摘要 | 第5-7页 |
Summary | 第7-8页 |
缩略词表 | 第14-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-32页 |
1 衣原体及衣原体病概述 | 第17-18页 |
2 衣原体病诊断方法的研究进展 | 第18-22页 |
2.1 衣原体病原检测 | 第18-19页 |
2.1.1 姬姆萨染色 | 第18-19页 |
2.1.2 酶免检测 | 第19页 |
2.1.3 分离培养 | 第19页 |
2.2 衣原体抗体检测 | 第19-21页 |
2.2.1 间接血凝试验 | 第19页 |
2.2.2 补体结合试验 | 第19-20页 |
2.2.3 酶联免疫吸附试验 | 第20页 |
2.2.4 微量间接免疫荧光试验 | 第20页 |
2.2.5 胶体金技术 | 第20-21页 |
2.3 分子生物学检测方法 | 第21-22页 |
2.3.1 核酸杂交法 | 第21页 |
2.3.2 PCR检测法 | 第21页 |
2.3.3 环介导等温扩增技术 | 第21-22页 |
3 分子生物学研究进展 | 第22-25页 |
3.1 基因组研究进展 | 第22-24页 |
3.1.1 生态位特异性基因 | 第22页 |
3.1.2 毒素基因 | 第22页 |
3.1.3 侵染素/内膜素(invasin/intimin)基因 | 第22-23页 |
3.1.4 多形态膜蛋白基因(Pmp) | 第23页 |
3.1.5 包涵体膜蛋白基因(Inc) | 第23页 |
3.1.6 肽聚糖合成基因 | 第23页 |
3.1.7 III型蛋白分泌物基因 | 第23-24页 |
3.1.8 外膜蛋白基因(Omp) | 第24页 |
3.2 蛋白组学研究进展 | 第24-25页 |
3.2.1 外膜蛋白(Omp) | 第24页 |
3.2.2 热休克蛋白(HSP) | 第24页 |
3.2.3 多态外膜蛋白(POMPs) | 第24-25页 |
3.2.4 主要外膜蛋白(MOMP) | 第25页 |
4 衣原体疫苗的研究进展 | 第25-30页 |
4.1 灭活苗 | 第25-26页 |
4.2 减毒活疫苗 | 第26页 |
4.3 亚单位疫苗 | 第26-27页 |
4.4 DNA疫苗 | 第27-28页 |
4.5 载体疫苗 | 第28-29页 |
4.5.1 菌影疫苗 | 第28页 |
4.5.2 DC疫苗 | 第28-29页 |
4.5.3 病毒活载体疫苗 | 第29页 |
4.6 质粒缺失疫苗 | 第29-30页 |
4.7 多价疫苗 | 第30页 |
5 牦牛衣原体病 | 第30-31页 |
6 本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
第二章 牦牛衣原体病流行病学调查 | 第32-42页 |
1 材料与方法 | 第32-35页 |
1.1 材料 | 第32-33页 |
1.1.1 牦牛血清与组织样品 | 第32-33页 |
1.1.2 主要试剂 | 第33页 |
1.1.3 主要仪器 | 第33页 |
1.2 方法 | 第33-35页 |
1.2.1 间接血凝试验 (IHA) 方法检测血清抗体 | 第33页 |
1.2.2 聚合酶链式反应( PCR)法检测病料 | 第33-35页 |
1.2.3 流行病学调查 | 第35页 |
2 结果 | 第35-40页 |
2.1 血清抗体检测结果 | 第35-38页 |
2.2 PCR检测结果 | 第38-40页 |
2.3 临床发病流行病学调查结果 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第三章 牦牛流产衣原体的分离鉴定 | 第42-51页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
1.1 材料 | 第42-44页 |
1.1.1 实验动物与样本 | 第42页 |
1.1.2 试剂 | 第42-43页 |
1.1.3 仪器 | 第43页 |
1.1.4 相关溶液 | 第43-44页 |
1.2 方法 | 第44-46页 |
1.2.1 牦牛衣原体的分离培养 | 第44页 |
1.2.2 分离株形态学观察 | 第44-45页 |
1.2.3 基因组DNA的提取 | 第45页 |
1.2.4 PCR扩增 | 第45-46页 |
1.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第46页 |
1.2.6 限制性片段长度多态性分析(RFLP) | 第46页 |
2 结果 | 第46-49页 |
2.1 分离培养结果 | 第46-47页 |
2.2 形态学观察结果 | 第47-48页 |
2.3 PCR及限制性片段长度多态性分析(RFLP)结果 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
第四章 牦牛流产衣原体灭活苗的研究及小鼠免疫试验 | 第51-66页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
1.1 材料 | 第51-53页 |
1.1.1 菌株与实验动物 | 第51-52页 |
1.1.2 试剂 | 第52页 |
1.1.3 仪器 | 第52页 |
1.1.4 溶液配制 | 第52-53页 |
1.2 方法 | 第53-58页 |
1.2.1 牦牛流产衣原体疫苗的制备 | 第53-54页 |
1.2.2 小鼠免疫效果评价 | 第54-58页 |
2 结果 | 第58-64页 |
2.1 牦牛流产衣原体疫苗的制备结果 | 第58-59页 |
2.2 小鼠免疫效果评价结果 | 第59-64页 |
2.2.1 小鼠血清抗体亚型检测结果 | 第59页 |
2.2.2 小鼠血清IFN-γ 含量检测结果 | 第59-60页 |
2.2.3 抗体中和试验结果 | 第60-61页 |
2.2.4 迟发型超敏反应(DTH)结果 | 第61-62页 |
2.2.5 攻毒试验结果 | 第62-63页 |
2.2.6 小鼠脾淋巴细胞增殖试验结果 | 第63-64页 |
2.2.7 小鼠脾淋巴细胞培养上清液IFN-γ 含量检测结果 | 第64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第五章 牦牛流产衣原体疫苗本动物 | 第66-74页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
1.1 材料 | 第66-67页 |
1.1.1 菌株与实验动物 | 第66页 |
1.1.2 试剂 | 第66页 |
1.1.3 仪器 | 第66-67页 |
1.1.4 溶液配制 | 第67页 |
1.2 方法 | 第67-68页 |
1.2.1 牦牛流产衣原体疫苗扩大生产 | 第67页 |
1.2.2 试验动物的筛选及分组 | 第67页 |
1.2.3 牦牛衣原体本动物毒力测定试验 | 第67页 |
1.2.4 疫苗安全性试验 | 第67-68页 |
1.2.5 疫苗的最小免疫剂量试验 | 第68页 |
1.2.6 疫苗的免疫效力检测 | 第68页 |
1.2.7 疫苗的免疫持续期检测 | 第68页 |
1.2.8 疫苗保存期试验 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-71页 |
2.1 牦牛衣原体本动物毒力测定试验结果 | 第68-69页 |
2.2 疫苗安全性试验结果 | 第69页 |
2.3 疫苗的最小免疫剂量试验结果 | 第69-70页 |
2.4 疫苗的免疫效力检测结果 | 第70页 |
2.5 疫苗的免疫持续期检测结果 | 第70-71页 |
2.6 疫苗保存期试验 | 第71页 |
2.7 衣原体灭活疫苗免疫扩大试验 | 第71页 |
3 讨论 | 第71-74页 |
第六章 总结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
作者简介 | 第86-87页 |
导师简介1 | 第87-88页 |
导师简介2 | 第88页 |