摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
中英文对照缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 活性氧 | 第11-13页 |
·活性氧的产生 | 第11-12页 |
·活性氧在ABA信号转导中的作用 | 第12-13页 |
2 脱落酸 | 第13-15页 |
·ABA的作用 | 第13页 |
·ABA信号通路研究进展 | 第13-15页 |
3 RBOH、OsDMI3和锌指蛋白基因ZFP36概述 | 第15-19页 |
·植物RBOH基因概述 | 第15-17页 |
·植物OsDMI3基因概述 | 第17-18页 |
·锌指蛋白基因ZFP36的研究进展 | 第18-19页 |
4 本研究的目的及研究内容 | 第19-21页 |
第二章 ABA诱导的水稻叶片中Osrbohs基因的表达分析 | 第21-31页 |
摘要 | 第21页 |
Abstract | 第21-22页 |
1 材料与方法 | 第22-26页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23-24页 |
·水稻总RNA提取 | 第24-25页 |
·RNA纯度检测 | 第25页 |
·水稻cDNA第一链的合成 | 第25页 |
·OsrbohA、B、C、E、I基因与Osactin基因的实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-28页 |
·RNA的纯度检测 | 第26页 |
·目标基因的确定 | 第26-28页 |
3 讨论 | 第28-31页 |
第三章 与ABA相关的Osrbohs基因的克隆及亚细胞定位 | 第31-45页 |
摘要 | 第31页 |
Abstract | 第31-32页 |
1 材料与方法 | 第32-39页 |
·材料与方法 | 第32页 |
·OsrbohB和OsrbohE基因的植物瞬时表达载体的构建 | 第32-37页 |
·水稻原生质体分离、转化及处理 | 第37-38页 |
·质粒提取 | 第38页 |
·PEG融合法转化水稻原生质体 | 第38页 |
·基因枪法定位OsrbohE | 第38-39页 |
·显微镜观察 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-43页 |
·目的基因全长的克隆 | 第39-40页 |
·OsrbohB和OsrbohE重组原生质体瞬时表达载体的构建及鉴定 | 第40-41页 |
·水稻原生质体的分离 | 第41页 |
·OsrbohB和OsrbohE在水稻原生质体中的亚细胞定位 | 第41-42页 |
·OsrbohE在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
第四章 OsDMI3和ZFP36对ABA诱导的Osrobhs基因表达的调节 | 第45-55页 |
摘要 | 第45页 |
Abstract | 第45-46页 |
1 材料与方法 | 第46-49页 |
·材料 | 第46-47页 |
·OsrbohB和OsrbohE基因干扰引物的设计 | 第47页 |
·OsrbohB和OsrbohE基因的dsRNA的体外合成 | 第47-48页 |
·水稻原生质体分离、转化及处理 | 第48页 |
·转化后原生质体总RNA提取及质量检测 | 第48页 |
·Real time-PCR检测100μM ABA处理下,OsDMI3突变体水稻叶片中OsrbohB、OsrbohE基因的表达情况;过表达OsrbohE基因后水稻原生质体中OsDMI3的表达情况;RNA干扰OsrbohE基因后水稻叶片中OsDMI3的表达情况 | 第48页 |
·Real time-PCR检测在OsDMI3突变体中回补OsDMI3过表达质粒并经ABA处理后OsrbohE基因的表达情况 | 第48-49页 |
·Real time-PCR检测100μM ABA处理下,ZFP36突变体水稻叶片中OsrbohB、OsrbohE基因的表达情况 | 第49页 |
2 结果与分析 | 第49-53页 |
·OsDMI3突变体中OsrbohB、OsrbohE基因的表达情况 | 第49-50页 |
·过表达水稻原生质体中OsrbohE对OsDMI3的基因表达调控 | 第50页 |
·利用RNAi技术沉默水稻原生质体中的OsrbohE基因 | 第50-51页 |
·OsrbohE基因沉默对ABA诱导的OsDMI3基因表达的影响 | 第51-52页 |
·OsDMl3突变体中回补OsDMI3瞬时表达载体质粒对OsrbohE基因表达的影响 | 第52页 |
·水稻锌指蛋白ZFP36突变体中,OsrbohB和OsrbohE基因的表达情况 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
全文结论 | 第55-57页 |
全文创新之处与存在的问题 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-69页 |
附录 | 第69-70页 |