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唐古特白刺果实发育的差异表达基因分析及NtUFGT基因的克隆和功能研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
缩略词第15-16页
第一章 前言第16-29页
    1.1 果实发育的研究进展第16-23页
        1.1.1 植物激素在果实发育过程中的调控作用第16-18页
        1.1.2 转录因子在果实发育过程中的调控第18-19页
        1.1.3 果实发育过程中黄酮类化合物的代谢及调控第19-21页
        1.1.4 果实发育过程中的蔗糖代谢第21-23页
    1.2 转录组测序(RNA-Seq)技术在植物中的应用第23-25页
        1.2.1 转录组测序(RNA-Seq)技术的发展第23-24页
        1.2.2 RNA-Seq技术在植物及果实研究中的应用第24-25页
    1.3 唐古特白刺的应用价值第25-27页
        1.3.1 唐古特白刺的生态价值第25-26页
        1.3.2 唐古特白刺的营养价值第26-27页
    1.4 选题背景和研究意义第27-29页
第二章 唐古特白刺果实转录组测序及表达谱分析第29-52页
    2.1 实验材料第29-31页
        2.1.1 植物材料第29-30页
        2.1.2 试剂与药品第30页
        2.1.3 主要仪器设备第30-31页
    2.2 实验方法第31-37页
        2.2.1 RNA提取及纯化第31-32页
        2.2.2 转录组测序第32-33页
        2.2.3 测序数据输出及de novo组装第33-34页
        2.2.4 转录组数据分析第34-35页
        2.2.5 数字基因表达谱数据分析第35-36页
        2.2.6 差异表达基因筛选第36-37页
    2.3 结果与分析第37-48页
        2.3.1 RNA质量的检测第37-38页
        2.3.2 转录组数据输出第38页
        2.3.3 Unigene的功能注释第38-42页
            2.3.3.1 Nr数据库注释第39-40页
            2.3.3.2 GO数据库注释第40页
            2.3.3.3 COG数据库注释第40-41页
            2.3.3.4 KEGG代谢通路分析第41-42页
        2.3.4 差异表达基因的筛选第42-43页
        2.3.5 差异表达基因的GO功能显著性富集分析第43-45页
        2.3.6 差异表达基因的KEGG Pathway显著性富集分析第45-48页
    2.4 讨论第48-50页
    2.5 小结第50-52页
第三章 筛选的唐古特白刺果实中差异表达基因的聚类分析第52-70页
    3.1 材料和方法第52-54页
        3.1.1 差异表达基因的筛选第52页
        3.1.2 基因表达模式的聚类分析第52-53页
        3.1.3 试剂与药品第53页
        3.1.4 主要仪器设备第53页
        3.1.5 黄酮合成基因的qRT-PCR验证第53-54页
    3.2 结果与分析第54-66页
        3.2.1 植物激素相关差异表达基因表达模式的聚类分析第54-57页
        3.2.2 转录因子相关差异表达基因表达模式的聚类分析第57-60页
        3.2.3 黄酮合成途径差异表达基因表达模式的聚类分析第60-62页
        3.2.4 黄酮合成基因的qRT-PCR验证第62-66页
            3.2.4.1 内参基因和目的基因扩增效率的检测和标准曲线的建立第62-64页
            3.2.4.2 qRT-PCR对基因表达量的分析第64-66页
    3.3 讨论第66-68页
        3.3.1 唐古特白刺果实发育过程中植物激素相关基因的表达分析第66-67页
        3.3.2 唐古特白刺果实发育过程中转录因子的表达分析第67-68页
        3.3.3 唐古特白刺果实发育和成熟过程中黄酮合成相关基因的表达分析第68页
    3.4 小结第68-70页
第四章 唐古特白刺类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因(NtUFGT)的克隆和功能研究第70-88页
    4.1 实验材料第70-71页
        4.1.1 植物材料和菌株第70页
        4.1.2 试剂与药品第70-71页
        4.1.3 主要仪器设备第71页
    4.2 实验方法第71-76页
        4.2.1 NtUFGT基因的克隆第71-72页
        4.2.2 NtUFGT基因的生物信息学分析第72-73页
        4.2.3 NtUFGT基因的组织特异性分析第73页
        4.2.4 NtUFGT基因植物表达载体的构建和拟南芥转化第73-75页
            4.2.4.1 植物表达载体pPZP221的构建第73页
            4.2.4.2 NtUFGT基因转化农杆菌第73-74页
            4.2.4.3 浸花序法侵染拟南芥第74页
            4.2.4.4 转NtUFGT基因拟南芥植株的筛选和鉴定第74-75页
        4.2.5 转NtUFGT基因拟南芥的分析第75-76页
            4.2.5.1 转NtUFGT基因拟南芥的形态学分析第75页
            4.2.5.2 转NtUFGT基因拟南芥在UV-B胁迫下的花青素和原花青素含量的检测第75-76页
    4.3 结果与分析第76-86页
        4.3.1 NtUFGT基因的克隆第76-77页
        4.3.2 NtUFGT基因序列的生物信息学分析第77-79页
        4.3.3 NtUFGT基因的组织特异性表达第79页
        4.3.4 植物表达载体的构建第79-81页
        4.3.5 转NtUFGT基因拟南芥植株的筛选和鉴定第81-82页
        4.3.6 转NtUFGT基因拟南芥的鲜重及根长的检测第82-83页
        4.3.7 转NtUFGT基因拟南芥在UV-B胁迫下花青素和原花青素含量的检测第83-86页
            4.3.7.1 转NtUFGT基因拟南芥在UV-B胁迫下花青素含量的检测第84-85页
            4.3.7.2 转NtUFGT基因拟南芥在UV-B胁迫下原花青素含量的检测第85-86页
    4.4 讨论第86-87页
    4.5 小结第87-88页
第五章 唐古特白刺果实发育过程中蔗糖代谢相关分析第88-102页
    5.1 实验材料第88-89页
        5.1.1 植物材料第88页
        5.1.2 试剂与药品第88-89页
        5.1.3 主要仪器设备第89页
    5.2 实验方法第89-94页
        5.2.1 基因表达模式的聚类分析第89页
        5.2.2 唐古特白刺果实中淀粉含量的测定第89-90页
        5.2.3 唐古特白刺果实中蔗糖含量的测定第90页
        5.2.4 唐古特白剌果实中葡萄糖含量的测定第90-91页
        5.2.5 唐古特白刺果实中果糖含量的测定第91-92页
        5.2.6 唐古特白剌果实中蔗糖合成酶(SS)活性的测定第92页
        5.2.7 唐古特白剌果实中蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的测定第92-93页
        5.2.8 唐古特白刺果实中酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)活性的测定第93-94页
    5.3 结果分析第94-99页
        5.3.1 唐古特白刺果实不同发育阶段蔗糖和淀粉代谢相关基因的聚类分析第94-96页
        5.3.2 唐古特白剌果实不同发育阶段淀粉和蔗糖含量的测定第96-97页
        5.3.3 唐古特白刺果实不同发育阶段葡萄糖和果糖含量的测定第97-98页
        5.3.4 唐古特白刺果实不同发育阶段SS和SPS活性的测定第98页
        5.3.5 唐古特白刺果实不同发育阶段AI和NI活性的测定第98-99页
    5.4 讨论第99-101页
    5.5 小结第101-102页
第六章 结论与讨论第102-104页
参考文献第104-112页
附录第112-116页
攻读学位期间发表的论文第116-117页
致谢第117页

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