| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1. 引言 | 第11-13页 |
| 2. 酵母单糖转运蛋白国内外研究进展 | 第13-19页 |
| 2.1 酵母单糖转运蛋白 | 第13-14页 |
| 2.2 酵母单糖转运蛋白的来源及分类 | 第14-15页 |
| 2.3 酵母单糖转运蛋白的转运机制及表达调控 | 第15-18页 |
| 2.4 酵母单糖转运蛋白的分子改造及应用 | 第18-19页 |
| 3. 热带假丝酵母的研究进展 | 第19-21页 |
| 4. 本实验的研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 5. 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 热带假丝酵母全基因组中单糖转运蛋白的筛选 | 第23-50页 |
| 1. 实验方案 | 第23-40页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第23-27页 |
| 1.1.1 本实验中所使用的菌种和质粒 | 第23-24页 |
| 1.1.2 常用生化试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.3 常用分子生物学试剂、酶及试剂盒 | 第25-26页 |
| 1.1.4 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| 1.1.5 培养基及配方 | 第27页 |
| 1.2 热带假丝酵母在不同单糖条件下的生长测试 | 第27-28页 |
| 1.3 热带假丝酵母全基因组中单糖转运蛋白的筛选 | 第28-31页 |
| 1.4 热带假丝酵母糖转运蛋白基因的糖利用能力分析 | 第31-37页 |
| 1.4.1 在S cerevisiaeEBY.VW4000中转入木糖异构酶基因 | 第31页 |
| 1.4.2 单糖转运蛋白表达载体的构建 | 第31-35页 |
| 1.4.3 获得功能互补菌株S.cerevisiaeXI-1～S cerevisiaeXI-15 | 第35-36页 |
| 1.4.4 单糖转运蛋白进行功能分析 | 第36-37页 |
| 1.5 本章中各试剂盒的使用方法 | 第37-40页 |
| 1.5.1 酵母菌基因组DNA提取试剂盒(E.Z.N.A.~(TM) Yeast DNA Kit) | 第37-38页 |
| 1.5.2 质粒DNA提取试剂盒(E.Z.N.A.~(TM) Plasmids DNA Kit) | 第38-39页 |
| 1.5.3 PCR产物胶回收试剂盒(E.Z.N.A.~(TM) Gel Extraction Kit) | 第39页 |
| 1.5.4 PCR产物纯化试剂盒(E.Z.N.A.~(TM) Cycle-Pure Kit) | 第39-40页 |
| 2. 结果与分析 | 第40-48页 |
| 2.1 热带假丝酵母在不同单糖条件下的生长表现 | 第40-42页 |
| 2.2 热带假丝酵母糖转运蛋白的筛选 | 第42-43页 |
| 2.3 热带假丝酵母糖转运蛋白的糖利用能力分析 | 第43-46页 |
| 2.4 具有单糖利用能力的重组菌株与热带假丝酵母在混合糖中的生长表现 | 第46-48页 |
| 3. 讨论与小结 | 第48-50页 |
| 第三章 目的基因在热带假丝酵母菌体内的转录水平分析 | 第50-61页 |
| 1. 材料与方法 | 第50-56页 |
| 1.1 菌株 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第50页 |
| 1.3 qPCR引物 | 第50-53页 |
| 1.4 RNA提取、纯化及cDNA的制备 | 第53-55页 |
| 1.5 基因表达RT-qPCR分析 | 第55-56页 |
| 2. 结果与分析 | 第56-60页 |
| 2.1 样品RNA的获得 | 第56页 |
| 2.2 基因表达RT-qPCR分析 | 第56-60页 |
| 3. 讨论与小结 | 第60-61页 |
| 第四章 单糖转运蛋白的结构预测与分析及系统进化树分析 | 第61-68页 |
| 1. 实验方案 | 第61页 |
| 1.1 糖转运蛋白二级结构与三级结构的预测 | 第61页 |
| 1.2 预测的热带假丝酵母糖转运蛋白与已知的糖转运蛋白的系统进化树分析 | 第61页 |
| 2. 结果与分析 | 第61-67页 |
| 2.1 热带假丝酵母糖转运蛋白二级结构与三级结构的预测 | 第61-64页 |
| 2.2 预测的热带假丝酵母糖转运蛋白与已知的糖转运蛋白的系统进化树分析 | 第64-67页 |
| 3. 讨论与小结 | 第67-68页 |
| 第五章 论文主要创新点及研究展望 | 第68-70页 |
| 1. 主要创新点 | 第68-69页 |
| 2. 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 基金项目 | 第75页 |
| 研究生期间主要成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
