中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第10-12页 |
第一部分:尼克酰胺甲基转移酶在胃癌组织中的表达及预后影响 | 第12-31页 |
材料 | 第12-15页 |
1、TCGA数据库 | 第12-13页 |
2、组织标本 | 第13页 |
3、实验试剂 | 第13-14页 |
4、实验仪器 | 第14页 |
5、引物 | 第14-15页 |
方法 | 第15-20页 |
1、总RNA的提取(Trizol法) | 第15页 |
2、逆转录cDNA | 第15-16页 |
3、实时荧光定量PCR | 第16页 |
4、组织芯片的制备 | 第16-17页 |
5、免疫组化分析 | 第17-18页 |
6、统计学分析 | 第18-20页 |
结果 | 第20-22页 |
一、TCGA数据库分析 | 第20页 |
二、NNMT在胃癌及癌旁组织中的表达情况 | 第20页 |
三、NNMT的表达与胃癌临床病理特征的关系 | 第20-21页 |
四、NNMT的表达与胃癌预后的关系 | 第21-22页 |
附图表 | 第22-31页 |
第二部分:尼克酰胺甲基转移酶影响胃癌细胞生物学功能 | 第31-50页 |
材料 | 第31-36页 |
一、实验材料 | 第31-34页 |
1、细胞株与培养基 | 第31页 |
2、实时荧光定量PCR试剂 | 第31-32页 |
3、Western Blot相关试剂 | 第32页 |
4、siRNA及细胞转染相关试剂 | 第32页 |
5、与细胞功能学有关的实验试剂 | 第32-33页 |
6、相关培养基及溶液的配置 | 第33-34页 |
二、实验仪器及耗材 | 第34-36页 |
方法 | 第36-44页 |
1、细胞培养 | 第36页 |
2、实时荧光定量PCR检测mRNA表达 | 第36-38页 |
3、Western blot蛋白测定 | 第38-40页 |
4、Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移 | 第40-41页 |
5、碘化丙锭PI单染法检测细胞周期 | 第41页 |
6、CCK8实验检测细胞增殖能力 | 第41页 |
7、细胞转染 | 第41-42页 |
8、生物信息学分析 | 第42页 |
9、裸鼠成瘤实验 | 第42-43页 |
10、统计学分析 | 第43-44页 |
结果 | 第44-46页 |
1. NNMT在胃癌细胞系中的表达情况 | 第44页 |
2. 沉默NNMT胃癌细胞系的构建 | 第44页 |
3. 沉默NNMT对胃癌细胞系MGC803和BGC823迁移和侵袭能力的影响 | 第44页 |
4. 沉默NNMT对胃癌细胞系MGC803和BGC823细胞周期和增殖能力的影响 | 第44-45页 |
5. 沉默NNMT对裸鼠成瘤能力的影响 | 第45页 |
6. 沉默NNMT后可能影响的信号通路 | 第45-46页 |
附图表 | 第46-50页 |
讨论 | 第50-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
文献综述 | 第61-75页 |
1. NNMT在多种肿瘤中的异常表达 | 第62-64页 |
2. NNMT影响肿瘤细胞的生物学功能及其机制 | 第64-66页 |
3. NNMT与肿瘤患者预后的关系 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录 | 第75-77页 |
附录1:攻读学位期间发表文章 | 第75-76页 |
附录2:缩略词表 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |