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转录终止因子PDE191调控拟南芥rpoA基因的转录终止

中文摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-9页
1 引言第9-24页
   ·光合作用与叶绿体第9-12页
     ·叶绿体的形态结构及作用机理第9-11页
     ·叶绿体的起源第11-12页
   ·叶绿体的发育第12-14页
     ·叶绿体基因组第13-14页
     ·叶绿体基因的表达调控第14页
   ·植物叶色突变第14-15页
   ·mTERF(线粒体转录终止因子)蛋白家族第15-24页
     ·mTERF蛋白家族的结构特征及分类第16-18页
     ·mTERF蛋白家族的功能第18-21页
     ·mTERF蛋白家族在动物中的研究进展第21-22页
     ·mTERF蛋白家族在光合器官中的研究进展第22-23页
     ·mTERF蛋白在拟南芥中的分子功能推测第23-24页
2 材料与方法第24-52页
   ·实验材料第24-27页
     ·植物材料第24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·菌株、质粒第25页
     ·抗生素第25-26页
     ·培养基配方第26页
     ·其它第26-27页
   ·实验方法第27-52页
     ·拟南芥培养条件及转化第27-29页
       ·拟南芥的无菌培养第27-28页
       ·种植条件及农杆菌的转化第28页
       ·筛选拟南芥转基因植株第28-29页
     ·T-DNA插入突变体的鉴定第29页
     ·热击感受态E.coli制备第29-30页
     ·大肠杆菌的转化第30页
     ·制备农杆菌感受态细胞第30页
     ·农杆菌的转化过程第30-31页
     ·克隆后载体的鉴定第31页
     ·碱裂解法小量抽取质粒DNA第31-32页
     ·小量酶切鉴定体系第32页
     ·连接片段或载体的体系第32-33页
     ·载体构建第33-35页
     ·DNA和RNA的抽取第35-36页
       ·DNA的抽取第35页
       ·RNA的抽取第35-36页
     ·RT-PCR和Real-Time PCR第36-37页
       ·RNA反转录合成cDNA第一链第36页
       ·半定量PCR第36-37页
     ·亚细胞定位第37页
     ·透射电镜观察第37-38页
     ·免疫印迹杂交(Western Blot)第38-41页
     ·RNA印迹杂交(Northern Blot)第41-45页
     ·酵母双杂第45-46页
     ·蛋白表达纯化第46-49页
     ·EMSA第49-52页
3 结果与讨论第52-65页
   ·PDE191 基因突变导致拟南芥白化表型第52-54页
   ·PDE191 编码三个转录本第54-55页
   ·PDE191 基因编码一个mTERF蛋白定位至叶绿体中第55-57页
   ·pde191-1 突变体中rpoA多顺反子的转录终止受到影响第57-59页
   ·pde191-1 突变体中PEP调控的质体基因表达下调第59页
   ·PDE191 结合在rpoA基因的3’末端序列第59-61页
   ·讨论第61-65页
     ·PDE191基因在拟南芥叶绿体发育中起重要作用第61-62页
     ·PDE191蛋白调控rpoA基因的正常转录终止第62-65页
参考文献第65-74页
致谢第74页

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