| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-7页 |
| 第一章 实验材料和方法 | 第7-16页 |
| ·实验材料 | 第7-9页 |
| ·细胞 | 第7页 |
| ·实验试剂 | 第7-8页 |
| ·实验仪器 | 第8-9页 |
| ·实验方法 | 第9-16页 |
| ·主要试剂配 | 第9-10页 |
| ·椎间盘细胞的获取和培养 | 第10页 |
| ·髓核细胞的消化传代 | 第10页 |
| ·Survivin、TGF β 3、TIMP-1慢病毒载体构建 | 第10页 |
| ·Survivin、TGF β 3、TIMP-1慢病毒载转染椎间盘细胞 | 第10-11页 |
| ·Realtime-PCR检测目的基因的mRNA水平 | 第11-12页 |
| ·Realtime-PCR检测蛋白多糖和Ⅱ型胶原的mRNA表达量 | 第12-13页 |
| ·Western-Blot检测蛋白多糖及Ⅱ型胶原蛋白表达水平 | 第13-15页 |
| ·AnnexinV-PI双染色法应用流式细胞仪检测髓核细胞的凋亡率 | 第15页 |
| ·采用Caspase-3活性试剂盒检测Caspase-3酶活性 | 第15页 |
| ·统计学分析 | 第15-16页 |
| 第二章 实验结果 | 第16-23页 |
| ·体外培养人退变髓核细胞形态学观察 | 第16-17页 |
| ·慢病毒稳定转染髓核细胞后光镜及倒置荧光显微镜下的形态学观察 | 第17-18页 |
| ·慢病毒稳定转染髓核细胞传代后的观察结果 | 第18-19页 |
| ·慢病毒稳定转染后Real-time PCR检测各组样本目的基因mRNA表达量 | 第19页 |
| ·Real-time PCR检测蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的相对表达量 | 第19-21页 |
| ·蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白含量Western blot检测结果 | 第21页 |
| ·Caspase活性检测结果 | 第21-22页 |
| ·Annexin V-PI双染检测结果 | 第22-23页 |
| 第三章 讨论 | 第23-26页 |
| 结论 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-30页 |
| 综述 | 第30-41页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |
