| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-17页 |
| 1 引言 | 第17-43页 |
| ·蒙古马与纯血马品种间抗病力差异 | 第17-18页 |
| ·抗病力与抗病育种 | 第18-20页 |
| ·抗性 | 第18-19页 |
| ·抗病育种 | 第19-20页 |
| ·马免疫系统概述 | 第20-26页 |
| ·免疫器官 | 第20-23页 |
| ·免疫细胞 | 第23-24页 |
| ·免疫分子 | 第24-25页 |
| ·免疫应答 | 第25-26页 |
| ·Toll 样受体概述 | 第26-36页 |
| ·Toll 样受体的结构 | 第27-28页 |
| ·Toll 样受体家族成员 | 第28-33页 |
| ·Toll 样受体信号传导途径 | 第33-36页 |
| ·免疫学检测方法及免疫相关基因研究技术手段 | 第36-40页 |
| ·免疫学检测方法 | 第36-37页 |
| ·免疫相关基因多态性研究技术手段 | 第37-38页 |
| ·免疫相关基因表达研究技术手段 | 第38-40页 |
| ·本研究的目的、意义及主要研究内容 | 第40-43页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
| ·本研究的主要内容与技术路线 | 第41-43页 |
| 2 实验一蒙古马血液生化、免疫和抗氧化指标的检测 | 第43-52页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验样品 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·血液样品的采集与处理 | 第43-44页 |
| ·血清不同指标的测定方法 | 第44页 |
| ·数据处理及分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·蒙古马与纯血马血清生化指标测定结果 | 第44-46页 |
| ·蒙古马与纯血马血清免疫指标测定结果 | 第46页 |
| ·蒙古马与纯血马血清抗氧化指标测定结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-52页 |
| ·蒙古马与纯血马血清生化指标比较 | 第47-49页 |
| ·蒙古马与纯血马血清免疫指标比较 | 第49-50页 |
| ·蒙古马与纯血马血清抗氧化指标比较 | 第50-52页 |
| 3 实验二蒙古马 TLR2、TLR4 基因多态性分析 | 第52-71页 |
| ·实验材料 | 第52-55页 |
| ·实验样品 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·主要试剂 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·血液基因组 DNA 的提取及检测 | 第55-56页 |
| ·PCR 反应体系及过程 | 第56-57页 |
| ·TLR2 基因和 TLR4 基因多态性检测方法 | 第57-58页 |
| ·不同基因型的克隆与测序 | 第58-59页 |
| ·数据处理及分析 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-68页 |
| ·血液基因组 DNA 提取结果 | 第59-60页 |
| ·TLR2 基因多态性结果 | 第60-64页 |
| ·TLR4 基因多态性结果 | 第64-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·TLR2 基因多态性分析 | 第68-69页 |
| ·TLR4 基因多态性分析 | 第69-71页 |
| 4 实验三蒙古马不同组织 TLRs mRNA 转录水平研究 | 第71-85页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·实验动物及其组织样品 | 第71页 |
| ·主要仪器设备 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·组织样品总 RNA 的提取 | 第71-72页 |
| ·RT-qPCR 反应 | 第72-73页 |
| ·标准品的制备及标准曲线的制作 | 第73-74页 |
| ·数据处理及分析 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-80页 |
| ·组织样品总 RNA 的提取结果 | 第74-75页 |
| ·TLRs 基因 PCR 扩增结果 | 第75页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第75-78页 |
| ·蒙古马与纯血马 TLRs 基因的组织差异表达分析 | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-85页 |
| ·实时荧光定量 PCR 结果的评估 | 第80-81页 |
| ·TLRs mRNA 转录水平的分析 | 第81-85页 |
| 5 实验四 LPS 诱导蒙古马单核细胞免疫相关基因的表达 | 第85-99页 |
| ·实验材料 | 第85-86页 |
| ·实验动物 | 第85页 |
| ·主要仪器和设备 | 第85页 |
| ·主要试剂 | 第85-86页 |
| ·实验步骤 | 第86-89页 |
| ·外周血单个核细胞的分离 | 第86页 |
| ·单核细胞的分离和培养 | 第86页 |
| ·细胞上清液中细胞因子的检测 | 第86-87页 |
| ·单核细胞的鉴定 | 第87页 |
| ·单核细胞总 RNA 提取 | 第87页 |
| ·RT-qPCR 反应 | 第87-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-95页 |
| ·单核细胞的形态特征 | 第89页 |
| ·单核细胞总 RNA 的提取结果 | 第89页 |
| ·TLRs 基因 PCR 扩增结果 | 第89-90页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第90-93页 |
| ·LPS 刺激对蒙古马与纯血马单核细胞中免疫相关基因表达量的影响 | 第93-94页 |
| ·细胞上清液中细胞因子的检测结果 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-99页 |
| 6 实验五蒙古马-脾脏与纯血马-脾脏差异表达基因的筛选 | 第99-114页 |
| ·实验材料 | 第99-100页 |
| ·实验动物 | 第99页 |
| ·主要仪器和设备 | 第99页 |
| ·主要试剂 | 第99-100页 |
| ·实验步骤 | 第100-103页 |
| ·总 RNA 提取和检测 | 第100页 |
| ·测序文库制备 | 第100-101页 |
| ·文库测序 | 第101页 |
| ·基因表达谱数据可靠性验证 | 第101-102页 |
| ·数据处理及分析 | 第102-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-111页 |
| ·测序文库建立 | 第103-104页 |
| ·测序数据处理和分析结果 | 第104-111页 |
| ·讨论 | 第111-114页 |
| ·RNA 测序质量分析 | 第111页 |
| ·Reads 染色体定位 | 第111-112页 |
| ·基因差异表达分析 | 第112页 |
| ·差异表达基因 GO 富集分析 | 第112-113页 |
| ·差异表达基因 KEGG 富集分析 | 第113-114页 |
| 7 全文总体结论、创新点及进一步研究的问题 | 第114-116页 |
| ·结论 | 第114-115页 |
| ·创新点 | 第115页 |
| ·进一步研究的问题 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-129页 |
| 附录 | 第129-130页 |
| 作者简介 | 第130页 |
