| 研究生导师简介 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 主要符号表 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分 RhoA 基因 siRNA 重组腺病毒的构建 | 第15-31页 |
| 一、 材料和方法 | 第15-26页 |
| （一）、实验材料 | 第15-19页 |
| 1. 材料试剂 | 第15-16页 |
| 2. 仪器和器材 | 第16-17页 |
| 3. 试剂配制 | 第17-19页 |
| （二）、实验方法 | 第19-26页 |
| 1. 腺病毒载体的构建 | 第19-22页 |
| 2. 腺病毒的制备 | 第22-25页 |
| 3. 腺病毒的扩增 | 第25页 |
| 4. 腺病毒的纯化 | 第25页 |
| 5. 腺病毒滴度的测定 | 第25-26页 |
| 二、 实验结果 | 第26-31页 |
| 1. RhoA 腺病毒 siRNA 的构建 | 第26-29页 |
| 2. 腺病毒 AdsiRNA 的制备、扩增 | 第29-30页 |
| 3. 腺病毒 AdsiRNA 的纯化、滴度测定 | 第30-31页 |
| 第二部分 siRNA 腺病毒体外抑制肝癌细胞 RhoA 基因的研究 | 第31-40页 |
| 一、 材料和方法 | 第31-37页 |
| （一）、实验材料 | 第31-33页 |
| 1. 材料试剂 | 第31页 |
| 2. 仪器和器材 | 第31-32页 |
| 3. 试剂配制 | 第32-33页 |
| （二）、实验方法 | 第33-37页 |
| 1．Western Blot 检测 RhoA 蛋白的表达 | 第33-36页 |
| 2. 半定量 PCR 检测 RhoA mRNA 的变化 | 第36-37页 |
| 二、 实验结果 | 第37-40页 |
| 1. Western Blot 检测 RhoA 蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 2. 半定量 RT-PCR 检测 RhoAmRNA 的变化 | 第38-40页 |
| 第三部分 腺病毒干扰联合应用 TNF-α诱导肝癌细胞凋亡 | 第40-47页 |
| 一、 材料和方法 | 第40-42页 |
| （一）、实验材料 | 第40页 |
| 1. 材料试剂 | 第40页 |
| 2. 仪器和耗材 | 第40页 |
| 3. 试剂配制 | 第40页 |
| （二）、实验方法 | 第40-42页 |
| 1. MTT 检测细胞增殖情况 | 第40-41页 |
| 2．采用 TUNEL 反应进行 HepG2 细胞内 DNA 片段化检测 | 第41-42页 |
| 二、 实验结果 | 第42-44页 |
| 1. MTT 检测细胞增殖 | 第42页 |
| 2. TUNEL 反应检测 HepG2 细胞核内 DNA 片段化 | 第42-44页 |
| 三、 讨论 | 第44-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述 | 第51-57页 |
| 参考文献 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
