摘要 | 第7-8页 |
1 前言 | 第8-14页 |
1.1 植物内生细菌的生物学作用 | 第8-10页 |
1.1.1 内生细菌的固氮作用 | 第8-9页 |
1.1.2 内生细菌促进植物生长的作用 | 第9页 |
1.1.3 抗逆境、抗病虫害等作用 | 第9-10页 |
1.1.4 增加宿主植物的他感作用 | 第10页 |
1.2 内生细菌的防病机制 | 第10-11页 |
1.2.1 拮抗作用 | 第10-11页 |
1.2.2 诱导抗性 | 第11页 |
1.2.3 抗菌物质的产生 | 第11页 |
1.3 植物内生细菌在生物防治中的应用 | 第11-12页 |
1.3.1 作为生物防治菌株直接用于生产 | 第12页 |
1.3.2 内生工程菌的构建 | 第12页 |
1.3.3 作为采后果实和蔬菜的保鲜剂 | 第12页 |
1.4 植物内生细菌的研究前景及存在问题 | 第12-13页 |
1.5 丹参植物概述 | 第13页 |
1.6 研究目的及意义 | 第13-14页 |
2. 材料与方法 | 第14-22页 |
2.1. 材料 | 第14-15页 |
2.1.1 供试内生细菌 | 第14页 |
2.1.2 供试植物病原真菌 | 第14页 |
2.1.3 供试培养基 | 第14页 |
2.1.4 供试试剂 | 第14页 |
2.1.5 主要仪器 | 第14-15页 |
2.2 内生细菌的分离筛选 | 第15-16页 |
2.2.1 丹参内生细菌的分离纯化 | 第15页 |
2.2.2 丹参内生细菌的初筛 | 第15页 |
2.2.3 丹参内生菌株的抑菌谱测定 | 第15-16页 |
2.2.4 丹参内生细菌代谢物的抑菌活性研究 | 第16页 |
2.3 菌株鉴定 | 第16-17页 |
2.3.1 形态鉴定 | 第16页 |
2.3.2 生理生化鉴定 | 第16页 |
2.3.3 分子生物学鉴定 | 第16-17页 |
2.4 发酵条件的优化 | 第17-19页 |
2.4.1 种子发酵液的制备 | 第17页 |
2.4.2 菌株DS-1生长规律 | 第17页 |
2.4.3 基础培养基的筛选 | 第17页 |
2.4.4 最佳碳源的筛选 | 第17-18页 |
2.4.5 最佳氮源的筛选 | 第18页 |
2.4.6 培养条件的优化 | 第18页 |
2.4.7 实验的测定方法 | 第18-19页 |
2.5 蛋白的分离纯化 | 第19-21页 |
2.5.1 DS-1最佳有机溶剂的萃取 | 第19页 |
2.5.2 抗菌蛋白的分级盐析 | 第19页 |
2.5.3 菌株粗提物的稳定性研究 | 第19-20页 |
2.5.3.1 热稳定性 | 第19页 |
2.5.3.2 酸碱稳定性 | 第19-20页 |
2.5.3.3 紫外辐射稳定性 | 第20页 |
2.5.4 蛋白的纯化 | 第20页 |
2.5.4.1 装柱 | 第20页 |
2.5.4.2 柱平衡 | 第20页 |
2.5.4.3 上样 | 第20页 |
2.5.4.4 洗脱和收集 | 第20页 |
2.5.5 菌株粗提物对病原菌菌丝形态的影响 | 第20-21页 |
2.6 促生和生防 | 第21-22页 |
2.6.1 内生细菌对种子萌发的影响 | 第21页 |
2.6.2 田间药效试验 | 第21-22页 |
3、结果与分析 | 第22-39页 |
3.1 内生细菌的分离纯化及活性测定 | 第22-26页 |
3.1.1 拮抗细菌的筛选 | 第22页 |
3.1.2 内生细菌的抑菌谱测定 | 第22-24页 |
3.1.3 发酵液抑菌活性及广谱性测定 | 第24-26页 |
3.2 内生拮抗菌的鉴定 | 第26-28页 |
3.2.1 DS-1的形态观察 | 第26页 |
3.2.2 DS-1的生理生化特征 | 第26-27页 |
3.2.3 DS-1的分子生物学鉴定 | 第27-28页 |
3.3 发酵条件的优化 | 第28-33页 |
3.3.1 菌体生长规律 | 第28-29页 |
3.3.2 基础培养基筛选 | 第29页 |
3.3.3 最佳碳源筛选 | 第29-30页 |
3.3.4 最佳氮源筛选 | 第30-31页 |
3.3.5 发酵条件优化 | 第31-33页 |
3.4 蛋白的分离纯化 | 第33-38页 |
3.4.1 有机溶剂萃取 | 第33页 |
3.4.2 抗菌蛋白的分级盐析 | 第33页 |
3.4.3 稳定性研究 | 第33-35页 |
3.4.3.1 热稳定性 | 第33-34页 |
3.4.3.2 酸碱稳定性 | 第34页 |
3.4.3.3 紫外稳定性 | 第34-35页 |
3.4.4 蛋白的纯化以及纯度、分子量检测 | 第35-37页 |
3.4.4.1 DEAE-52阴离子交换柱层析分离 | 第35-36页 |
3.4.4.2 Sephadex G-100凝胶层析 | 第36-37页 |
3.4.5 抗菌蛋白对菌丝形态的影响 | 第37-38页 |
3.5 促生和生防 | 第38-39页 |
3.5.1 发酵液对发芽率和芽长的影响结果 | 第38页 |
3.5.2 田间药效试验 | 第38-39页 |
4、结论与讨论 | 第39-43页 |
4.1 关于内生细菌DS-1的分离筛选 | 第39-40页 |
4.2 关于内生细菌DS-1的鉴定 | 第40页 |
4.3 关于内生细菌DS-1发酵条件的优化 | 第40-41页 |
4.4 关于内生细菌DS-1蛋白的纯化 | 第41-42页 |
4.5 关于内生细菌DS-1的促生和生防 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
Abstract | 第47-48页 |
致谢 | 第49页 |