| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-29页 |
| 1.1 1,3-甘油二酯 | 第12-15页 |
| 1.1.1 1,3-甘油二酯的概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 1,3-甘油二酯的制备方法 | 第13-15页 |
| 1.1.3 1,3-甘油二酯的应用 | 第15页 |
| 1.2 脂肪酶 | 第15-20页 |
| 1.2.1 脂肪酶的概述 | 第15页 |
| 1.2.2 脂肪酶的来源 | 第15-17页 |
| 1.2.3 脂肪酶的结构特点及催化特性 | 第17-18页 |
| 1.2.4 Sn-2 位酯键选择性脂肪酶的介绍 | 第18-19页 |
| 1.2.5 脂肪酶的应用 | 第19-20页 |
| 1.3 反胶束萃取 | 第20-26页 |
| 1.3.1 脂肪酶分离纯化技术分类及比较 | 第20-22页 |
| 1.3.2 反胶束萃取概述 | 第22-23页 |
| 1.3.3 蛋白质进入反胶束的原理 | 第23-24页 |
| 1.3.4 影响反胶束萃取的因素 | 第24-25页 |
| 1.3.5 反胶束萃取的应用 | 第25-26页 |
| 1.4 酶的固定化 | 第26-27页 |
| 1.4.1 固定化酶的概述 | 第26-27页 |
| 1.4.2 酶固定化的方法 | 第27页 |
| 1.4.3 脂肪酶的固定化 | 第27页 |
| 1.5 立题背景与主要研究内容 | 第27-29页 |
| 1.5.1 立题背景及意义 | 第27-28页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 黑曲霉GZUF36产胞外Sn-2 脂肪酶的复壮研究 | 第29-35页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2.1.3 菌株来源 | 第30页 |
| 2.1.4 培养基 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-32页 |
| 2.2.1 实验流程 | 第31页 |
| 2.2.2 罗丹明平板显色法 | 第31-32页 |
| 2.2.3 胞外Sn-2 脂肪酶水解酶活力检测 | 第32页 |
| 2.2.4 液相检测 | 第32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-34页 |
| 2.3.1 菌体生长情况 | 第32页 |
| 2.3.2 罗丹明平板显色圈 | 第32-33页 |
| 2.3.3 胞外Sn-2 脂肪酶水解酶活力 | 第33-34页 |
| 2.3.4 液相检测 | 第34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 黑曲霉GZUF36胞外Sn-2 脂肪酶的分离纯化 | 第35-60页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 菌种来源 | 第36页 |
| 3.1.4 培养基 | 第36-37页 |
| 3.1.5 主要溶液的配置 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 胞外Sn-2 脂肪酶粗酶液的制备 | 第37页 |
| 3.2.2 丙酮沉淀初步提纯胞外Sn-2 脂肪酶 | 第37页 |
| 3.2.3 反胶束法分离纯化胞外Sn-2 脂肪酶 | 第37-38页 |
| 3.2.4 脂肪酶的浓缩及脱盐 | 第38页 |
| 3.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第38页 |
| 3.2.6 液相二级质谱（LC-MS/MS）测序 | 第38页 |
| 3.2.7 蛋白质含量的测定 | 第38-39页 |
| 3.2.8 胞外Sn-2 脂肪酶酶活力的测定 | 第39页 |
| 3.2.9 反胶束中增溶水量W0测定 | 第39页 |
| 3.2.10 测量指标 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第40-58页 |
| 3.3.1 考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线 | 第40页 |
| 3.3.2 丙酮沉淀条件优化 | 第40-43页 |
| 3.3.3 反胶束萃取─前萃取条件优化 | 第43-51页 |
| 3.3.4 反胶束萃取─反萃取条件优化 | 第51-56页 |
| 3.3.5 SDS-PAGE和分子量的测定 | 第56-58页 |
| 3.3.6 LC-MS/MS测序结果与系统发育树 | 第58页 |
| 3.4 本章小节 | 第58-60页 |
| 第四章 胞外Sn-2 脂肪酶酶学性质研究 | 第60-71页 |
| 4.1 材料 | 第61页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第61页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第61页 |
| 4.1.3 样品来源 | 第61页 |
| 4.1.4 主要溶液的配置 | 第61页 |
| 4.2 方法 | 第61-63页 |
| 4.2.1 胞外Sn-2 脂肪酶的浓缩及脱盐 | 第61页 |
| 4.2.2 温度对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第61页 |
| 4.2.3 胞外Sn-2 脂肪酶的热稳定性 | 第61-62页 |
| 4.2.4 pH对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第62页 |
| 4.2.5 胞外Sn-2 脂肪酶的pH稳定性 | 第62页 |
| 4.2.6 金属离子对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第62页 |
| 4.2.7 胞外Sn-2 脂肪酶的底物特异性 | 第62页 |
| 4.2.8 酶动力学测定 | 第62-63页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第63-69页 |
| 4.3.1 温度对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.2 胞外Sn-2 脂肪酶的热稳定性 | 第64-65页 |
| 4.3.3 pH对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.4 胞外Sn-2 脂肪酶的pH稳定性 | 第66-67页 |
| 4.3.5 金属离子对胞外Sn-2 脂肪酶的影响 | 第67-68页 |
| 4.3.6 胞外Sn-2 脂肪酶的底物特异性 | 第68-69页 |
| 4.3.7 酶动力学测定 | 第69页 |
| 4.4 本章小结 | 第69-71页 |
| 第五章 胞外Sn-2 脂肪酶固定化 | 第71-82页 |
| 5.1 材料 | 第72页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第72页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第72页 |
| 5.1.3 胞外Sn-2 脂肪酶样品来源 | 第72页 |
| 5.1.4 主要试剂的配置 | 第72页 |
| 5.2 方法 | 第72-74页 |
| 5.2.1 海藻酸钠固定化胞外Sn-2 脂肪酶 | 第72页 |
| 5.2.2 固定化胞外Sn-2 脂肪酶酶活力测定 | 第72页 |
| 5.2.3 固定化效率计算 | 第72页 |
| 5.2.4 海藻酸钠浓度对固定化的影响 | 第72-73页 |
| 5.2.5 海藻酸钠和酶液的体积比对固定化的影响 | 第73页 |
| 5.2.6 CaCl_2浓度对固定化的影响 | 第73页 |
| 5.2.7 固定化时间对固定化的影响 | 第73页 |
| 5.2.8 固定化温度对固定化的影响 | 第73页 |
| 5.2.9 胞外Sn-2 脂肪酶固定化因素的正交实验 | 第73页 |
| 5.2.10 固定化Sn-2 脂肪酶的重复利用 | 第73-74页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第74-80页 |
| 5.3.1 海藻酸钠浓度对固定化的影响 | 第74-75页 |
| 5.3.2 海藻酸钠和酶液的体积比对固定化的影响 | 第75-76页 |
| 5.3.3 CaCl_2浓度对固定化的影响 | 第76-77页 |
| 5.3.4 固定化时间对固定化的影响 | 第77-78页 |
| 5.3.5 固定化温度对固定化的影响 | 第78页 |
| 5.3.6 胞外Sn-2 脂肪酶固定化因素的正交实验 | 第78-80页 |
| 5.3.7 固定化胞外Sn-2 脂肪酶的重复性实验 | 第80页 |
| 5.4 本章小节 | 第80-82页 |
| 第六章 结论与展望 | 第82-85页 |
| 6.1 主要结论 | 第82-83页 |
| 6.2 展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 图版 | 第105-108页 |
