| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-12页 |
| Abstract | 第12-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-25页 |
| ·酒精代谢及相关疾病 | 第18-19页 |
| ·酒精相关代谢酶 | 第19-21页 |
| ·ADH2、ALDH2 分型方法 | 第21-24页 |
| ·限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术（Polymerase Chain Reaction – Restriction Fragment length Polymorphism,PCR‐RFLP） | 第21-22页 |
| ·等位基因特异性 PCR（Allele specific PCR，AS‐PCR） | 第22页 |
| ·两对交叉引物 PCR(PCR with confronting two‐pair primers, PCR‐CTPP) | 第22页 |
| ·Taqman 技术 | 第22-23页 |
| ·变性高效液相色谱法(Denaturing high performance liquid chromatography , DHPLC) | 第23页 |
| ·测序法 | 第23页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( Matrix‐assisted laser desorption / ionization‐time of flight mass spectrometry，MALDI‐TOFMS) 技术 | 第23-24页 |
| ·高分辨熔解曲线法（High resolution melting，HRM） | 第24页 |
| ·本研究的内容及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 ALDH2 基因分型方法的建立 | 第25-50页 |
| ·技术路线 | 第25页 |
| ·实验材料和仪器 | 第25-28页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要试剂配方 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-49页 |
| ·方案一：以提纯 DNA 为模板扩增长度为 535bp 的目的片段，用 TspRⅠ酶切后经琼脂糖凝胶电泳分型 | 第28-32页 |
| ·方案二：以样品粗处理液为模板扩增长度为 535bp 的目的片段，用 TspRⅠ酶切后经琼脂糖凝胶电泳分型 | 第32-34页 |
| ·方案三：以样品粗处理液为模板进行半巢氏 PCR，扩增长度为 467bp 目的片段，用 TspR Ⅰ酶切后经琼脂糖凝胶电泳分型 | 第34-38页 |
| ·方案四：以样品粗处理液为模板进行巢氏 PCR，扩增长度为 372bp 的目的片段，用 Hinf Ⅰ酶切后经琼脂糖凝胶电泳分型 | 第38-42页 |
| ·方案五：以提纯 DNA 为模板扩增长度为 372bp 的目的片段，用 HinfⅠ酶切后经聚丙烯酰胺凝胶电泳分型 | 第42-44页 |
| ·ALDH2 野生型及突变型等位基因的克隆 | 第44-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 ADH2 基因分型方法的建立 | 第50-56页 |
| ·实验流程图 | 第50页 |
| ·实验材料和仪器 | 第50-51页 |
| ·样品 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要试剂配方 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·样品的采集 | 第51页 |
| ·粗样品的处理 | 第51页 |
| ·引物的设计 | 第51-52页 |
| ·PCR 扩增及产物的电泳鉴定 | 第52-53页 |
| ·PCR 产物的酶切分型 | 第53页 |
| ·测序验证 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 ALDH2、ADH2 分型方法的应用 | 第56-64页 |
| ·实验材料和仪器 | 第56页 |
| ·实验样品 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要试剂配方 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-62页 |
| ·ALDH2 分型结果 | 第57页 |
| ·ADH2 分型结果 | 第57-58页 |
| ·ALDH2 与 ADH2 分型结果分析 | 第58-62页 |
| 小结 | 第62-64页 |
| 第五章 方法讨论 | 第64-78页 |
| ·新建立的 ALDH2，ADH2 分型方法特异性，准确性，重复性讨论 | 第64-67页 |
| ·特异性分析，引入对照酶切位点判断酶切反应完全性 | 第64-67页 |
| ·重复性证明 | 第67页 |
| ·准确性检测 | 第67页 |
| ·新建方法间比较 | 第67-71页 |
| ·新建方法同传统 PCR‐RFLP 分型方法的比较 | 第71-75页 |
| ·新建方法同其他分型方法的比较 | 第75-76页 |
| 小结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
