摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
主要英文缩写表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-18页 |
·SA 及其生理作用 | 第12-13页 |
·植物根系的波动生长模式 | 第13-14页 |
·拟南芥 NO 合成相关蛋白 1(AtNOA1) | 第14-16页 |
·AtNOA1 与 NO | 第14-15页 |
·AtNOA1 的蛋白结构 | 第15页 |
·AtNOA1 的生理功能 | 第15页 |
·AtNOA1 蛋白的定位 | 第15-16页 |
·选题意义及立题依据 | 第16-18页 |
2. 材料与方法 | 第18-32页 |
·实验材料 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·质粒载体及菌株 | 第18页 |
·实验试剂的配置及保存 | 第18-22页 |
·实验试剂 | 第18-19页 |
·常用实验溶液 | 第19页 |
·常用培养基的配制 | 第19页 |
·常用抗生素 | 第19-20页 |
·PCR 引物序列 | 第20页 |
·蛋白原核诱导表达及纯化试剂的配置 | 第20-21页 |
·Western Blot 试剂的配置 | 第21-22页 |
·蛋白定量及酶活性测定试剂的配置 | 第22页 |
·拟南芥原生质体分离及瞬时表达溶液的配置 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-32页 |
·拟南芥的培养与种植 | 第22-23页 |
·根波动生长药理学处理方法 | 第23页 |
·拟南芥原生质体分离及瞬时表达实验方法 | 第23-24页 |
·拟南芥基因组 DNA 小量提取 | 第24页 |
·拟南芥总 RNA 的提取(Trizol 法) | 第24-25页 |
·mRNA 反转录合成 cDNA | 第25页 |
·重组质粒构建方法 | 第25-26页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第26页 |
·AtNOA1 在大肠杆菌 BL21(DE3)菌株内诱导表达 | 第26-27页 |
·原核表达蛋白的纯化 | 第27页 |
·纯化蛋白的 Western Blot 检测 | 第27-28页 |
·Bradford 法测定纯化蛋白的浓度 | 第28页 |
·AtNOA1 的酶活性分析 | 第28-29页 |
·转基因材料的构建 | 第29-30页 |
·拟南芥的杂交 | 第30页 |
·T-DNA 插入突变纯合体鉴定 | 第30-32页 |
3. 结果分析 | 第32-46页 |
·AtNOA1 参与 SA 诱导的拟南芥根波动性生长 | 第32-33页 |
·SA 诱导的根波动生长不依赖于植物体内的 NO 产生 | 第33-34页 |
·AtNOA1 的亚细胞定位分析 | 第34-38页 |
·AtNOA1-GFP 瞬时表达载体的构建 | 第34-35页 |
·AtNOA1 的叶肉细胞原生质体瞬时表达及亚细胞定位分析 | 第35-36页 |
·植株永久表达 AtNOA1-GFP 载体的构建及阳性植株筛选 | 第36-37页 |
·AtNOA1-GFP 在植物体内的亚细胞定位分析 | 第37-38页 |
·SA 对 AtNOA1-GFP 亚细胞定位及根细胞形态的影响 | 第38-39页 |
·AtNOA1 蛋白原核诱导表达、纯化及 cGTP 酶活性测定 | 第39-44页 |
·pET28a-NOA1 原核表达载体的构建及诱导表达 | 第39-41页 |
·6His- NOA1aa102-561的体外纯化及 Western-Blot 检测 | 第41页 |
·cGTP 酶活性测定 | 第41-44页 |
·AtNOA1 参与调节 SA 引起的根生长素分布及含量变化 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
·AtNOA1 参与 SA 诱导的拟南芥根波动性生长 | 第46页 |
·NO 与 SA 诱导的根波动性生长的关系的初步分析 | 第46-47页 |
·AtNOA1 的亚细胞定位分析 | 第47页 |
·SA 对 AtNOA1 的 cGTP 酶活性及含量的影响 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-50页 |
6 展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |