| 致谢 | 第1-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| 1 稻瘟病概述 | 第15-17页 |
| ·稻瘟病及病原菌 | 第15-16页 |
| ·稻瘟病发病规律 | 第16页 |
| ·稻瘟病菌的侵染循环 | 第16-17页 |
| 2 稻瘟菌致病相关基因的研究进展 | 第17-23页 |
| ·产孢相关基因 | 第18-19页 |
| ·附着孢发育相关基因 | 第19-23页 |
| ·界面硬度和疏水性影响附着胞的分化 | 第19页 |
| ·分生孢子分泌疏水蛋白识别胞外信号 | 第19-20页 |
| ·细胞质膜跨膜蛋白和胞外信号传导 | 第20-21页 |
| ·附着胞黑色素层的沉积为膨压的形成提供必要条件 | 第21-22页 |
| ·分生孢子内含物与附着胞膨压形成 | 第22-23页 |
| ·附着胞细胞骨架重建和侵入栓的形成与附着胞的侵入 | 第23页 |
| 3 农杆菌介导的稻瘟病菌T-DNA转化和插入突变研究 | 第23-25页 |
| ·丝状真菌遗传转化的研究进展 | 第23-24页 |
| ·农杆菌介导的T-DNA转化及其优势分析 | 第24-25页 |
| 4 TAIL-PCR(THERMAL ASMMETRIC INTERLACED PCR)---扩增侧翼序列技术 | 第25-26页 |
| 5 细胞色素P450单加氧酶 | 第26-27页 |
| 6 本研究的目的意义和技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-41页 |
| 1. 材料 | 第28-32页 |
| ·实验菌株、质粒载体及水稻、大麦致病性测定品种 | 第28-29页 |
| ·实验菌株 | 第28页 |
| ·质粒载体 | 第28页 |
| ·水稻、大麦致病性测定品种 | 第28-29页 |
| ·各类抗生素、培养基及工具酶 | 第29-31页 |
| ·各类抗生素 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-31页 |
| ·工具酶 | 第31页 |
| ·各类生化试剂、溶液及试剂盒 | 第31-32页 |
| 2 稻瘟病菌生物学性状测定试验 | 第32-33页 |
| ·菌落生长速度及菌落特性 | 第32页 |
| ·稻瘟病菌产孢培养和产孢量 | 第32页 |
| ·附着胞形成 | 第32-33页 |
| ·大麦和水稻离体接种 | 第33页 |
| ·洋葱表皮穿透实验 | 第33页 |
| 3 PCR扩增 | 第33-35页 |
| ·常规PCR反应体系 | 第33-34页 |
| ·细菌菌落PCR反应体系 | 第34页 |
| ·高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)反应体系及反应程序 | 第34-35页 |
| 4 质粒DNA、基因组DNA及小片段DNA相关操作 | 第35-37页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA提取(CTAB法) | 第36页 |
| ·DNA酶切 | 第36-37页 |
| ·胶回收(Axyprep DNA gel extraction kit回收法) | 第37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·酶切DNA片段的去磷酸化(60μl反应体系) | 第37页 |
| 5 细菌和真菌转化 | 第37-41页 |
| ·农杆菌介导的T-DNA转化 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及细菌转化 | 第38-39页 |
| ·稻瘟菌原生质体制备与转化 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-54页 |
| 1 致病缺陷突变体KD-560的获得 | 第41-42页 |
| ·农杆菌介导的稻瘟菌T-DNA转化 | 第41页 |
| ·转化子致病性筛选和突变体KD-560的获得 | 第41-42页 |
| ·突变体KD-560遗传稳定性检测 | 第42页 |
| 2 MOCYP537A3基因的分离 | 第42-49页 |
| ·KD-560 T-DNA插入位点的鉴定 | 第42-44页 |
| ·TAIL-PCR产物的克隆、测序 | 第44页 |
| ·MoCYP537A3基因获得与分析 | 第44-46页 |
| ·MoCYP537A3基因同源性分析 | 第46-49页 |
| 3 KD-560表型初步分析 | 第49-54页 |
| ·致病性分析 | 第49页 |
| ·菌落形态 | 第49-51页 |
| ·分生孢子和附着孢形成观察 | 第51-53页 |
| ·洋葱表皮穿透 | 第53页 |
| ·突变体KD-560互补载体的构建 | 第53-54页 |
| 第四章 全文总结讨论及后续研究 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
