| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-15页 |
| ·我国贝类养殖现状和存在问题 | 第10页 |
| ·贝类的机体免疫防御体系 | 第10-11页 |
| ·溶菌酶的分类与生物学功能 | 第11-12页 |
| ·水产动物溶菌酶的研究进展 | 第12-14页 |
| ·研究目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二章 蛤仔(Ruditapes philippinarum)噬菌体型溶菌酶基因序列的克隆及序列分析 | 第15-34页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·实验试剂 | 第15-16页 |
| ·实验仪器 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-23页 |
| ·蛤仔总 RNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·蛤仔噬菌体型溶菌酶基因 cDNA 序列全长获得 | 第17-22页 |
| ·蛤仔噬菌体型溶菌酶 cDNA 序列的生物信息学分析 | 第22-23页 |
| ·实验结果 | 第23-31页 |
| ·RNA 质量检测 | 第23页 |
| ·蛤仔 RpLysBp 基因特异性片段的扩增结果 | 第23-24页 |
| ·蛤仔 RpLysBp 基因全长及序列分析 | 第24-26页 |
| ·蛤仔 RpLysBp 基因的生物信息学分析结果 | 第26-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-34页 |
| 第三章 蛤仔(Ruditapes philippinarum)噬菌体型溶菌酶蛋白的原核表达 | 第34-51页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·实验动物、载体、菌株及工具酶 | 第34页 |
| ·实验试剂及其配制 | 第34-36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-45页 |
| ·蛤仔 RpLysBp 基因总 RNA 的提取 | 第37页 |
| ·第一条 cDNA 链的获得 | 第37-38页 |
| ·引物设计及蛤仔 RpLysBp 基因目的片段的扩增 | 第38-39页 |
| ·重组质粒 pMD19-T-ORF 的构建及转化(DH5α) | 第39-41页 |
| ·重组质粒 pET-30a-ORF 的构建及转化(BL21) | 第41-42页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第42页 |
| ·菌体的超声波破碎 | 第42页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-43页 |
| ·重组蛋白的纯化及浓度测定 | 第43-45页 |
| ·实验结果 | 第45-49页 |
| ·ORF 目的片段扩增结果 | 第45页 |
| ·重组质粒 pMD-19T-ORF 的构建及转化结果 | 第45-46页 |
| ·重组质粒 pET-30a-ORF 的构建及鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的纯化及浓度测定 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 蛤仔（Ruditapes philippinarum）噬菌体型溶菌酶荧光定量 PCR 分析 | 第51-64页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·主要实验试剂及药品 | 第51页 |
| ·主要实验仪器 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·RNA 提取及反转录 | 第52页 |
| ·不同组织和免疫促进剂刺激后表达变化检测方法 | 第52-53页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第53页 |
| ·引物设计 | 第53-54页 |
| ·荧光实时定量 PCR 条件的优化 | 第54页 |
| ·数据处理方法 | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-62页 |
| ·总 RNA 提取结果 | 第55页 |
| ·标准曲线的建立 | 第55-59页 |
| ·蛤仔 RpLysPh 基因组织特异性表达结果 | 第59页 |
| ·蛤仔 RpLysPh 在免疫促进剂刺激后的表达规律研究 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第五章 蛤仔（Ruditapes philippinarum）噬菌体型溶菌酶基因多态性（SNP）初步分析 | 第64-68页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·实验动物 | 第64-65页 |
| ·实验试剂 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·蛤仔总 DNA 的提取 | 第65-66页 |
| ·引物设计 | 第66页 |
| ·PCR 扩增和电泳检测 | 第66页 |
| ·产物纯化和测序 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
