摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-16页 |
1.1 L-半乳糖合成途径 | 第10-11页 |
1.2 参与L-半乳糖合成途径的酶 | 第11-14页 |
1.2.1 磷酸葡糖异构酶(PMI) | 第11-12页 |
1.2.2 磷酸甘露糖变构酶(PMM) | 第12页 |
1.2.3 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(VTC1) | 第12页 |
1.2.4 GDP-D-甘露糖 3′,5′-表异构酶(GME) | 第12页 |
1.2.5 GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GGP) | 第12-13页 |
1.2.6 L-半乳糖1P-磷酸酶(VTC4) | 第13页 |
1.2.7 L-半乳糖脱氢酶(GalDH) | 第13页 |
1.2.8 L-半乳糖-1,4-内脂脱氢酶(GalLDH) | 第13-14页 |
1.3 AsA的调控因子 | 第14页 |
1.3.1 开放阅读框上游的非编码区(uORF) | 第14页 |
1.3.2 转录因子(TFs) | 第14页 |
1.4 本试验目的及意义 | 第14-16页 |
第二章 猕猴桃GGP基因启动子活性及该基因uORF区突变分析 | 第16-31页 |
2.1 材料方法 | 第16-19页 |
2.1.1 材料 | 第16页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第16-17页 |
2.1.3 酶及化学试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 引物合成 | 第18页 |
2.1.5 培养基及试剂配制 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-20页 |
2.2.1 猕猴桃GGP的启动子及其uORF序列分析 | 第19页 |
2.2.2 猕猴桃GGP启动子克隆 | 第19页 |
2.2.3 GGP基因启动子活性验证及Crispr载体构建 | 第19-20页 |
2.3 试验结果 | 第20-29页 |
2.3.1 山梨和毛花猕猴桃果实和叶片AsA含量 | 第20-21页 |
2.3.2 山梨和毛花猕猴桃果实和叶片GGP基因表达 | 第21-22页 |
2.3.3 杂交后代AsA含量变化 | 第22页 |
2.3.4 杂交后代GGP启动子分析 | 第22-23页 |
2.3.5 不同种猕猴桃AsA含量变化 | 第23-24页 |
2.3.6 GGP启动子克隆 | 第24-26页 |
2.3.7 GGP基因与启动子分析 | 第26页 |
2.3.8 不同GGP基因的启动子活性分析 | 第26页 |
2.3.9 不同长度GGP基因启动子生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.3.10 Crispr载体构建 | 第27-28页 |
2.3.11 转基因拟南芥的鉴定 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
2.4.1 猕猴桃GGP基因启动子功能分析 | 第29-30页 |
2.4.2 拟南芥GGP基因uORF功能分析 | 第30-31页 |
第三章 苹果AMR1基因互补验证及转录因子筛选 | 第31-42页 |
3.1 材料方法 | 第31-33页 |
3.1.1 材料 | 第31页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第31-32页 |
3.1.3 化学试剂 | 第32页 |
3.1.4 培养基及试剂配制 | 第32页 |
3.1.5 引物 | 第32-33页 |
3.2 试验方法 | 第33-35页 |
3.2.1 克隆苹果中MdAMR1的同源基因 | 第33页 |
3.2.2 转化拟南芥 | 第33页 |
3.2.3 构建诱饵质粒 | 第33-34页 |
3.2.4 酵母感受态细胞制备 | 第34页 |
3.2.5 诱饵质粒转化酵母 | 第34页 |
3.2.6 酵母单杂交筛库 | 第34-35页 |
3.3 试验结果 | 第35-40页 |
3.3.1 苹果MdAMR1基因在果实发育期的表达 | 第35页 |
3.3.2 苹果MdAMR1基因在拟南芥中的功能互补验证 | 第35-37页 |
3.3.3 苹果MdAMR1基因转录因子筛选 | 第37-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
3.4.1 苹果MdAMR1基因在拟南芥中的互补试验 | 第40-41页 |
3.4.2 苹果MdAMR1.1 基因转录因子的筛选 | 第41-42页 |
第四章 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |