摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
1 前言 | 第13-23页 |
·南极冰藻 | 第13-16页 |
·南极冰藻的生长环境 | 第13-14页 |
·南极冰藻的国内外研究现状及生态学意义 | 第14页 |
·南极冰藻的应用前景 | 第14-16页 |
·展望 | 第16页 |
·谷胱甘肽的性质及生理功能 | 第16页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶 | 第16-19页 |
·动物谷胱甘肽过氧化物酶的分类和结构 | 第17页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶的生物学功能 | 第17-18页 |
·植物中的谷胱甘肽过氧化物酶 | 第18-19页 |
·谷胱甘肽硫转移酶 | 第19-20页 |
·谷胱甘肽硫转移酶的分类和结构 | 第19-20页 |
·谷胱甘肽硫转移酶的生物学功能 | 第20页 |
·S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 | 第20-22页 |
·S-腺苷同型半胱氨酸水解酶的基本结构 | 第21页 |
·SAHH 的国内外研究进展 | 第21-22页 |
·研究目的及意义 | 第22-23页 |
·研究目的 | 第22页 |
·研究意义 | 第22-23页 |
2 GPx、GST 和SAHH 全长基因的克隆及序列分析 | 第23-56页 |
·材料 | 第23-25页 |
·藻种来源 | 第23页 |
·质粒与受体菌 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·主要工具酶及试剂盒 | 第24页 |
·主要溶液和试剂的配制 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·冰藻的培养 | 第25页 |
·南极冰藻总RNA 的提取 | 第25页 |
·感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
·南极冰藻GPx、GST、SAHH 基因的RACE 克隆 | 第26-35页 |
·生物信息学分析 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-52页 |
·总RNA 的质量鉴定 | 第35-36页 |
·3’RACE cDNA 一链的合成 | 第36页 |
·ICE-LGPx 基因的克隆结果与分析 | 第36-42页 |
·ICE-LGST 基因的克隆结果与分析 | 第42-47页 |
·ICE-LSAHH 基因的克隆结果及分析 | 第47-52页 |
·讨论 | 第52-56页 |
·ICE-LGPx 基因 | 第52-54页 |
·ICE-LGST 基因 | 第54页 |
·ICE-LSAHH 基因 | 第54-56页 |
3 南极冰藻在不同条件下的差异表达研究 | 第56-62页 |
·试剂及仪器 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-58页 |
·引物设计 | 第56-57页 |
·实验设计 | 第57页 |
·总RNA 的DNase Ⅰ消化 | 第57页 |
·扩增效率的确定 | 第57-58页 |
·荧光定量PCR | 第58页 |
·数据统计与分析 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-60页 |
·ICE-LGPx 和ICE-LGST 基因在不同CdCl_2浓度下的表达分析 | 第58-59页 |
·ICE-LGPx 与ICE-LGST 基因在不同盐度下的表达分析 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
4 原核表达载体的构建 | 第62-72页 |
·实验材料 | 第62-63页 |
·藻种与培养条件 | 第62页 |
·质粒与受体菌 | 第62页 |
·主要工具酶及试剂盒 | 第62页 |
·主要试剂 | 第62页 |
·主要仪器 | 第62-63页 |
·实验方法 | 第63-68页 |
·重组表达质粒pET28-GPx 的构建 | 第63-66页 |
·重组表达质粒pET28-GST 的构建 | 第66-68页 |
·实验结果 | 第68-70页 |
·重组表达质粒pET28-GPx 的构建 | 第68-69页 |
·重组表达质粒pET28-GST 的构建 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
5 结论 | 第72-74页 |
·Chlamydomonas sp. ICE-LGPX 基因的克隆 | 第72页 |
·Chlamydomonas sp. ICE-LGST 基因的克隆 | 第72页 |
·Chlamydomonas sp. ICE-LSAHH 基因的克隆 | 第72页 |
·ICE-LGPX 与ICE-LGST 差异表达分析 | 第72-73页 |
·原核表达载体的构建 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
附录 | 第86-87页 |
作者简介 | 第87-89页 |
导师简介 | 第89页 |