| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-18页 |
| ·蛋白质泛素化修饰 | 第9-12页 |
| ·泛素 | 第9页 |
| ·泛素化过程 | 第9-10页 |
| ·泛素化分类 | 第10页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统与蛋白酶体 | 第10-12页 |
| ·去泛素化酶 | 第12-13页 |
| ·去泛素化酶USP14 | 第13-16页 |
| ·USP14在信号通路中的作用 | 第14页 |
| ·USP14在神经系统中的作用 | 第14-15页 |
| ·USP14在肿瘤发生发展中的作用 | 第15页 |
| ·USP14抑制剂的研究 | 第15-16页 |
| ·实验设计 | 第16-18页 |
| 第2章 USP14底物的鉴定及其功能的探究 | 第18-45页 |
| ·实验器材 | 第18-19页 |
| ·实验主要试剂 | 第18页 |
| ·实验耗材 | 第18-19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-28页 |
| ·USP14基因稳定低表达细胞株与FLAG-USP14表达细胞株的构建 | 第19-20页 |
| ·细胞培养与SILAC标记 | 第20-21页 |
| ·细胞裂解及蛋白消化 | 第21-22页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分离 | 第22-23页 |
| ·蛋白免疫沉淀 | 第23-24页 |
| ·泛素化肽段的富集 | 第24页 |
| ·Nano-HPLC-MS/MS分析 | 第24-26页 |
| ·质谱数据处理 | 第26-27页 |
| ·生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western Blotting) | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-43页 |
| ·实验方案与Hela细胞中USP14的敲低效率的验证 | 第28-29页 |
| ·SILAC样本的液相色谱分离 | 第29-31页 |
| ·USP14调控蛋白表达谱的鉴定及其验证 | 第31-33页 |
| ·USP14调控的蛋白网络分析 | 第33-36页 |
| ·USP14相互作用蛋白鉴定结果 | 第36-39页 |
| ·通过蛋白表达谱与相互作用蛋白谱对比得到潜在底物蛋白 | 第39-40页 |
| ·泛素化修饰谱鉴定结果 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第3章 结论与讨论 | 第45-47页 |
| ·结论与讨论 | 第45-46页 |
| ·问题与展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 1 SILAC定量实验中下调蛋白DAVID分析结果 | 第54-58页 |
| 附录 2 SILAC定量实验中下调蛋白MCODE聚类结果 | 第58-59页 |
| 附录 3 USP14相互作用蛋白DAVID分析结果 | 第59-69页 |
| 附录 4 泛素化修饰谱上调位点对应蛋白Clue GO分析结果 | 第69-86页 |
| 作者简历 | 第86页 |
