| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 植物的花发育研究 | 第9-16页 |
| 1.1 花发育ABCDE模型 | 第9-10页 |
| 1.2 植物MADS-box家族 | 第10-16页 |
| 1.2.1 植物MADS-box基因结构及进化 | 第10-11页 |
| 1.2.2 植物MADS-box功能 | 第11-13页 |
| 1.2.3 STMADS11 亚家族 | 第13-14页 |
| 1.2.4 FLC亚家族 | 第14-16页 |
| 2 矮牵牛研究进展 | 第16-20页 |
| 2.1 矮牵牛简介 | 第16页 |
| 2.2 矮牵牛MADS-box基因家族研究进展 | 第16-19页 |
| 2.2.1 矮牵牛MADS-box基因的分类与功能研究 | 第16-18页 |
| 2.2.2 矮牵牛MADS-box家族基因表达模式 | 第18-19页 |
| 2.3 矮牵牛遗传转化进展 | 第19-20页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 矮牵牛STMADS11 和FLC亚家族基因克隆与载体构建 | 第21-36页 |
| 1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1 植物材料 | 第21-22页 |
| 1.2 实验试剂 | 第22页 |
| 1.3 载体质粒和菌株 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-30页 |
| 2.1 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2 RNA提取及反转录 | 第23-24页 |
| 2.3 PCR扩增目的片段与回收 | 第24-25页 |
| 2.4 A-T克隆 | 第25-26页 |
| 2.4.1 T载的连接 | 第25页 |
| 2.4.2 热激转化大肠杆菌DH5α | 第25-26页 |
| 2.4.3 阳性菌的检测及测序 | 第26页 |
| 2.4.4 序列分析与系统进化树构建 | 第26页 |
| 2.5 质粒双酶切及连接载体 | 第26-28页 |
| 2.5.1 质粒的提取 | 第26-27页 |
| 2.5.2 双酶切和连接 | 第27-28页 |
| 2.6 LR重组反应 | 第28-29页 |
| 2.7 重组质粒转化AGL0 农杆菌菌株 | 第29-30页 |
| 2.7.1 农杆菌感受态AGL0 的制备 | 第29页 |
| 2.7.2 电转农杆菌AGL0 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 3.1 矮牵牛RNA的检测 | 第30页 |
| 3.2 目的基因的克隆 | 第30-31页 |
| 3.3 系统进化树分析 | 第31-33页 |
| 3.4 超量表达载体构建 | 第33页 |
| 3.5 RNAi载体构建 | 第33-34页 |
| 3.5.1 连接中间载体V097 | 第33-34页 |
| 3.5.2 LR重组反应阳性鉴定 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 4.1 RNA的提取 | 第34页 |
| 4.2 载体的构建 | 第34-36页 |
| 第三章 矮牵牛STMADS11 和FLC亚家族基因遗传转化及功能分析 | 第36-47页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 植物材料 | 第36页 |
| 1.2 实验药品 | 第36页 |
| 1.3 培养基 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 叶盘法转化矮牵牛 | 第37页 |
| 2.2 抗性苗驯化移栽 | 第37页 |
| 2.3 抗性苗PCR检测 | 第37-38页 |
| 2.3.1 抗性苗DNA提取 | 第37-38页 |
| 2.3.2 转化植株PCR检测 | 第38页 |
| 2.4 转化植株的表达分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.1 矮牵牛遗传转化 | 第39-40页 |
| 3.2 转基因植株PCR检测 | 第40-42页 |
| 3.3 转基因植株表型观测 | 第42-43页 |
| 3.4 转化植株的表达分析 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 矮牵牛遗传转化影响因素 | 第44-45页 |
| 4.2 转基因矮牵牛表型 | 第45-47页 |
| 第四章 总结与展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
