| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 材料与仪器 | 第14-16页 |
| 实验方法 | 第16-27页 |
| 1. 细胞培养 | 第16页 |
| 2. MTT 法检测亲本及耐药细胞株对紫杉醇的药物敏感性 | 第16页 |
| 3. MCF-7 和 SKBR-3 耐药株的构建 | 第16-17页 |
| 4. 利用显微镜技术观察细胞形态变化 | 第17页 |
| 5. Real-Time PCR 检测 MCF-7/PR 和 SKBR-3/PR EMT 相关指标 | 第17-20页 |
| 6. Western blotting 检测耐药细胞株 EMT 相关蛋白及细胞周期相关 Skp2 靶蛋白表达 | 第20-23页 |
| 7. 检测乳腺癌耐药株生物学活性变化 | 第23页 |
| 8. 流式细胞术检测耐药细胞株的周期变化情况 | 第23-24页 |
| 9. Skp2 干扰片段的筛选 | 第24页 |
| 10. Skp2 干扰后的耐药细胞形态变化 | 第24页 |
| 11. 检测 Skp2 干扰后耐药细胞株 EMT 相关指标的表达 | 第24-25页 |
| 12. 检测 Skp2 干扰后耐药细胞株生物活性的改变 | 第25页 |
| 13. MTT 法分析 Skp2 干扰后耐药细胞株的增殖情况 | 第25-26页 |
| 14. 统计学分析 | 第26-27页 |
| 实验结果 | 第27-45页 |
| 1. 生长曲线的绘制 | 第27页 |
| 2. 细胞形态的变化 | 第27-28页 |
| 3. 亲本和耐药细胞株 EMT 相关指标基因表达差异分析 | 第28-29页 |
| 4. 亲本和耐药细胞株 EMT 相关指标 EMT 相关蛋白表达差异分析 | 第29-31页 |
| 5. 耐药细胞株黏附分离活性升高 | 第31-32页 |
| 6. 耐药细胞株迁移能力增强 | 第32-34页 |
| 7. 耐药细胞株侵袭能力增强 | 第34页 |
| 8. 耐药细胞株中 Skp2 表达升高 | 第34-35页 |
| 9. 耐药细胞株的细胞周期分析 | 第35-36页 |
| 10. 亲本与耐药细胞中细胞周期相关 Skp2 靶蛋白表达变化 | 第36-37页 |
| 11. Skp2 干扰片段的筛选 | 第37-38页 |
| 12. 耐药细胞株转染 Skp2 后形态的变化 | 第38-39页 |
| 13. 耐药细胞株转染 Skp2 后 EMT 相关指标基因表达逆转 | 第39页 |
| 14. 耐药细胞株转染 Skp2 后 EMT 相关指标蛋白表达逆转 | 第39-40页 |
| 15. 耐药细胞株转染 Skp2 后迁移能力下调 | 第40-41页 |
| 16. 耐药细胞株转染 Skp2 后趋化能力下调 | 第41-42页 |
| 17. 耐药细胞株转染 Skp2 后黏附分离能力下调 | 第42-43页 |
| 18. 耐药细胞株转染 Skp2 后药物敏感性提高 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 A 英文缩略词 | 第57-58页 |
| 附录 B 主要试剂配制 | 第58-60页 |
| 附录 C 个人简历及发表文章 | 第60-61页 |
| 附录 D 综述 | 第61-67页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
