| 缩略语表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献回顾 | 第15-25页 |
| 一、 TB威胁的严重程度和新型疫苗研究的意义 | 第15页 |
| 二、 理想的预防TB疫苗的特征 | 第15页 |
| 三、 TB新型疫苗的研究进展 | 第15-23页 |
| 1） 现有的TB新型疫苗的概况和优缺点 | 第15-16页 |
| 2） 亚单位疫苗 | 第16-17页 |
| 3） 基因工程重组活疫苗 | 第17-18页 |
| 4） 减毒活疫苗 | 第18-19页 |
| 5） 基因疫苗 | 第19-23页 |
| 四、 展望 | 第23-25页 |
| 研究内容 | 第25-64页 |
| 第一部分 MTB Ag85B基因真核表达载体的构建和免疫原性研究 | 第25-52页 |
| 一、 实验材料 | 第26-29页 |
| 二、 实验方法 | 第29-38页 |
| 1． MTB的培养 | 第29页 |
| 2． MTB基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 3． MTB的培养和培养滤液蛋白（CFP）的制备 | 第29页 |
| 4． MTB H37Ra菌株Ag85B基因的扩增、克隆及序列分析 | 第29-32页 |
| 5． 亚克隆法构建Ag85B基因的真核表达载体 | 第32-33页 |
| 6． 表达载体的转化和酶切鉴定 | 第33页 |
| 7． 质粒的大量提取和纯化 | 第33-34页 |
| 8． 转染CHO细胞 | 第34-35页 |
| 9． RT-PCR检测Ag85B成熟蛋白mRNA的表达 | 第35-36页 |
| 10． 基因免疫 | 第36页 |
| 11． 基因免疫小鼠血清中Ag85B抗体的检测 | 第36-38页 |
| 三、 结果 | 第38-49页 |
| 1． Ag85B基因的PCR扩增结果 | 第38页 |
| 2． Ag85B基因的克隆 | 第38-39页 |
| 3． MTB H37Ra株Ag85B基因的序列分析 | 第39-42页 |
| 4． 同源性收索的结果 | 第42-46页 |
| 5． MTB Ag85B基因的真核表达载体的构建 | 第46页 |
| 6． Ag85B成熟蛋白mRNA在CHO细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 7． Dot blotting检测结果 | 第47-48页 |
| 8． 血清Ag85B抗体的滴度 | 第48-49页 |
| 四、 讨论 | 第49-52页 |
| 第二部分 MTB Ag85B成熟蛋白基因疫苗的细胞免疫反应和保护性的初步研究 | 第52-64页 |
| 一、 实验材料 | 第53页 |
| 二、 实验方法 | 第53-57页 |
| 1． MTB H37Rv菌株的培养和定量 | 第53页 |
| 2． 基因免疫 | 第53-54页 |
| 3． 脾脏细胞悬液的制备和单个核细胞的分离与计数 | 第54页 |
| 4． 抗原特异的脾淋巴细胞增殖实验 | 第54页 |
| 5． IFNγ的诱生 | 第54页 |
| 6． IFNγ含量的检测 | 第54-55页 |
| 7． MTB H37Rv毒株的攻击实验 | 第55页 |
| 8． 过继免疫保护实验 | 第55-56页 |
| 9． 脾脏细菌CFU计数及统计学检验 | 第56-57页 |
| 三、 结果 | 第57-60页 |
| 1． 脾淋巴细胞增殖实验 | 第57页 |
| 2． IFNγ的含量 | 第57-58页 |
| 3． 基因免疫的保护性 | 第58-59页 |
| 4． 过继免疫的保护性 | 第59-60页 |
| 四、 讨论 | 第60-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 致 谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
