缩略语 | 第10-13页 |
摘要 | 第13-15页 |
Abstract | 第15-16页 |
1. 引言 | 第17-28页 |
1.1. 肠道病毒的分类 | 第17-18页 |
1.2. 脊髓灰质炎病毒的病原学特征 | 第18-19页 |
1.3. 脊灰病毒基因结构特征 | 第19-20页 |
1.4. 脊灰病毒的生活周期 | 第20-21页 |
1.5. 全球消灭脊灰的进展 | 第21-22页 |
1.6. 疫苗衍生脊灰病毒 | 第22-24页 |
1.7. 全球cVDPVs和iVDPVs的现状 | 第24-26页 |
1.8. 中国cVDPVs和iVDPVs的现状 | 第26-27页 |
1.9. 本课题研究目的 | 第27-28页 |
2. 实验材料和方法 | 第28-49页 |
2.1 病例信息 | 第28-29页 |
2.2 标本信息 | 第29页 |
2.3 要试剂和仪器耗材 | 第29-32页 |
2.3.1. 主要试剂 | 第29-30页 |
2.3.2. 主要使用的分子生物学酶 | 第30页 |
2.3.3. 仪器设备 | 第30-32页 |
2.3.4. 主要耗材 | 第32页 |
2.4 课题研究相关生物信息软件 | 第32页 |
2.5 病毒分离 | 第32-36页 |
2.5.1. 粪便标本处理 | 第32-33页 |
2.5.2. 细胞的复苏 | 第33-34页 |
2.5.3. 细胞传代 | 第34-35页 |
2.5.4. 细胞冻存 | 第35页 |
2.5.5. 病毒接种 | 第35-36页 |
2.6 脊灰病毒中和实验 | 第36-38页 |
2.7 脊灰病毒型内鉴定 | 第38-39页 |
2.7.1. Poliovirus ITD rRT-PCR | 第38-39页 |
2.7.2. Poliovirus VDPV rRT-PCR | 第39页 |
2.8 脊灰病毒滴度测定(CCID_(50)) | 第39页 |
2.9 脊灰病毒噬斑纯化实验 | 第39-40页 |
2.10 脊灰病毒温度敏感性实验 | 第40-41页 |
2.11 宁夏iVDPVs VP1编码区基因特征 | 第41-46页 |
2.11.1. 病毒核酸提取 | 第41-42页 |
2.11.2. VP1编码区基因序列引物设计与合成 | 第42页 |
2.11.3. 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第42-43页 |
2.11.4. 电泳分析 | 第43-44页 |
2.11.5. PCR产物纯化回收 | 第44页 |
2.11.6. VP1编码区核苷酸测序 | 第44-45页 |
2.11.7. 核苷酸序列测定 | 第45页 |
2.11.8. 序列拼接整理 | 第45-46页 |
2.12 宁夏iVDPVs全基因组序列测定 | 第46-47页 |
2.12.1. 病毒核酸提取 | 第46页 |
2.12.2. 宁夏iVDPVs全基因组测序引物设计与合成 | 第46页 |
2.12.3. RT-PCR扩增 | 第46页 |
2.12.4. PCR产物纯化 | 第46-47页 |
2.12.5. 标记反应 | 第47页 |
2.12.6. 标记反应产物纯化 | 第47页 |
2.12.7. 核苷酸序列测定 | 第47页 |
2.13 宁夏iVDPVs基因组序列特征及进化关系分析 | 第47页 |
2.14 宁夏iVDPVs全基因组重组分析 | 第47页 |
2.15 宁夏iVDPVs分离株分子进化起源分析 | 第47-49页 |
3. 结果 | 第49-68页 |
3.1 宁夏iVDPVs毒株的首次发现与分离鉴定 | 第49页 |
3.2 宁夏iVDPVs毒株的种群分析 | 第49-51页 |
3.3 宁夏iVDPVs毒株VP1区基因特征分析 | 第51-55页 |
3.4 宁夏iVDPVs毒株全基因组特征分析 | 第55-61页 |
3.5 宁夏iVDPVs毒株关键位点分析 | 第61-63页 |
3.6 宁夏iVDPVs毒株温度敏感性研究 | 第63-66页 |
3.7 宁夏iVDPVs毒株的起源时间进化分析 | 第66-68页 |
4. 讨论 | 第68-73页 |
5. 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
综述 | 第83-92页 |
参考文献 | 第88-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
研究生期间发表和待发表的论文 | 第94-95页 |
附件 | 第95-103页 |