| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 縮略词 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| ·小RNA参与的基因沉默 | 第12页 |
| ·miRNA和siRNA的产生及功能研究 | 第12-15页 |
| ·miRNA的产生与功能研究 | 第13-14页 |
| ·siRNA的产生与功能研究 | 第14-15页 |
| ·小RNA介导的基因沉默机制 | 第15-17页 |
| ·小RNA介导的基因沉默方式 | 第15-16页 |
| ·小RNA对目标mRNA的作用 | 第16-17页 |
| ·小RNA的基因干扰应用 | 第17-20页 |
| ·siRNA的基因干扰应用 | 第17-18页 |
| ·人工miRNA(amiRNA)的干扰应用 | 第18页 |
| ·基因沉默的特异性 | 第18-19页 |
| ·基因沉默的系统效应 | 第19-20页 |
| ·TAS基因的功能研究及应用 | 第20-29页 |
| ·TAS基因的定义与分类 | 第20-21页 |
| ·具有单个miRNA靶位点的TAS1/2/4基因 | 第21-24页 |
| ·具有双miRNA靶位点的TAS3基因 | 第24-26页 |
| ·TAS通路中的相关蛋白质 | 第26-28页 |
| ·syn-tasiRNAs的基因干扰应用 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-52页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·常用分子生物学试剂及耗材 | 第30页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·常用培养基的配制 | 第30-31页 |
| ·常用抗生素的配制 | 第31页 |
| ·实验溶液的配制 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-52页 |
| ·载体构建方法 | 第32-37页 |
| ·植物多基因表达载体构建方法 | 第37-38页 |
| ·植物材料培养方法 | 第38-39页 |
| ·植物材料检测方法 | 第39-45页 |
| ·植物表达载体的构建流程 | 第45-52页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第52-98页 |
| ·miR390对TAS3a产生有效tasiRNAs的影响分析 | 第52-58页 |
| ·AG07对TAS3a产生有效tasiRNAs的影响分析 | 第58-61页 |
| ·DRB4对TAS3a产生有效tasiRNAs的影响分析 | 第61-64页 |
| ·SGS3对TAS3a产生有效tasiRNAs的影响分析 | 第64-67页 |
| ·截短型TAS3a可以有效干扰目标基因的表达 | 第67-74页 |
| ·TAS3a-miR390a两融合基因的功能分析 | 第74-80页 |
| ·TAS3a-miR390a融合基因对单基因和多基因的干扰应用 | 第80-86页 |
| ·TAS3a两个miR390靶位点之间的最短间距分析 | 第86-90页 |
| ·TAS3a,TAS1c,miR390a和miR173四基因融合体可以干扰基因表达 | 第90-93页 |
| ·截短型四基因融合体可以干扰多基因 | 第93-98页 |
| 第四章 讨论 | 第98-104页 |
| ·本研究的应用价值 | 第98页 |
| ·miR390是TAS3a超表达产生有效tasiRNAs的限制性因子 | 第98-99页 |
| ·TAS3a tasiRNAs产生区域的最短距离为产生2个21 nt tasiRNA的长度 | 第99-100页 |
| ·miR390a可以在TAS3a的内含子中进行表达 | 第100-101页 |
| ·tasiRNAs本身的序列特征对TAS3a产生有效tasiRNAs的影响 | 第101页 |
| ·TAS3a,TAS1c,miR390a和miR173四融合基因对多个靶基因有干扰效果 | 第101-104页 |
| 第五章 结论与展望 | 第104-106页 |
| 附录一 Crispr/Cas9系列载体在拟南芥多基因突变体中的应用 | 第106-116页 |
| ·研究背景 | 第106页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第106-107页 |
| ·实验材料 | 第107页 |
| ·实验方法 | 第107页 |
| ·实验结果与分析 | 第107-114页 |
| ·包含Crispr-Cas9表达框的双元表达载体构建 | 第107页 |
| ·T1代转基因拟南芥的突变分析 | 第107-110页 |
| ·T2代转基因拟南芥的突变分析 | 第110-114页 |
| ·结论与讨论 | 第114-116页 |
| 附录二 文章中所需引物序列 | 第116-122页 |
| 参考文献 | 第122-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 个人简历 | 第133页 |
