摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
文献综述 | 第11-18页 |
第一章 子宫内膜上皮细胞、miR-182、NTS和TES的研究进展 | 第11-18页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 子宫内膜上皮细胞的研究概况 | 第11-13页 |
1.2.1 子宫内膜的形态变化和功能 | 第11-12页 |
1.2.2 子宫内膜上皮细胞研究进展 | 第12-13页 |
1.3 miR-182 的研究概况 | 第13-14页 |
1.4 NTS的研究进展 | 第14-15页 |
1.5 TES基因研究概况 | 第15-16页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第16页 |
1.7 研究的思路和技术路线 | 第16-18页 |
试验研究 | 第18-41页 |
第二章 miR-182 对NTS和TES的靶向调控作用研究 | 第18-29页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 材料和方法 | 第18-24页 |
2.2.1 样品采集和细胞获取 | 第18页 |
2.2.2 主要仪器 | 第18-19页 |
2.2.3 主要试剂 | 第19页 |
2.2.4 奶山羊子宫内膜cDNA获取 | 第19-20页 |
2.2.5 miR-182 的靶基因预测 | 第20页 |
2.2.6 psiCHECK-2 双荧光素酶报告载体和突变载体的构建 | 第20-22页 |
2.2.7 miR-182 模拟物的合成 | 第22页 |
2.2.8 奶山羊子宫内膜上皮细胞(EEC)和 293T细胞的培养 | 第22页 |
2.2.9 细胞转染和荧光素酶检测 | 第22页 |
2.2.10 Real-time PCR和Western Blot检测 | 第22-24页 |
2.2.11 统计学分析 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-27页 |
2.3.1 miR-182 靶基因的预测 | 第24-25页 |
2.3.2 psiCHECK2-NTS-3'UTR、psiCHECK2-TES-CDS载体构建 | 第25-26页 |
2.3.3 荧光素酶活性检测结果 | 第26页 |
2.3.4 Real-time PCR和Western Blot检测miR-182 对NTS和TES的影响 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-28页 |
2.5 小结 | 第28-29页 |
第三章 NTS、TES对EEC凋亡的调控作用 | 第29-41页 |
3.1 引言 | 第29-30页 |
3.2 材料与方法 | 第30-32页 |
3.2.1 样品采集 | 第30页 |
3.2.2 主要仪器 | 第30页 |
3.2.3 主要试剂 | 第30页 |
3.2.4 pcDNA3.1(+) 过表达载体的构建 | 第30-31页 |
3.2.5 EEC的培养和转染 | 第31-32页 |
3.2.6 Real-time PCR和Western Blot检测 | 第32页 |
3.2.7 细胞凋亡检测 | 第32页 |
3.2.8 数据处理 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-39页 |
3.3.1 NTS、TES基因CDS区扩增结果 | 第32-33页 |
3.3.2 过表达载体构建 | 第33-34页 |
3.3.3 过表达效率验证 | 第34-35页 |
3.3.4 NTS和TES过表达对EEC凋亡的影响 | 第35页 |
3.3.5 过表达NTS、TES对Caspase-8 和p38的调节作用。 | 第35-36页 |
3.3.6 过表达mi R-182 对Caspase-8 和p38蛋白的影响 | 第36-37页 |
3.3.7 过表达NTS对TES的影响 | 第37-38页 |
3.3.8 过表达TES对NTS的影响 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
3.5 小结 | 第40-41页 |
结论 | 第41页 |
创新 点 | 第41页 |
进一步研究的问题 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
附录 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |