| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 1 绪论 | 第13-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-35页 |
| 2.1 实验仪器及耗材 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.2 实验耗材与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.2.1 实验细胞系的培养及处理 | 第19页 |
| 2.2.2 实验动物的来源与饲养 | 第19-20页 |
| 2.2.3 常用试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.4 抗体信息 | 第22页 |
| 2.3 常用缓冲液配方 | 第22-26页 |
| 2.3.1 分子克隆相关缓冲液 | 第22-23页 |
| 2.3.2 蛋白免疫印迹缓冲液 | 第23-25页 |
| 2.3.3 免疫荧光相关缓冲液 | 第25-26页 |
| 2.4 实验方法步骤 | 第26-35页 |
| 2.4.1 MTT法检测细胞增殖抑制情况 | 第26页 |
| 2.4.2 克隆形成实验检测细胞增殖抑制情况 | 第26页 |
| 2.4.3 Western Blot | 第26-27页 |
| 2.4.4 Dot Blot | 第27-28页 |
| 2.4.5 细胞免疫荧光实验 | 第28-29页 |
| 2.4.6 实时定量PCR | 第29-31页 |
| 2.4.7 重硫酸盐测序 | 第31-32页 |
| 2.4.8 组织免疫荧光 | 第32-33页 |
| 2.4.9 组织免疫组化 | 第33-35页 |
| 3 实验结果与分析 | 第35-55页 |
| 3.1 恶性卵巢癌组织5hmC含量低于正常组织 | 第35-37页 |
| 3.1.1 收集的临床样本5hmC的免疫组化结果 | 第35-36页 |
| 3.1.2 卵巢癌组织芯片5hmC的免疫组化结果 | 第36页 |
| 3.1.3 小结与讨论 | 第36-37页 |
| 3.2 CUL4-DDB1 E3泛素连接酶调节卵巢癌细胞系中5hmC含量 | 第37-40页 |
| 3.2.1 TET调节卵巢癌细胞系中5hmC含量 | 第37-38页 |
| 3.2.2 CUL4-DDB1 E3泛素连接酶功能破坏后显著降低卵巢癌细胞系中5hmC含量 | 第38-39页 |
| 3.2.3 小结与讨论 | 第39-40页 |
| 3.3 TET1抑制卵巢癌细胞增殖 | 第40-44页 |
| 3.3.1 包装TET1过表达慢病毒 | 第40-41页 |
| 3.3.2 过表达TET1抑制卵巢癌细胞增殖 | 第41-42页 |
| 3.3.3 过表达TET1抑制卵巢癌细胞克隆形成 | 第42-43页 |
| 3.3.4 过表达TET1抑制卵巢癌细胞克隆大小 | 第43页 |
| 3.3.5 RNA干扰Tet1促进卵巢癌细胞增殖及克隆形成 | 第43-44页 |
| 3.3.6 小结与讨论 | 第44页 |
| 3.4 TET1抑制肿瘤生长 | 第44-49页 |
| 3.4.1 过表达TET1抑制肿瘤生长 | 第44-46页 |
| 3.4.2 过表达TET1促进肿瘤组织DNA damage和凋亡 | 第46-48页 |
| 3.4.3 RNA干扰Tet1促进肿瘤生长 | 第48-49页 |
| 3.4.4 RNA干扰Tet1促进肿瘤组织生长并降低DNA damage | 第49页 |
| 3.4.5 小结与讨论 | 第49页 |
| 3.5 TET1蛋白抑制卵巢癌细胞增殖及肿瘤生长的分子机制 | 第49-53页 |
| 3.5.1 RNA-Seq结果及分析 | 第49-50页 |
| 3.5.2 RT-FCR验证RNA-Seq结果 | 第50-51页 |
| 3.5.3 TET1过表达使Rassf5启动子区域发生去甲基化 | 第51页 |
| 3.5.4 TET1调节RASSF5表达 | 第51-52页 |
| 3.5.5 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 3.6 RNA干扰Rassf5可以部分挽救卵巢癌中TET1过表达导致的表型 | 第53-55页 |
| 3.6.1 Rassf5 RNA干扰效果检测 | 第53页 |
| 3.6.2 干扰RASSF5可以部分挽救TET1抑制卵巢癌细胞增殖的表型 | 第53-54页 |
| 3.6.3 干扰RASSF5可以部分挽救TET1抑制卵巢癌细胞克隆形成的表型 | 第54页 |
| 3.6.4 小结与讨论 | 第54-55页 |
| 4 总结与讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 总结 | 第55-56页 |
| 4.2 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第63页 |
