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MfDREB1基因克隆和转基因棉花抗逆性分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第1章 引言第11-24页
   ·低温胁迫对植物的影响第12-13页
     ·低温胁迫对植物的伤害第12页
     ·低温胁迫对光合作用的影响第12页
     ·低温胁迫对植物呼吸作用的影响第12-13页
   ·植物抗寒机制第13-14页
     ·碳水化合物与抗寒性第13页
     ·蛋白质与抗寒性第13-14页
     ·脯氨酸与抗寒性第14页
     ·自由水和束缚水与抗寒性第14页
   ·植物抗寒性相关基因的研究第14-15页
     ·抗冻蛋白基因第14-15页
     ·冷诱导基因第15页
     ·渗透调节相关酶基因第15页
   ·我区棉花抗逆基因工程研究现状第15-21页
     ·西北内陆棉区棉花生产特点第16-17页
     ·逆境对新疆棉花生产的影响第17页
     ·棉花抗逆基因工程育种的重要性第17-19页
     ·抗逆基因工程的研究现状第19-20页
     ·棉花抗旱、耐盐碱基因工程研究现状第20-21页
   ·研究的目的和意义第21-22页
   ·本实验的技术路线第22-24页
     ·MfDREB1的提取和序列分析第22-23页
     ·转基因棉花的获得与抗逆性分析第23-24页
第2章 MFDREB1基因的克隆和序列分析第24-42页
   ·材料与方法第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·实验方法第25-28页
     ·样品的采集第25页
     ·总RNA的提取及检测第25页
     ·反转录cDNA第25页
     ·PCR扩增目的基因片段第25-26页
     ·DNA凝胶回收与纯化第26页
     ·T载体的连接与转化第26-27页
     ·菌液PCR第27页
     ·质粒提取与双酶切验证第27-28页
     ·序列测定第28页
     ·MfDREB1的生物信息学分析第28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·苜蓿总RNA提取与鉴定第28-29页
     ·MfDREB1基因核心片段的克隆第29页
     ·菌液PCR结果第29-30页
     ·提取质粒与双酶切检验第30页
     ·序列测定结果第30-31页
   ·生物信息学分析第31-40页
     ·苜蓿MfDREB1基因表达产物分析第31-32页
     ·MfDREB1基因序列比对结果第32页
     ·MfDREB1基因蛋白功能分析第32-37页
     ·黄花苜蓿MfDREB1基因蛋白理化性质的分析第37-39页
     ·MfDREB1基因蛋白亲水性/疏水性预测第39-40页
     ·MfDREB1蛋白序跨膜区分析第40页
   ·讨论第40-42页
第3章 黄花苜蓿MFDREB1基因植物表达载体构建第42-47页
   ·实验材料第42页
     ·菌株和质粒第42页
     ·工具酶和试剂第42页
     ·培养基第42页
   ·试验方法第42-44页
     ·pCAMBIA1301-MfDREB1植物表达载体的构建第42-43页
     ·pCAMBIA1301-MfDREB1植物表达载体酶切检验第43页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态的制备第43页
     ·pCAMBIA1301-MfDREB1转化农杆菌第43-44页
     ·根癌农杆菌中植物表达载体的检测第44页
   ·结果与分析第44-45页
     ·pCAMBIA1301-MfDREB1植物表达载体的构建第44页
     ·农杆菌中植物表达载体的双酶切和PCR检测第44-45页
   ·讨论第45-47页
第4章 转MFDREB1基因棉花的筛选与检测第47-55页
   ·材料与方法第47-50页
     ·试验材料第47页
     ·试验方法第47-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·转基因棉花的卡那霉素检测第50-51页
     ·转基因棉花的分子检测第51-54页
   ·讨论第54-55页
第5章 转MFDREB1基因棉花抗逆性的研究和农艺性状分析第55-64页
   ·材料与方法第55-58页
     ·实验材料第55页
     ·主要仪器和试剂第55页
     ·试验方法第55-58页
   ·结果与分析第58-62页
     ·干旱胁迫不同含水率及复水后转基因棉花和对照棉花中脯氨酸含量的变化第58-59页
     ·干早胁迫不同含水率及复水后转基因棉花和对照棉花中丙二醛含量的变化第59页
     ·干旱胁迫不同含水率及复水后转基因棉花和对照棉花中叶绿素含量的变化第59-60页
     ·200 mmol/L NaCl胁迫转基因棉花和对照棉花中脯氨酸含量的变化第60页
     ·200 mmol/L NaCl胁迫转基因棉花和对照棉花中丙二醛含量的变化第60-61页
     ·200 mmol/L NaCl胁迫转基因棉花和对照棉花中叶绿素含量的变化第61页
     ·4℃低温胁迫后转基因和非转基因棉花丙二醛含量的变化第61-62页
     ·田间花期干旱胁迫后主要农艺性状分析第62页
   ·讨论第62-64页
第6章 结论与讨论第64-66页
参考文献第66-70页
致谢第70-71页
作者简历第71页

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