| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·海洋微生物低温酶 | 第10-12页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·产低温酶的海洋微生物 | 第10-11页 |
| ·海洋低温酶的种类 | 第11页 |
| ·海洋低温酶适低温机制 | 第11-12页 |
| ·植酸及植酸酶 | 第12-18页 |
| ·植酸及其特点 | 第12-13页 |
| ·植酸的结构和理化性质 | 第12页 |
| ·植酸的抗营养作用 | 第12-13页 |
| ·植酸对环境的影响 | 第13页 |
| ·植酸酶及其特点 | 第13-14页 |
| ·植酸酶简介 | 第13页 |
| ·植酸酶的来源 | 第13-14页 |
| ·植酸酶的分类 | 第14-16页 |
| ·植酸酶作用机理 | 第16页 |
| ·植酸酶的酶活测定方法 | 第16-17页 |
| ·植酸酶的应用 | 第17-18页 |
| ·本课题的研究意义及主要内容 | 第18-20页 |
| ·研究意义 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 菌株 CZC0208 的初步鉴定及紫外诱变育种 | 第20-30页 |
| ·前言 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·CZC0208 的初步鉴定 | 第21-24页 |
| ·基因组的提取 | 第21-22页 |
| ·PCR 扩增 | 第22页 |
| ·PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳检测 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物回收 | 第23页 |
| ·ITS rDNA 序列分析与系统发育树构建 | 第23-24页 |
| ·CZC0208 的诱变育种 | 第24-26页 |
| ·无机磷标准曲线的测定 | 第24页 |
| ·低温植酸酶产生菌产酶活力的测定 | 第24-25页 |
| ·紫外诱变方法 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·CZC0208 的鉴定结果分析 | 第26-28页 |
| ·无机磷标准曲线 | 第28-29页 |
| ·紫外诱变致死率曲线 | 第29页 |
| ·紫外诱变后菌株的产酶能力 | 第29-30页 |
| 第三章 低温植酸酶产生菌的筛选及初步鉴定 | 第30-40页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·样品来源 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·酶活测定方法 | 第31页 |
| ·产低温植酸酶菌株的筛选 | 第31页 |
| ·形态学研究 | 第31页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第31-32页 |
| ·16s rDNA PCR 扩增引物的设计 | 第32页 |
| ·PCR 反应 | 第32页 |
| ·DNA 琼脂糖切胶纯化 | 第32-33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·SSCS 快速一步法制备感受态细胞 | 第33页 |
| ·连接产物转化 | 第33-34页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第34页 |
| ·转化子的鉴定 | 第34-35页 |
| ·16S rDNA 序列分析与系统发育树构建 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·筛选结果 | 第35-36页 |
| ·鉴定结果 | 第36-40页 |
| 第四章 CZC0806 所产低温植酸酶酶学性质初步研究 | 第40-44页 |
| ·实验材料与方法 | 第40-41页 |
| ·菌种 | 第40页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·酶活测定方法 | 第40页 |
| ·酶最适作用温度 | 第40页 |
| ·酶的热稳定性 | 第40页 |
| ·酶的最适 pH | 第40-41页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·酶最适温度 | 第41页 |
| ·酶的热稳定性 | 第41-42页 |
| ·酶的最适 pH | 第42页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第五章 CZC0806 的发酵产酶条件研究 | 第44-63页 |
| ·实验材料与方法 | 第44-47页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-47页 |
| ·酶活测定方法 | 第44页 |
| ·最适培养温度的确定 | 第44页 |
| ·时间-相对酶活曲线测定 | 第44-45页 |
| ·发酵培养基优化 | 第45-46页 |
| ·发酵条件优化 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-62页 |
| ·最适培养温度的确定 | 第47-48页 |
| ·时间-相对酶活曲线 | 第48页 |
| ·发酵培养基优化 | 第48-56页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·碳源最适浓度的确定 | 第49页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·氮源最适浓度的确定 | 第50页 |
| ·无机盐对产酶的影响 | 第50-51页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计结果 | 第51页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第51-52页 |
| ·响应面设计分析结果 | 第52-56页 |
| ·发酵条件优化 | 第56-62页 |
| ·发酵时间对酶活的影响 | 第56-57页 |
| ·温度对产酶的影响 | 第57-58页 |
| ·初始 pH 对产酶的影响 | 第58页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第58页 |
| ·转速对酶活的影响 | 第58-59页 |
| ·发酵条件的正交试验 | 第59-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第六章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 A 主要药品 | 第69-71页 |
| 附录 B 主要仪器 | 第71-72页 |
| 附录 C 测序图谱 | 第72-76页 |
| 附录 D 发表文章 | 第76页 |