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南极冰藻GPx、GST和SAHH基因的克隆、定量分析及原核表达载体的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
1 前言第13-23页
   ·南极冰藻第13-16页
     ·南极冰藻的生长环境第13-14页
     ·南极冰藻的国内外研究现状及生态学意义第14页
     ·南极冰藻的应用前景第14-16页
     ·展望第16页
   ·谷胱甘肽的性质及生理功能第16页
   ·谷胱甘肽过氧化物酶第16-19页
     ·动物谷胱甘肽过氧化物酶的分类和结构第17页
     ·谷胱甘肽过氧化物酶的生物学功能第17-18页
     ·植物中的谷胱甘肽过氧化物酶第18-19页
   ·谷胱甘肽硫转移酶第19-20页
     ·谷胱甘肽硫转移酶的分类和结构第19-20页
     ·谷胱甘肽硫转移酶的生物学功能第20页
   ·S-腺苷同型半胱氨酸水解酶第20-22页
     ·S-腺苷同型半胱氨酸水解酶的基本结构第21页
     ·SAHH 的国内外研究进展第21-22页
   ·研究目的及意义第22-23页
     ·研究目的第22页
     ·研究意义第22-23页
2 GPx、GST 和SAHH 全长基因的克隆及序列分析第23-56页
   ·材料第23-25页
     ·藻种来源第23页
     ·质粒与受体菌第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要工具酶及试剂盒第24页
     ·主要溶液和试剂的配制第24-25页
   ·实验方法第25-35页
     ·冰藻的培养第25页
     ·南极冰藻总RNA 的提取第25页
     ·感受态细胞的制备第25-26页
     ·南极冰藻GPx、GST、SAHH 基因的RACE 克隆第26-35页
     ·生物信息学分析第35页
   ·结果与分析第35-52页
     ·总RNA 的质量鉴定第35-36页
     ·3’RACE cDNA 一链的合成第36页
     ·ICE-LGPx 基因的克隆结果与分析第36-42页
     ·ICE-LGST 基因的克隆结果与分析第42-47页
     ·ICE-LSAHH 基因的克隆结果及分析第47-52页
   ·讨论第52-56页
     ·ICE-LGPx 基因第52-54页
     ·ICE-LGST 基因第54页
     ·ICE-LSAHH 基因第54-56页
3 南极冰藻在不同条件下的差异表达研究第56-62页
   ·试剂及仪器第56页
   ·实验方法第56-58页
     ·引物设计第56-57页
     ·实验设计第57页
     ·总RNA 的DNase Ⅰ消化第57页
     ·扩增效率的确定第57-58页
     ·荧光定量PCR第58页
     ·数据统计与分析第58页
   ·结果与分析第58-60页
     ·ICE-LGPx 和ICE-LGST 基因在不同CdCl_2浓度下的表达分析第58-59页
     ·ICE-LGPx 与ICE-LGST 基因在不同盐度下的表达分析第59-60页
   ·讨论第60-62页
4 原核表达载体的构建第62-72页
   ·实验材料第62-63页
     ·藻种与培养条件第62页
     ·质粒与受体菌第62页
     ·主要工具酶及试剂盒第62页
     ·主要试剂第62页
     ·主要仪器第62-63页
   ·实验方法第63-68页
     ·重组表达质粒pET28-GPx 的构建第63-66页
     ·重组表达质粒pET28-GST 的构建第66-68页
   ·实验结果第68-70页
     ·重组表达质粒pET28-GPx 的构建第68-69页
     ·重组表达质粒pET28-GST 的构建第69-70页
   ·讨论第70-72页
5 结论第72-74页
   ·Chlamydomonas sp. ICE-LGPX 基因的克隆第72页
   ·Chlamydomonas sp. ICE-LGST 基因的克隆第72页
   ·Chlamydomonas sp. ICE-LSAHH 基因的克隆第72页
   ·ICE-LGPX 与ICE-LGST 差异表达分析第72-73页
   ·原核表达载体的构建第73-74页
参考文献第74-85页
致谢第85-86页
附录第86-87页
作者简介第87-89页
导师简介第89页

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