| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 鲤鱼生物生态学 | 第8-13页 |
| 1.1.1 鲤鱼的胚胎发育 | 第8-10页 |
| 1.1.2 鲤鱼肌肉的起源和发生 | 第10-12页 |
| 1.1.3 鲤鱼肌肉组织的分类及功能 | 第12-13页 |
| 1.2 鲤鱼肌肉发育过程中分子调控机制 | 第13-14页 |
| 1.2.1 生肌调节因子家族 | 第13页 |
| 1.2.2 缝隙链接蛋白Cx基因 | 第13页 |
| 1.2.3 Cx基因家族 | 第13-14页 |
| 1.2.4 Cx43的生物学特性与肌肉发育 | 第14页 |
| 1.3 MircoRNA | 第14-16页 |
| 1.3.1 MircoRNA的生成及作用机制 | 第15页 |
| 1.3.2 MircoRNA与肌肉发育 | 第15页 |
| 1.3.3 Cx43与miRNAs | 第15-16页 |
| 1.4 目的意义 | 第16-17页 |
| 2 Cx43基因在鲤鱼中的表达 | 第17-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.2 试验材料与方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 主要试验器械的清洗和消毒 | 第18-19页 |
| 2.2.2 试验所需试剂的配制和分装 | 第19-20页 |
| 2.2.3 试验动物的预处理 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.3.1 鲤鱼胚胎总RNA的提取及RT-PCR | 第21-23页 |
| 2.3.2 cRNA探针的制备 | 第23-24页 |
| 2.3.3 成体鲤鱼肌肉总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.4 肌肉总RNA的消化、检污染、加尾、抽提和沉淀 | 第25页 |
| 2.3.5 反转录PCR | 第25页 |
| 2.3.6 整体原位杂交(Whole-mount) | 第25-26页 |
| 2.3.7 双萤光素酶载体的构建与鉴定 | 第26-28页 |
| 2.3.8 NIH-3T3细胞的复苏与传代培养 | 第28页 |
| 2.3.9 细胞转染 | 第28页 |
| 2.3.10 双萤光素酶的检测 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-42页 |
| 3.1 黑龙江鲤鱼胚胎中Cx43基因的表达分析 | 第30-35页 |
| 3.1.1 Cx43基因片段克隆及探针制备 | 第30-31页 |
| 3.1.2 RT-PCR检测Cx43基因在鲤鱼胚胎不同时期的表达 | 第31页 |
| 3.1.3 原位杂交检测MyoD基因在鲤鱼胚胎不同时期的表达 | 第31-33页 |
| 3.1.4 原位杂交检测Cx43基因在鲤鱼胚胎不同时期的表达 | 第33-35页 |
| 3.2 Cx43基因在成体鲤鱼不同组织中的表达 | 第35页 |
| 3.3 鲤鱼肌肉发育过程中miRNA-1和miRNA-206对Cx43的调控分析 | 第35-42页 |
| 3.3.1 调控Cx43基因的miRNA预测与分析 | 第35-37页 |
| 3.3.2 鲤鱼Cx43基因3'-UTR区的克隆 | 第37页 |
| 3.3.3 荧光素酶报告载体PMIR-Cx43的构建及检测 | 第37-39页 |
| 3.3.4 NIH-3T3细胞的复苏与传代培养 | 第39-40页 |
| 3.3.5 NIH-3T3细胞转染效率的检测 | 第40页 |
| 3.3.6 双荧光素酶报告系-统检测miRNA-1和miRNA-206对靶基因Cx43的调控作用 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
