摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-29页 |
1 苏云金芽孢杆菌的质粒及多态性与功能 | 第11-17页 |
·Bt菌质粒多态性 | 第11-14页 |
·质粒的功能 | 第14-17页 |
2 Bt菌杀线虫的研究概况 | 第17-21页 |
·Bt菌杀线虫的研究历史 | 第17页 |
·杀线虫的Bt蛋白 | 第17-18页 |
·杀线虫晶体蛋白的作用机理 | 第18-19页 |
·美洲钩虫(Necator americanus)的危害和防治 | 第19-21页 |
3 脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理与应用 | 第21-27页 |
·脉冲场凝胶电泳的原理 | 第22-23页 |
·脉冲场凝胶电泳的种类 | 第23-24页 |
·脉冲场电泳主要的影响因素 | 第24-26页 |
·脉冲场凝胶电泳的应用 | 第26-27页 |
4 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 30株苏云金芽孢杆菌野生菌株大质粒谱的分析 | 第29-39页 |
1 材料与方法 | 第29-35页 |
·供试菌株 | 第29-31页 |
·培养基 | 第31页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·琼脂糖包埋法提取大质粒 | 第33页 |
·脉冲场凝胶电泳电泳(PFGE) | 第33-35页 |
2 结果与分析 | 第35-38页 |
·野生Bt菌株大质粒(Ⅱ型质粒)数量的多样性 | 第35页 |
·野生Bt菌株大质粒(Ⅱ型质粒)大小的多样性 | 第35-38页 |
3 小结 | 第38-39页 |
第三章 Bt分离株毒杀美洲钩虫的活性鉴定 | 第39-51页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
·供试菌株 | 第39页 |
·美洲钩虫(Necator americanus) | 第39页 |
·材料及试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·晶体蛋白的制备及检测 | 第40-42页 |
·美洲钩虫卵的采集及钩蚴培养 | 第42-43页 |
·Bt菌株蛋白对美洲钩虫Ⅱ期杆状蚴的毒力分析 | 第43-44页 |
·Bt菌株蛋白对美洲钩虫Ⅲ期丝状蚴的毒力分析 | 第44页 |
·晶体蛋白浓度测定 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-50页 |
·晶体蛋白的制备 | 第44页 |
·美洲钩虫卵的采集及培养 | 第44-46页 |
·菌株蛋白对美洲钩虫毒力活性初筛 | 第46-47页 |
·S2096-2毒杀美洲钩虫Ⅱ期杆状蚴的活性鉴定 | 第47-50页 |
3 小结 | 第50-51页 |
第四章 cry40Da1的异源表达分析 | 第51-58页 |
1 材料与方法 | 第51-55页 |
·菌株和质粒 | 第51页 |
·常用抗生素及其浓度 | 第51页 |
·主要试剂和溶液 | 第51-52页 |
·PCR扩增 | 第52-53页 |
·异源表达载体的构建 | 第53-54页 |
·酶切验证 | 第54-55页 |
·SDS-PAGE检测cry40Da1的表达 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-57页 |
·PCR扩增cry40Da1基因 | 第55页 |
·表达载体的构建与验证 | 第55-56页 |
·cry40Da1的表达 | 第56-57页 |
3 小结 | 第57-58页 |
第五章 讨论 | 第58-60页 |
1 关于Bt菌株大质粒的多样性 | 第58页 |
2 杀线虫晶体蛋白的作用机理 | 第58-59页 |
3 Bt蛋白的表达 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
硕士学位期间发表论文及研究成果情况 | 第75页 |