| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 符号表 | 第16-18页 |
| 缩略语表 | 第18-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-44页 |
| 1.1 引言 | 第20-21页 |
| 1.2 疏水性电荷诱导层析 | 第21-24页 |
| 1.2.1 基本原理 | 第21页 |
| 1.2.2 功能配基 | 第21-23页 |
| 1.2.3 抗体分离应用 | 第23-24页 |
| 1.3 聚合物接枝层析介质 | 第24-29页 |
| 1.3.1 聚合物直接接枝 | 第25-28页 |
| 1.3.2 小分子单体聚合接枝 | 第28-29页 |
| 1.4 层析介质的理化性质 | 第29-33页 |
| 1.4.1 粒径 | 第29页 |
| 1.4.2 孔径 | 第29-31页 |
| 1.4.3 孔道微结构 | 第31页 |
| 1.4.4 配基类型和配基密度 | 第31-33页 |
| 1.5 蛋白性质及蛋白-介质的相互作用 | 第33-38页 |
| 1.5.1 Zeta电位仪技术 | 第33-34页 |
| 1.5.2 动态光散射仪技术 | 第34-35页 |
| 1.5.3 等温滴定量热仪技术(ITC) | 第35-36页 |
| 1.5.4 共聚焦激光扫描显微镜技术(CLSM) | 第36-37页 |
| 1.5.5 全内反射荧光扫描显微镜技术(TIRFM) | 第37-38页 |
| 1.6 层析介质的蛋白传质模型 | 第38-41页 |
| 1.6.1 外膜扩散控制模型 | 第38-39页 |
| 1.6.2 孔扩散控制模型 | 第39-40页 |
| 1.6.3 均质扩散控制模型 | 第40-41页 |
| 1.7 本文研究思路 | 第41-44页 |
| 第二章 葡聚糖接枝型HCIC介质的制备及静态吸附性能 | 第44-66页 |
| 2.1 引言 | 第44页 |
| 2.2 介质制备原理 | 第44-45页 |
| 2.3 材料与方法 | 第45-48页 |
| 2.3.1 试剂与仪器 | 第45-46页 |
| 2.3.2 基质活化 | 第46页 |
| 2.3.3 基质双键溴化与配基偶联 | 第46页 |
| 2.3.4 活化密度测定 | 第46-47页 |
| 2.3.5 配基密度测定 | 第47页 |
| 2.3.6 吸附等温线测定 | 第47-48页 |
| 2.3.7 MMI配基pK_a和质子化程度测定 | 第48页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第48-64页 |
| 2.4.1 基质活化 | 第48-50页 |
| 2.4.2 基质双键溴化及配基偶联 | 第50-52页 |
| 2.4.3 配基密度和葡聚糖接枝对hIgG静态吸附的交互影响 | 第52-55页 |
| 2.4.4 配基密度和pH对hIgG静态吸附的交互影响 | 第55-60页 |
| 2.4.5 配基密度和盐浓度对hIgG静态吸附的交互影响 | 第60-64页 |
| 2.5 本章小结 | 第64-66页 |
| 第三章 葡聚糖接枝型HCIC介质的动态吸附性能 | 第66-84页 |
| 3.1 引言 | 第66页 |
| 3.2 吸附动力学模型 | 第66-67页 |
| 3.3 材料与方法 | 第67-68页 |
| 3.3.1 试剂与仪器 | 第67-68页 |
| 3.3.2 吸附动力学曲线测定 | 第68页 |
| 3.3.3 穿透曲线测定 | 第68页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第68-82页 |
| 3.4.1 配基密度和葡聚糖接枝对hIgG吸附动力学的交互影响 | 第69-71页 |
| 3.4.2 配基密度和pH对hIgG吸附动力学的交互影响 | 第71-74页 |
| 3.4.3 配基密度和盐浓度对hIgG吸附动力学的交互影响 | 第74-77页 |
| 3.4.4 蛋白动态结合载量 | 第77-82页 |
| 3.5 本章小结 | 第82-84页 |
| 第四章 葡聚糖接枝型HCIC介质的蛋白吸附及传质机理 | 第84-122页 |
| 4.1 引言 | 第84页 |
| 4.2 材料与方法 | 第84-93页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第84-86页 |
| 4.2.2 葡聚糖接枝和非接枝HCIC介质制备 | 第86页 |
