摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 miR-203靶基因研究 | 第13-26页 |
1 材料与方法 | 第13-14页 |
·主要试剂和仪器 | 第13-14页 |
2 实验方法 | 第14-19页 |
·生物信息学方法预测 | 第14页 |
·构建报告基因质粒 | 第14-16页 |
·报告基因质粒的连接 | 第16-17页 |
·报告基因质粒的鉴定 | 第17页 |
·细胞培养及转染 | 第17-18页 |
·荧光素酶报告基因活性检测 | 第18-19页 |
3 统计学分析 | 第19页 |
4 结果 | 第19-24页 |
·miR-203潜在靶基因预测结果 | 第19-20页 |
·报告基因质粒的构建和鉴定 | 第20-23页 |
·SOCS3是miR-203的直接的靶基因 | 第23-24页 |
5 讨论 | 第24-26页 |
第二章 miR-203负向调控SOCS3,并活化STAT3信号通路 | 第26-46页 |
1 材料与方法 | 第26-27页 |
·主要试剂和仪器 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-39页 |
·设计并合成SOCS3和内参照β-actin的引物 | 第27页 |
·HEK293T细胞中总RNA抽提 | 第27-28页 |
·逆转录反应 | 第28页 |
·real-time PCR反应 | 第28-29页 |
·Western Blotting法检测SOCS3,STAT3和p-STAT3蛋白的表达水平 | 第29-35页 |
·人胚肾细胞(HEK293T细胞)中miR-203的表达 | 第35-38页 |
·细胞培养实验分组 | 第38-39页 |
3 统计学分析 | 第39-40页 |
4 实验结果 | 第40-42页 |
·miR-203降低SOCS3的表达 | 第40-41页 |
·miR-203模拟剂对STAT3信号通路的影响 | 第41页 |
·miR-203模拟剂能抑制HaCaT细胞增殖 | 第41-42页 |
·miR203抑制剂能逆转阿维A对HaCaT细胞的抗增殖作用 | 第42页 |
5 讨论 | 第42-45页 |
6 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
综述 | 第50-81页 |
参考文献 | 第69-81页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |