中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-15页 |
研究背景 | 第11-13页 |
研究的目的和意义 | 第13-14页 |
研究步骤 | 第14-15页 |
第一部分 弓形虫致密颗粒蛋白 GRA7 的重组克隆表达鉴定及抗原性分析 | 第15-38页 |
1 材料 | 第15-17页 |
·细胞株、弓形虫虫株、质粒、菌株、实验动物 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
2 方法 | 第17-29页 |
·实验设计与方法 | 第17-29页 |
3 结果 | 第29-37页 |
·Hela 细胞和弓形虫培养结果 | 第29-31页 |
·GST-GRA7-His 重组蛋白的克隆表达纯化 | 第31-33页 |
·GRA7 目的蛋白检测及抗原性分析 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
第二部分 弓形虫致密颗粒蛋白 GRA7 与宿主细胞的蛋白互作研究 | 第38-62页 |
1 材料 | 第38-39页 |
·细胞株、质粒 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
2 实验设计与方法 | 第39-52页 |
·细胞和弓形虫的培养 | 第39-40页 |
·GST pull-down 实验操作 | 第40-45页 |
·pcDNA3.1-CA 表达载体的瞬时转染 | 第45-47页 |
·免疫共沉淀(Co-IP)实验 | 第47-51页 |
·弓形虫感染过表达碳酸酐酶 CA 的 THP-1 细胞观察 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52-58页 |
·正常 THP-1 细胞和分化 THP-1 细胞 | 第52页 |
·GST-6*his 标签的制备 | 第52-53页 |
·GRA7 蛋白 GST pull-down 质谱结果 | 第53-54页 |
·THP-1 细胞 CA 基因的克隆重组 | 第54-57页 |
·免疫共沉淀(Co-IP)实验 | 第57页 |
·弓形虫感染过表达碳酸酐酶 CA 的 THP-1 细胞观察 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
文献综述 | 第65-73页 |
参考文献 | 第70-73页 |
附录 | 第73-75页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
个人简历 | 第77页 |