摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1.1 NAC转录因子研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 NAC转录因子的结构特征及分类 | 第11-12页 |
1.1.2 NAC转录因子的生物学功能 | 第12-14页 |
1.1.3 NAC转录因子的表达调控 | 第14-15页 |
1.2 非生物胁迫 | 第15-17页 |
1.2.1 干旱胁迫 | 第15-16页 |
1.2.2 盐胁迫 | 第16页 |
1.2.3 高温胁迫 | 第16-17页 |
1.2.4 低温胁迫 | 第17页 |
1.3 激素 | 第17-18页 |
1.3.1 脱落酸(ABA) | 第17页 |
1.3.2 水杨酸(SA) | 第17-18页 |
1.3.3 茉莉酸类物质(JAs) | 第18页 |
1.4 RNA干扰(RNA interference, RNAi) | 第18-22页 |
1.4.1 植物RNAi技术 | 第18页 |
1.4.2 RNAi的作用机制 | 第18-19页 |
1.4.3 植物RNAi的特点 | 第19-21页 |
1.4.4 RNAi技术及其在植物中的应用 | 第21-22页 |
1.5 本研究背景、目的及意义 | 第22-23页 |
1.6 本研究主要内容及技术路线 | 第23-24页 |
第二章 非生物胁迫和激素处理下番茄幼苗中NAC的表达分析 | 第24-37页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 实验器具处理 | 第25页 |
2.1.5 试剂 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-30页 |
2.2.1 短期处理 | 第25-26页 |
2.2.2 长期处理 | 第26页 |
2.2.3 总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.4 RNA的消化 | 第27页 |
2.2.5 RNA质量检测 | 第27页 |
2.2.6 cDNA的合成 | 第27-28页 |
2.2.7 引物的设计与合成 | 第28页 |
2.2.8 PCR扩增反应 | 第28-29页 |
2.2.9 PCR扩增产物回收测序 | 第29页 |
2.2.10 实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
2.2.11 统计分析 | 第30页 |
2.3 实验结果 | 第30-36页 |
2.3.1 总RNA的检测 | 第30-31页 |
2.3.2 PCR扩增目的基因SNAC4-9 和 β-tublin | 第31页 |
2.3.3 SNAC4~9 在胁迫短期处理下的表达分析 | 第31-32页 |
2.3.4 SNAC4~9 在激素短期处理下的表达分析 | 第32-34页 |
2.3.5 SNAC4-9 在激素和胁迫长期处理下的表达分析 | 第34-36页 |
2.4 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 非生物胁迫和激素处理下番茄幼苗相关生理指标的分析 | 第37-48页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 植物材料 | 第37页 |
3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
3.1.3 试剂 | 第37-38页 |
3.2 实验方法 | 第38-42页 |
3.2.1 脯氨酸的测定 | 第38-39页 |
3.2.2 酶液的制备 | 第39页 |
3.2.3 丙二醛含量的测定 | 第39页 |
3.2.4 POD活性的测定 | 第39-40页 |
3.2.5 SOD活性的测定 | 第40页 |
3.2.6 CAT活性的测定[116] | 第40-41页 |
3.2.7 APX活性的测定 | 第41-42页 |
3.3 实验结果 | 第42-46页 |
3.3.1 短期胁迫和激素处理下番茄幼苗的相关生理指标的分析 | 第42-45页 |
3.3.2 长期胁迫和激素处理下番茄幼苗的相关生理指标的分析 | 第45-46页 |
3.4 本章小结 | 第46-48页 |
第四章 RNAi载体的构建 | 第48-61页 |
4.1 材料与试剂 | 第48-50页 |
4.1.1 供试材料 | 第48-49页 |
4.1.2 实验仪器 | 第49-50页 |
4.1.3 培养基及溶液的配置 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-55页 |
4.2.1 质粒DNA的提取 | 第50页 |
4.2.2 PCR反应 | 第50页 |
4.2.3 DNA琼脂糖凝胶回收 | 第50页 |
4.2.4 DNA片段与载体的连接 | 第50-51页 |
4.2.5 限制性内切酶反应 | 第51页 |
4.2.6 大肠杆菌的转化 | 第51页 |
4.2.7 表达载体pBI121-SNAC4~9 的构建 | 第51-53页 |
4.2.8 目的片段的同源性比较分析 | 第53-55页 |
4.3 实验结果 | 第55-60页 |
4.3.1 SNAC4~9 正反向插入片段的PCR扩增结果 | 第55页 |
4.3.2 SNAC4~9 正反向插入片段与T载体连接重组子的鉴定 | 第55-57页 |
4.3.3 SNAC4~9 反向插入片段插入pSK-int载体后重组子的鉴定 | 第57-59页 |
4.3.4 SNAC4~9 正向插入片段插入pSK载体后重组子的鉴定 | 第59页 |
4.3.5 SNAC4~9 正反向插入片段插入pBI121载体后重组子的鉴定 | 第59-60页 |
4.4 本章小结 | 第60-61页 |
第五章 全文结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-72页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |