| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略语表 | 第11-12页 |
| 1. 前言 | 第12-24页 |
| ·木聚糖 | 第12页 |
| ·木聚糖酶 | 第12-18页 |
| ·木聚糖酶系 | 第12-13页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第13页 |
| ·木聚糖酶的分子结构 | 第13-16页 |
| ·木聚糖酶的作用机制 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶的理化性质 | 第17-18页 |
| ·木聚糖酶的基因工程 | 第18-21页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶的突变研究 | 第19-21页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第21-24页 |
| ·木聚糖酶在造纸技术中的应用 | 第21-22页 |
| ·木聚糖酶在动物饲料中的应用 | 第22页 |
| ·木聚糖酶在面包,食品和饮料中的应用 | 第22-23页 |
| ·木聚糖酶在药品和化学中的应用 | 第23页 |
| ·木聚糖酶在纺织工业中的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·菌株与质粒 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·溶液 | 第25-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·木聚糖酶基因xynA的获得方法 | 第27-41页 |
| ·Geobacillus stearothermophilus总DNA的抽提 | 第27-28页 |
| ·克隆xynA基因 | 第28页 |
| ·PCR产物纯化、回收与酶切 | 第28-29页 |
| ·碱裂解抽提细菌的质粒DNA | 第29页 |
| ·构建pGEX-6p-xynA重组表达载体 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| ·电转化 | 第30页 |
| ·检测阳性克隆子 | 第30-31页 |
| ·XynA的表达与纯化 | 第31-33页 |
| ·木聚糖酶的酶学性质 | 第33-35页 |
| ·xynA随机突变体库的构建 | 第35-38页 |
| ·酶的三维结构的模拟 | 第38页 |
| ·定点突变 | 第38-41页 |
| 3. 结果与分析 | 第41-60页 |
| ·Geobacillus stearothermophilus总DNA的提取 | 第41页 |
| ·PCR扩增xynA基因 | 第41-42页 |
| ·pGEX-6p-xynA重组质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·XynA蛋白的表达和纯化 | 第43-44页 |
| ·XynA的酶学性质分析 | 第44-48页 |
| ·木糖标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
| ·酶的最适反应pH和pH耐受性 | 第45页 |
| ·酶的最适反应温度和热稳定性 | 第45-46页 |
| ·XynA的底物特异性 | 第46-47页 |
| ·金属离子和化合物对木聚糖酶活性的影响 | 第47页 |
| ·XynA的动力学参数测定 | 第47-48页 |
| ·xynA基因的随机突变体库的构建 | 第48-54页 |
| ·易错PCR法扩增xynA基因 | 第48页 |
| ·易错PCR体库重组质粒的检测 | 第48-49页 |
| ·突变体库突变频率的分析 | 第49-50页 |
| ·高活性突变株的筛选 | 第50页 |
| ·饱和突变酶的诱导表达纯化 | 第50-51页 |
| ·突变体蛋白的酶学性质的分析 | 第51-54页 |
| ·酶的三维构象的分析 | 第54-55页 |
| ·定点饱和突变 | 第55-60页 |
| ·突变型重组质粒pGEX-6p-xynA的获得 | 第55-57页 |
| ·饱和突变酶的诱导表达 | 第57页 |
| ·饱和突变体的酶动力学常数分析 | 第57-59页 |
| ·突变体H179F的基本酶学性质 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-64页 |
| ·野生型的分析 | 第60-61页 |
| ·随机突变体的分析 | 第61-62页 |
| ·定点饱和突变体的分析 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录 | 第71-75页 |
| 1. 木聚糖酶的核苷酸和氨基酸序列 | 第71-74页 |
| 2. 研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |