中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
1 引言 | 第9-24页 |
·光合作用与叶绿体 | 第9-12页 |
·叶绿体的形态结构及作用机理 | 第9-11页 |
·叶绿体的起源 | 第11-12页 |
·叶绿体的发育 | 第12-14页 |
·叶绿体基因组 | 第13-14页 |
·叶绿体基因的表达调控 | 第14页 |
·植物叶色突变 | 第14-15页 |
·mTERF(线粒体转录终止因子)蛋白家族 | 第15-24页 |
·mTERF蛋白家族的结构特征及分类 | 第16-18页 |
·mTERF蛋白家族的功能 | 第18-21页 |
·mTERF蛋白家族在动物中的研究进展 | 第21-22页 |
·mTERF蛋白家族在光合器官中的研究进展 | 第22-23页 |
·mTERF蛋白在拟南芥中的分子功能推测 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-52页 |
·实验材料 | 第24-27页 |
·植物材料 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·菌株、质粒 | 第25页 |
·抗生素 | 第25-26页 |
·培养基配方 | 第26页 |
·其它 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-52页 |
·拟南芥培养条件及转化 | 第27-29页 |
·拟南芥的无菌培养 | 第27-28页 |
·种植条件及农杆菌的转化 | 第28页 |
·筛选拟南芥转基因植株 | 第28-29页 |
·T-DNA插入突变体的鉴定 | 第29页 |
·热击感受态E.coli制备 | 第29-30页 |
·大肠杆菌的转化 | 第30页 |
·制备农杆菌感受态细胞 | 第30页 |
·农杆菌的转化过程 | 第30-31页 |
·克隆后载体的鉴定 | 第31页 |
·碱裂解法小量抽取质粒DNA | 第31-32页 |
·小量酶切鉴定体系 | 第32页 |
·连接片段或载体的体系 | 第32-33页 |
·载体构建 | 第33-35页 |
·DNA和RNA的抽取 | 第35-36页 |
·DNA的抽取 | 第35页 |
·RNA的抽取 | 第35-36页 |
·RT-PCR和Real-Time PCR | 第36-37页 |
·RNA反转录合成cDNA第一链 | 第36页 |
·半定量PCR | 第36-37页 |
·亚细胞定位 | 第37页 |
·透射电镜观察 | 第37-38页 |
·免疫印迹杂交(Western Blot) | 第38-41页 |
·RNA印迹杂交(Northern Blot) | 第41-45页 |
·酵母双杂 | 第45-46页 |
·蛋白表达纯化 | 第46-49页 |
·EMSA | 第49-52页 |
3 结果与讨论 | 第52-65页 |
·PDE191 基因突变导致拟南芥白化表型 | 第52-54页 |
·PDE191 编码三个转录本 | 第54-55页 |
·PDE191 基因编码一个mTERF蛋白定位至叶绿体中 | 第55-57页 |
·pde191-1 突变体中rpoA多顺反子的转录终止受到影响 | 第57-59页 |
·pde191-1 突变体中PEP调控的质体基因表达下调 | 第59页 |
·PDE191 结合在rpoA基因的3’末端序列 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-65页 |
·PDE191基因在拟南芥叶绿体发育中起重要作用 | 第61-62页 |
·PDE191蛋白调控rpoA基因的正常转录终止 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74页 |