| 4.2.3 介质配基密度、湿真密度以及粒径测定 | 第86-87页 |
| 4.2.4 蛋白质水力学直径和Zeta电位测定 | 第87页 |
| 4.2.5 介质孔径和孔隙率测定 | 第87-89页 |
| 4.2.6 介质体积的毛细管校准及吸附等温线测定 | 第89页 |
| 4.2.7 吸附动力学曲线测定 | 第89-90页 |
| 4.2.8 共聚焦激光扫描显微镜分析 | 第90-91页 |
| 4.2.9 等温滴定量热仪分析 | 第91-93页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第93-120页 |
| 4.3.1 琼脂糖凝胶的平均粒径与湿真密度 | 第93页 |
| 4.3.2 配基偶联反应温度对介质配基密度的影响 | 第93-94页 |
| 4.3.3 介质的孔径及孔隙率 | 第94-97页 |
| 4.3.4 hIgG和BSA的水力学半径和Zeta电位 | 第97-98页 |
| 4.3.5 蛋白质静态吸附 | 第98-106页 |
| 4.3.6 蛋白质吸附动力学 | 第106-110页 |
| 4.3.7 葡聚糖接枝和非接枝HCIC介质吸附和传质的CLSM分析 | 第110-114页 |
| 4.3.8 葡聚糖接枝和非接枝HCIC介质吸附的ITC分析 | 第114-118页 |
| 4.3.9 葡聚糖接枝HCIC介质的蛋白吸附及传质机理分析 | 第118-120页 |
| 4.4 本章小结 | 第120-122页 |
| 第五章 聚GMA接枝型HCIC介质的制备及吸附性能 | 第122-162页 |
| 5.1 引言 | 第122-123页 |
| 5.2 材料与方法 | 第123-128页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第123-124页 |
| 5.2.2 基质活化 | 第124页 |
| 5.2.3 GMA可控聚合接枝及配基偶联 | 第124-125页 |
| 5.2.4 接枝密度和配基密度测定 | 第125页 |
| 5.2.5 吸附等温线测定 | 第125-126页 |
| 5.2.6 吸附动力学曲线测定 | 第126页 |
| 5.2.7 穿透曲线测定 | 第126页 |
| 5.2.8 层析分离和介质重复使用 | 第126-127页 |
| 5.2.9 SEC-HPLC定量分析 | 第127页 |
| 5.2.10 宿主细胞蛋白(HCP)测定 | 第127-128页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第128-160页 |
| 5.3.1 基质活化 | 第128-129页 |
| 5.3.2 GMA接枝及配基偶联 | 第129-130页 |
| 5.3.3 蛋白质静态吸附 | 第130-138页 |
| 5.3.4 蛋白质吸附动力学 | 第138-142页 |
| 5.3.5 蛋白质动态结合载量 | 第142-149页 |
| 5.3.6 蛋白质结合机制分析 | 第149-155页 |
| 5.3.7 hIgG/HSA混合蛋白分离及介质重复利用 | 第155-158页 |
| 5.3.8 CHO细胞培养液中分离单克隆抗体 | 第158-160页 |
| 5.4 本章小结 | 第160-162页 |
| 第六章 聚GMA接枝型HCIC介质的蛋白吸附及传质机理 | 第162-174页 |
| 6.1 引言 | 第162页 |
| 6.2 材料与方法 | 第162-163页 |
| 6.2.1 试剂与仪器 | 第162-163页 |
| 6.2.2 介质孔径和孔隙率确定 | 第163页 |
| 6.2.3 共聚焦激光扫描显微镜实时观测蛋白质吸附和传质行为 | 第163页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第163-172页 |
| 6.3.1 聚GMA接枝HCIC介质的孔径和孔隙率 | 第163-166页 |
| 6.3.2 聚GMA接枝HCIC介质内hIgG传质和吸附的CLSM分析 | 第166-172页 |
| 6.4 本章小结 | 第172-174页 |
| 第七章 结论与展望 | 第174-178页 |
| 7.1 结论 | 第174-176页 |
| 7.2 展望 | 第176-178页 |
| 参考文献 | 第178-192页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第192-194页 |
| 作者简介 | 第194页 |
