| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第12-15页 |
| 1.1 启动子的选择和改造 | 第12页 |
| 1.2 提高翻译效率 | 第12-13页 |
| 1.2.1 添加 3′-非翻译序列(UTR)和 5′-非翻译序列(UTR) | 第13页 |
| 1.2.2 对基因的编码区进行改造 | 第13页 |
| 1.2.3 优化起始密码的周边序列 | 第13页 |
| 1.3 消除位置效应 | 第13-14页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 不同结构载体对烟草遗传转化及双Bt基因表达比较 | 第15-38页 |
| 2.1 材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 受体材料 | 第15页 |
| 2.1.2 植物转化载体 | 第15-16页 |
| 2.1.3 常用生化试剂和培养基的配制 | 第16-17页 |
| 2.1.4 试验所用PCR引物 | 第17页 |
| 2.1.5 主要试验仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 选择压浓度的确定 | 第18页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的遗传转化 | 第18-20页 |
| 2.2.3 转基因烟草的PCR检测 | 第20-21页 |
| 2.2.4 转基因烟草蛋白质水平的检测 | 第21页 |
| 2.2.5 转基因烟草外源基因转录水平的检测 | 第21-22页 |
| 2.2.6 抗性试验 | 第22-23页 |
| 2.2.7 实验数据分析 | 第23-24页 |
| 2.3 结果分析 | 第24-36页 |
| 2.3.1 选择压浓度的确定 | 第24-25页 |
| 2.3.2 转基因烟草的获得及移栽 | 第25-26页 |
| 2.3.3 目的基因PCR检测结果 | 第26-28页 |
| 2.3.4 Bt毒蛋白的ELISA检测 | 第28-31页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR鉴定结果 | 第31-35页 |
| 2.3.6 抗虫试验 | 第35-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-38页 |
| 3 对转化载体的初步改进 | 第38-57页 |
| 3.1 材料 | 第38-40页 |
| 3.1.1 菌种和受体材料 | 第38页 |
| 3.1.2 植物转化载体 | 第38-39页 |
| 3.1.3 常用生化试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.4 试验所用PCR引物 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-50页 |
| 3.2.1 质粒提取 | 第40-41页 |
| 3.2.2 凝胶回收 | 第41页 |
| 3.2.3 大肠杆菌热激感受态细胞的制备 | 第41页 |
| 3.2.4 大肠杆菌感受态细胞的DNA转化 | 第41-42页 |
| 3.2.5 农杆菌热激感受态细胞的制备 | 第42页 |
| 3.2.6 农杆菌感受态细胞的DNA转化 | 第42页 |
| 3.2.7 多基因载体的构建 | 第42-49页 |
| 3.2.8 烟草转化 | 第49页 |
| 3.2.9 转基因植株的获得 | 第49页 |
| 3.2.10 转基因植株的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.11 Bt毒蛋白的ELISA检测 | 第50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-55页 |
| 3.3.1 多基因植物转化载体的检测 | 第50-53页 |
| 3.3.2 转基因烟草的获得 | 第53-54页 |
| 3.3.3 目的基因PCR检测结果 | 第54页 |
| 3.3.4 Bt毒蛋白的ELISA检测 | 第54-55页 |
| 3.4 小结 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 在读期间发表的论文 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |