| 符号说明 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 1 前言 | 第18-43页 |
| ·NAC转录因子研究进展 | 第18-24页 |
| ·NAC结构域及其分子功能 | 第18-19页 |
| ·NAC结构域的X射线晶体结构 | 第19页 |
| ·NAC转录因子的生物学功能 | 第19-24页 |
| ·参与器官边界建成，调控植株形态 | 第19-20页 |
| ·参与调控细胞分裂和细胞壁形态建成 | 第20-21页 |
| ·参与生长素信号传导，调控侧根发育和植株的衰老 | 第21-22页 |
| ·响应生物胁迫和非生物胁迫 | 第22-23页 |
| ·NAC转录因子的调控 | 第23-24页 |
| ·果实成熟的研究 | 第24-25页 |
| ·果实成熟的类型 | 第24页 |
| ·果实成熟相关的转录因子 | 第24-25页 |
| ·类胡萝卜素代谢研究进展 | 第25-27页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第25-26页 |
| ·类胡萝卜素代谢的调控 | 第26-27页 |
| ·乙烯生物合成和信号转导 | 第27-31页 |
| ·乙烯生物合成和调控 | 第27-29页 |
| ·乙烯信号转导 | 第29-31页 |
| ·ABA的合成代谢与分解代谢 | 第31-34页 |
| ·ABA的生物合成 | 第31-34页 |
| ·ABA的分解代谢 | 第34页 |
| ·乙烯与ABA对果实成熟的作用 | 第34-36页 |
| ·乙烯对果实成熟的作用 | 第34-35页 |
| ·ABA对果实成熟的作用 | 第35-36页 |
| ·ABA和乙烯在调控果实成熟过程中的关系 | 第36页 |
| ·果实成熟过程中的细胞壁代谢 | 第36-39页 |
| ·β-半乳糖苷酶 | 第36-37页 |
| ·果胶甲酯酶 | 第37页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶 | 第37-38页 |
| ·纤维素酶 | 第38页 |
| ·木葡聚糖內糖基转移酶 | 第38页 |
| ·扩展蛋白 | 第38-39页 |
| ·低温胁迫对植物的影响及低温信号转导 | 第39-40页 |
| ·低温对植物的影响 | 第39页 |
| ·低温信号转导 | 第39-40页 |
| ·拟南芥中的低温信号通路 | 第40-41页 |
| ·本研究的目的及其意义 | 第41-43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-68页 |
| ·实验材料 | 第43-46页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·材料处理 | 第43页 |
| ·菌株与载体 | 第43-44页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第44页 |
| ·PCR引物 | 第44-46页 |
| ·实验方法 | 第46-68页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第47页 |
| ·番茄NAC1 转录因子的克隆 | 第47-48页 |
| ·真核表达载体的构建及番茄转化 | 第48-53页 |
| ·回收 | 第48-49页 |
| ·连接 | 第49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第50页 |
| ·小量法提取质粒DNA | 第50-51页 |
| ·酶切质粒DNA | 第51页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第51页 |
| ·根癌农杆菌EHA105 感受态细胞的制备与转化 | 第51-52页 |
| ·农杆菌介导转化番茄 | 第52-53页 |
| ·SlNAC1 转录因子的定位 | 第53-54页 |
| ·pBI122- SlNAC1-GFP 表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·pBI122- SlNAC1-GFP 融合蛋白的亚细胞定位 | 第54页 |
| ·实时定量荧光PCR与半定量PCR | 第54-55页 |
| ·实时定量荧光PCR | 第54页 |
| ·半定量PCR | 第54-55页 |
| ·SlNAC1 转录因子的原核表达及Western杂交 | 第55-60页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第55页 |
| ·E.coli BL21 原核表达 | 第55页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55-56页 |
| ·原核表达蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·抗体的制备 | 第57页 |
| ·抗血清效价的测定（试管微量沉淀法） | 第57页 |
| ·Western杂交 | 第57-60页 |
| ·转基因番茄植株的检测 | 第60-61页 |
| ·CTAB微量法提取基因组DNA | 第60页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的qRT-PCR分析 | 第61页 |
