧光定位观察 | 第80-82页 |
5.4 讨论 | 第82-83页 |
第六章 全文结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-100页 |
附录 | 第100-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
作者简历 | 第108页 |