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短小芽孢杆菌胞内NADPH 的再生及羟基脂肪酸发酵优化的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-11页
1 绪论第11-23页
   ·羟基脂肪酸概述第11页
   ·羟基脂肪酸的主要来源第11-13页
     ·化学合成途径第12页
     ·生物合成途径第12-13页
   ·合成羟基脂肪酸的微生物第13页
   ·脂肪酸羟基化反应的作用机制第13-15页
     ·微生物中羟化酶的分类及其特点第13-14页
     ·微生物中羟化酶的作用机制第14-15页
     ·P450 单加氧酶系在微生物细胞中的分布第15页
   ·辅酶NADPH 的性质第15-16页
   ·辅酶NADPH 在体内的代谢产生途径第16-18页
     ·HMP 途径(单磷酸己糖途径)第16-17页
     ·ED 途径(2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡糖酸裂解途径)第17-18页
   ·辅酶NADPH 的再生方法第18-21页
     ·辅酶的酶反应再生第18-19页
     ·辅酶的化学法再生第19页
     ·辅酶的电化学法再生第19-20页
     ·辅酶的光化学法再生第20页
     ·辅酶的微生物法再生第20-21页
   ·研究依据、目的和内容第21-23页
2 脂肪酸甲酯化条件的确立和发酵产物的鉴定第23-33页
   ·材料与方法第24-26页
     ·主要仪器设备第24页
     ·主要试剂第24页
     ·硫酸-甲醇溶液的制备第24-25页
     ·气相色谱条件第25页
     ·油酸及其衍生物含量测定第25页
     ·样品油酸的衍生化方法第25页
     ·发酵液中油酸衍生物(ω-羟基脂肪酸)的提取和甲酯化第25-26页
   ·结果与分析第26-32页
     ·油酸和棕榈酸标准品气相色谱图第26-27页
     ·硫酸-甲醇浓度(V/V)对油酸甲酯化的影响第27-28页
     ·温度对油酸甲酯化的影响第28-29页
     ·反应时间对油酸甲酯化的影响第29页
     ·硫酸-甲醇法用于油酸甲酯化的正交优化实验第29-31页
     ·GC-MS 测定发酵产物第31-32页
   ·本章小结第32-33页
3 Bacillus pumilus 胞内辅酶 NADPH 再生构建与机理分析第33-44页
   ·材料与方法第33-38页
     ·主要仪器设备第33-34页
     ·主要试剂第34页
     ·菌株和培养基第34-35页
     ·菌种培养及发酵方法第35页
       ·菌种活化及种子制备第35页
     ·分析方法第35-38页
       ·葡萄糖浓度标准曲线的制定及发酵液中葡萄糖含量的测定第35-36页
       ·NADPH 标准曲线的制定及胞内NADPH 含量测定第36-37页
       ·发酵液中羟基脂肪酸分析及含量测定第37-38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·短小芽孢杆菌胞内葡萄糖代谢及脂肪酸转化途径分析第38-39页
     ·不同装液量下葡萄糖代谢与短小芽孢杆菌胞内NADPH 含量第39-41页
     ·木糖添加量对NADPH 含量及ω-羟基脂肪酸产量的影响第41-42页
   ·本章小结第42-44页
4 Bacillus pumilus M-F641 最佳发酵工艺的研究第44-56页
   ·材料和方法第44-46页
     ·主要仪器设备第44页
     ·主要试剂第44-45页
     ·菌种第45页
     ·培养基第45页
     ·硫酸甲醇溶液的配置第45页
     ·菌种活化及种子制备第45页
     ·细胞生物量测定第45页
     ·发酵液中羟基脂肪酸分析及含量测定第45页
     ·单因素实验第45-46页
     ·响应面实验分析第46页
   ·结果与分析第46-54页
     ·摇瓶培养条件下细胞生长曲线的测定第46-47页
     ·碳源种类对菌体生长及油酸转化率的影响第47-48页
     ·初始葡萄糖浓度对菌体生长及油酸转化率的影响第48页
     ·培养温度对菌体生长及油酸转化率的影响第48-49页
     ·培养基初始pH 值对菌体生长及油酸转化率的影响第49页
     ·装液量对菌种转化油酸生成ω-羟基脂肪酸得率的影响第49-50页
     ·响应面分析实验结果第50-54页
       ·回归方程的建立与分析第50-52页
       ·培养因素间交互作用分析与发酵条件的优化第52-54页
       ·验证实验第54页
   ·本章小结第54-56页
5 结论和进一步研究设想第56-58页
   ·实验结论第56页
   ·进一步研究设想第56-58页
参考文献第58-65页
在学研究成果第65-66页
致谢第66页

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