| ·转基因植株的Western blot分析 | 第61页 |
| ·番茄果实硬度的测定 | 第61页 |
| ·番茄果实的色素含量测定 | 第61-62页 |
| ·番茄果实色素的提取 | 第61-62页 |
| ·番茄果实色素含量的测定 | 第62页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第62页 |
| ·番茄果实中乙烯含量的测定 | 第62-63页 |
| ·配制标准气体 | 第62页 |
| ·样品测定 | 第62-63页 |
| ·果实 ABA 含量测定 | 第63页 |
| ·样品提取和纯化 | 第63页 |
| ·ABA 含量测定 | 第63页 |
| ·ABA、NDGA和乙烯利处理果实 | 第63-64页 |
| ·基因芯片 | 第64页 |
| ·转录因子与启动子结合实验 | 第64-65页 |
| ·pAbAi 载体的构建 | 第64页 |
| ·AD 载体的构建 | 第64页 |
| ·酵母感受态细胞的制备（乙酸锂法） | 第64-65页 |
| ·酵母感受态细胞的转化 | 第65页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第65页 |
| ·生理指标的测定 | 第65-68页 |
| ·叶绿素荧光参数测定 | 第65-66页 |
| ·放氧活性的测定 | 第66页 |
| ·电解质外渗量测定、膜脂过氧化程度分析 | 第66页 |
| ·H_2O_2与O_2 染色分析及H_2O_2和O_2 含量测定 | 第66-67页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-96页 |
| ·SlNAC1 转录因子的分离及其特征 | 第68-70页 |
| ·SlNAC1 转录因子全长cDNA序列的克隆 | 第68页 |
| ·SlNAC1 转录因子全长cDNA序列及蛋白序列分析 | 第68-70页 |
| ·SlNAC1 蛋白的定位 | 第70-71页 |
| ·SlNAC1 蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第71-73页 |
| ·原核表达载体pET-SlNAC1 的构建 | 第71-72页 |
| ·SlNAC1 蛋白在BL21 中的表达 | 第72-73页 |
| ·SlNAC1 在番茄中的表达分析 | 第73-75页 |
| ·SlNAC1 在转录水平的表达 | 第73-75页 |
| ·SlNAC1 在逆境胁迫下的表达分析 | 第73-74页 |
| ·SlNAC1 在激素处理下的表达分析 | 第74-75页 |
| ·SlNAC1 在蛋白水平的表达 | 第75页 |
| ·SlNAC1 基因在番茄中的遗传转化 | 第75-78页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第75-76页 |
| ·转基因番茄植株的鉴定 | 第76-78页 |
| ·转基因番茄植株的PCR鉴定 | 第76-77页 |
| ·转基因番茄植株的qRT-PCR鉴定 | 第77-78页 |
| ·转基因番茄植株的Western鉴定 | 第78页 |
| ·SlNAC1 基因影响番茄果实的发育和成熟 | 第78-90页 |
| ·过表达或者抑制SlNAC1 基因影响番茄果实发育和成熟 | 第78-80页 |
| ·SlNAC1 基因参与番茄果实成熟的调控 | 第80-81页 |
| ·SlNAC1 通过调节相关基因表达改变果实着色 | 第81-82页 |
| ·过表达SlNAC1 减少了乙烯释放，而抑制SlNAC1 表达推迟了乙烯呼吸峰 | 第82-84页 |
| ·SlNAC1 通过ABA调节番茄果实成熟 | 第84-86页 |
| ·基因芯片揭示了SlNAC1 过表达株系中的基因表达变化 | 第86-89页 |
| ·SlNAC1 直接调控 ACS2、ACS4、ACO1 和 PSY1 | 第89-90页 |
| ·SlNAC1 基因提高了番茄植株的耐冷性 | 第90-96页 |
| ·低温胁迫下番茄幼苗及成苗的生长情况 | 第90-91页 |
| ·过表达SlNAC1 减轻了低温胁迫下PSII的光抑制 | 第91-92页 |
| ·过表达SlNAC1 保护了低温胁迫下生物膜的稳定性 | 第92-93页 |
| ·过表达SlNAC1 通过维持较高的SOD和CAT酶活减少了H2O2和O2 的积累 | 第93-95页 |
| ·SlNAC1 可能通过上调SlCBF1 的表达提高番茄的耐冷性 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-102页 |
| ·SlNAC1 基因编码一个NAC转录因子 | 第96页 |
| ·SlNAC1 基因的表达分析 | 第96-97页 |
| ·SlNAC1 调节番茄果实的发育和成熟 | 第97-100页 |
| ·SlNAC1 参与番茄果实成熟的调节 | 第97页 |
| ·SlNAC1 通过负调控乙烯合成影响番茄果实着色 | 第97-98页 |
| ·SlNAC1 通过正调控ABA合成调节番茄果实成熟 | 第98-99页 |
| ·SlNAC1 直接调控乙烯和番茄红素的合成 | 第99-100页 |
| ·SlNAC1 提高了番茄植株的抗低温能力 | 第100-102页 |
| 5 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第123页 |
