| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1. 结缕草属植物抗逆研究进展 | 第10-14页 |
| ·结缕草形态特征和地理分布 | 第10-11页 |
| ·结缕草的抗寒性 | 第11-12页 |
| ·结缕草的耐盐性 | 第12-13页 |
| ·结缕草的耐旱性 | 第13-14页 |
| ·结缕草抗逆育种研究 | 第14页 |
| 2. 植物转录因子DREB研究 | 第14-17页 |
| ·DREB转录因子分子特征 | 第15-16页 |
| ·DREB的基因结构同源性及多样性 | 第16页 |
| ·DREB与植物抗逆育种 | 第16-17页 |
| 3. 本研究思路、目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 日本结缕草ZjDREB2.2基因克隆及序列分析 | 第19-34页 |
| 1、材料与方法 | 第19-26页 |
| ·植物材料、试剂及仪器 | 第19-21页 |
| ·植物材料培养及低温处理方法 | 第19-20页 |
| ·试剂及引物 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| ·总RNA提取 | 第21-22页 |
| ·cDNA的制备 | 第22-23页 |
| ·ZjDREB2.2基因克隆 | 第23-25页 |
| ·ZjDREB2.2的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·ZjDREB2.2基因与T载体连接 | 第24-25页 |
| ·ZjDREB2.2基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2、结果与分析 | 第26-33页 |
| ·RNA提取效果 | 第26-27页 |
| ·cDNA的制备效果 | 第27-28页 |
| ·DREB2.2的PCR扩增 | 第28页 |
| ·ZjDREB2.2基因的生物信息学分析 | 第28-33页 |
| 3、讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 结缕草ZjDREB2.2基因表达的逆境响应模式 | 第34-42页 |
| 1 、材料与方法 | 第34-36页 |
| ·试剂及仪器 | 第34-35页 |
| ·试剂及引物 | 第34-35页 |
| ·植物材料培养及逆境处理方法 | 第35页 |
| ·总RNA提取和cDNA的制备 | 第35页 |
| ·cDNA的制备 | 第35-36页 |
| ·ZjDREB2.2基因的半定量RT-PCR | 第36页 |
| 2、结果与分析 | 第36-40页 |
| ·样品RNA提取 | 第36-37页 |
| ·cDNA的检验与模板上样量的确定 | 第37-38页 |
| ·不同逆境胁迫下ZjDREB2.2的表达情况 | 第38-40页 |
| ·不同温度条件下ZjDREB2.2的表达情况 | 第39页 |
| ·低温胁迫下匍匐茎和根组织中ZjDREB2.2的表达情况 | 第39-40页 |
| 3、讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 日本结缕草ZjDREB2.2基因转录因子的活性鉴定 | 第42-56页 |
| 1、材料与方法 | 第42-49页 |
| ·实验材料、试剂 | 第42-43页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第43-47页 |
| ·带有attB位点的ZjDREB2.2核酸片段PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·入门载体构建 | 第44-45页 |
| ·目标载体构建 | 第45-47页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化 | 第47页 |
| ·ZjDREB2.2转录激活功能检测 | 第47-48页 |
| ·ZjDREB2.2基因DNA结合功能检测 | 第48-49页 |
| 2、结果与分析 | 第49-54页 |
| ·带attB位点的ZjDREB2.2基因片段PCR扩增 | 第49页 |
| ·pDonr221-ZjDREB22重组载体构建 | 第49-50页 |
| ·含融合基因AD-ZjDREB2.2和BD-ZjDREB2.2载体构建 | 第50-51页 |
| ·ZjDREB2.2基因转录激活功能鉴定 | 第51-52页 |
| ·ZjDREB2.2基因DRE结合功能鉴定 | 第52-54页 |
| 3、讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 日本结缕草ZjDREB2.2基因表达载体构建及遗传转化 | 第56-65页 |
| 1、材料与方法 | 第56-60页 |
| ·植物材料及菌株 | 第56页 |
| ·试剂及引物 | 第56-57页 |
| ·ZjDREB2.2基因植物表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第58页 |
| ·蘸花法转化拟南芥 | 第58-59页 |
| ·拟南芥抗性植株的筛选及PCR鉴定 | 第59-60页 |
| 2、结果与分析 | 第60-63页 |
| ·植物表达载体pZP212-ZjDREB2.2的构建 | 第60-61页 |
| ·抗性植株筛选和PCR鉴定 | 第61-63页 |
| ·转基因植株的表型特征 | 第63页 |
| 3、讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 全文总结及研究展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 缩略词 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75页 |
