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30株野生Bt菌株的大质粒谱分析及晶体蛋白毒杀美洲钩虫(Necator americanus)的活性鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 前言第11-29页
 1 苏云金芽孢杆菌的质粒及多态性与功能第11-17页
   ·Bt菌质粒多态性第11-14页
   ·质粒的功能第14-17页
 2 Bt菌杀线虫的研究概况第17-21页
   ·Bt菌杀线虫的研究历史第17页
   ·杀线虫的Bt蛋白第17-18页
   ·杀线虫晶体蛋白的作用机理第18-19页
   ·美洲钩虫(Necator americanus)的危害和防治第19-21页
 3 脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理与应用第21-27页
   ·脉冲场凝胶电泳的原理第22-23页
   ·脉冲场凝胶电泳的种类第23-24页
   ·脉冲场电泳主要的影响因素第24-26页
   ·脉冲场凝胶电泳的应用第26-27页
 4 本研究的目的和意义第27-29页
第二章 30株苏云金芽孢杆菌野生菌株大质粒谱的分析第29-39页
 1 材料与方法第29-35页
   ·供试菌株第29-31页
   ·培养基第31页
   ·试剂第31-32页
   ·主要仪器第32-33页
   ·琼脂糖包埋法提取大质粒第33页
   ·脉冲场凝胶电泳电泳(PFGE)第33-35页
 2 结果与分析第35-38页
   ·野生Bt菌株大质粒(Ⅱ型质粒)数量的多样性第35页
   ·野生Bt菌株大质粒(Ⅱ型质粒)大小的多样性第35-38页
 3 小结第38-39页
第三章 Bt分离株毒杀美洲钩虫的活性鉴定第39-51页
 1 材料与方法第39-44页
   ·供试菌株第39页
   ·美洲钩虫(Necator americanus)第39页
   ·材料及试剂第39-40页
   ·主要仪器第40页
   ·晶体蛋白的制备及检测第40-42页
   ·美洲钩虫卵的采集及钩蚴培养第42-43页
   ·Bt菌株蛋白对美洲钩虫Ⅱ期杆状蚴的毒力分析第43-44页
   ·Bt菌株蛋白对美洲钩虫Ⅲ期丝状蚴的毒力分析第44页
   ·晶体蛋白浓度测定第44页
 2 结果与分析第44-50页
   ·晶体蛋白的制备第44页
   ·美洲钩虫卵的采集及培养第44-46页
   ·菌株蛋白对美洲钩虫毒力活性初筛第46-47页
   ·S2096-2毒杀美洲钩虫Ⅱ期杆状蚴的活性鉴定第47-50页
 3 小结第50-51页
第四章 cry40Da1的异源表达分析第51-58页
 1 材料与方法第51-55页
   ·菌株和质粒第51页
   ·常用抗生素及其浓度第51页
   ·主要试剂和溶液第51-52页
   ·PCR扩增第52-53页
   ·异源表达载体的构建第53-54页
   ·酶切验证第54-55页
   ·SDS-PAGE检测cry40Da1的表达第55页
 2 结果与分析第55-57页
   ·PCR扩增cry40Da1基因第55页
   ·表达载体的构建与验证第55-56页
   ·cry40Da1的表达第56-57页
 3 小结第57-58页
第五章 讨论第58-60页
 1 关于Bt菌株大质粒的多样性第58页
 2 杀线虫晶体蛋白的作用机理第58-59页
 3 Bt蛋白的表达第59-60页
参考文献第60-68页
附录第68-73页
致谢第73-75页
硕士学位期间发表论文及研究成果情况第75页

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