| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-18页 |
| 1 绪论 | 第18-32页 |
| ·植物病害的分类及其防治手段 | 第18-20页 |
| ·化学防治 | 第19页 |
| ·生物防治手段 | 第19-20页 |
| ·生防链霉菌的研究进展 | 第20-25页 |
| ·链霉菌在生物防治上的应用 | 第20-21页 |
| ·链霉菌合成抗生素的分子机制 | 第21-23页 |
| ·链霉菌的分子生物学改造 | 第23-25页 |
| ·核苷类抗生素研究概况 | 第25-28页 |
| ·核苷类抗生素简介 | 第25-26页 |
| ·丰加霉素研究现状 | 第26-28页 |
| ·核糖体再循环因子RRF的研究进展 | 第28-30页 |
| ·RRF的简介 | 第28-29页 |
| ·RRF的结构特点 | 第29页 |
| ·RRF的作用机理 | 第29-30页 |
| ·RRF在链霉菌遗传改造中的应用 | 第30页 |
| ·本论文研究的内容及意义 | 第30-32页 |
| ·研究意义 | 第30-31页 |
| ·研究内容 | 第31-32页 |
| 2 toyG和toyF基因的过量表达对1628丰加霉素产量的影响 | 第32-46页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·菌种与质粒 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·缓冲液 | 第33-34页 |
| ·试剂、工具酶及试剂盒 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·toyF和toyG基因的扩增 | 第35页 |
| ·割胶回收，连接，测序 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及DNA的转化 | 第36页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第36页 |
| ·酶切 | 第36页 |
| ·链霉菌总DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·接合转移 | 第37页 |
| ·S. diastatochromogenes 1628生长曲线的测定 | 第37页 |
| ·粗酶液的制备 | 第37-38页 |
| ·腺苷酸琥珀酸裂解酶（TOYF）的酶活检测 | 第38页 |
| ·腺苷酸琥珀酸合成酶（TOYG）的酶活检测 | 第38页 |
| ·HPLC检测TM含量 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·重组质粒pIB139-toyF和pIB139-toyG的构建 | 第39-43页 |
| ·重组菌 1628-TOYF和 1628-TOYG的构建 | 第43-44页 |
| ·重组菌中TOYF和TOYG的酶活检测 | 第44页 |
| ·toyF和toyG基因的过量表达对1628的TM产量的影响 | 第44-45页 |
| ·toyF和toyG基因的过量表达对1628菌株生长的影响 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 3 过量表达核糖体再循环因子RRF对S. diastatochromogenes 1628丰加霉素产量的影响 | 第46-57页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·菌种与质粒 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·试剂、工具酶及试剂盒 | 第46页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·基因frr和PermE*-gfp的PCR扩增 | 第47页 |
| ·割胶回收、连接、测序 | 第47页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及DNA的转化 | 第47页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·酶切 | 第48页 |
| ·链霉菌总DNA的提取 | 第48页 |
| ·接合转移 | 第48页 |
| ·S. diastatochromogenes 1628生长曲线的测定 | 第48页 |
| ·HPLC检测TM含量 | 第48页 |
| ·链霉菌总RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·基因表达量的检测 | 第49页 |
| ·GFP荧光强度的检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-55页 |
| ·重组质粒pIB139-frr的构建 | 第49-51页 |
| ·重组菌 1628-FRR的构建、筛选及鉴定 | 第51页 |
| ·RRF的过量表达对1628菌株生长状态的影响 | 第51-52页 |
| ·RRF的过量表达对1628菌株TM产量的影响 | 第52-53页 |
| ·RRF的过量表达对结构基因toyF和toyG的转录水平的影响 | 第53页 |
| ·重组质粒pIB139-frr-gfp和重组菌 1628-FRG的构建 | 第53-55页 |
| ·过量表达RRF对生长期后期蛋白合成的影响 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 4 frr、vgb和toyG基因在1628中的联合表达及对丰加霉素产量的影响 | 第57-69页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·菌种与质粒 | 第57页 |
| ·培养基，主要仪器及试剂 | 第57页 |
| ·引物设计 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-59页 |
| ·PermE*-toyG、PermE*-frr片段的扩增 | 第58页 |
| ·割胶回收，连接，测序 | 第58页 |
| ·酶切 | 第58-59页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第59页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第59页 |
| ·链霉菌总DNA和总RNA的提取 | 第59页 |
| ·HPLC检测TM含量 | 第59页 |
| ·接合转移 | 第59页 |
| ·S.diastatochromogenes 1628生长曲线的测定 | 第59页 |
| ·粗酶液的制备 | 第59页 |
| ·腺苷酸琥珀酸合成酶（TOYG）的酶活检测 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-67页 |
| ·重组菌S. diastatochromogenes1628-FG和 1628-VG的构建 | 第59-62页 |
| ·toyG、frr基因串联过量表达对1628菌株合成TM的影响 | 第62-63页 |
| ·toyG、vgb基因的串联过量表达在不同限氧条件下表达对1628菌株合成TM的影响 | 第63-64页 |
| ·重组菌S. diastatochromogenes1628-VGF的构建 | 第64-66页 |
| ·重组菌 1628-VGF合成TM能力的测定 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 5 总结与展望 | 第69-71页 |
| ·全文总结 | 第69-70页 |
| ·课题创新 | 第70页 |
| ·课题展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
