巴氏毕赤酵母基因工程菌高密度发酵表达重组人源胶原蛋白
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1 绪论 | 第13-35页 |
| ·胶原蛋白概述 | 第13-22页 |
| ·胶原蛋白的分布 | 第13页 |
| ·胶原蛋白的类型 | 第13-18页 |
| ·胶原蛋白的结构及理化性质 | 第18-20页 |
| ·胶原蛋白的功能及应用 | 第20-21页 |
| ·胶原、胶原蛋白与明胶 | 第21-22页 |
| ·胶原蛋白的生产方法 | 第22-26页 |
| ·动物源胶原蛋白的传统提取法 | 第22页 |
| ·类胶原蛋白的化学合成法 | 第22-23页 |
| ·胶原蛋白的重组表达 | 第23-26页 |
| ·重组人胶原蛋白的优势与发展趋势 | 第26-27页 |
| ·重组人胶原蛋白的优势 | 第26-27页 |
| ·重组人胶原蛋白的发展趋势 | 第27页 |
| ·巴氏毕赤酵母表达系统 | 第27-29页 |
| ·巴氏毕赤酵母高密度发酵 | 第29-33页 |
| ·高密度发酵的主要影响因素 | 第29-31页 |
| ·高密度发酵工艺——两阶段培养法 | 第31-33页 |
| ·课题的研究思路和研究意义 | 第33-34页 |
| ·课题的主要研究内容 | 第34-35页 |
| 2 重组人源胶原蛋白在巴氏毕赤酵母中的表达形式 | 第35-40页 |
| ·材料和方法 | 第36-37页 |
| ·菌株 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·培养方法 | 第37页 |
| ·分析方法 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测分析 | 第37-39页 |
| ·表达产物的PAGE检测分析 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 3 发酵条件优化 | 第40-51页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·培养方法 | 第41页 |
| ·分析方法 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-49页 |
| ·BBD设计 | 第41-42页 |
| ·实验设计安排及结果 | 第42-44页 |
| ·因素水平优化 | 第44-48页 |
| ·模型适合性检验 | 第48-49页 |
| ·优化验证 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 4 高密度发酵工艺优化 | 第51-77页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·发酵设备 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·培养方法 | 第51-53页 |
| ·分析方法 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-67页 |
| ·初始发酵方案 | 第54-55页 |
| ·初始诱导菌体湿重300g/L的优化方案 | 第55-56页 |
| ·培养基流加优化方案 | 第56-61页 |
| ·模拟细胞循环发酵 | 第61-63页 |
| ·半连续发酵 | 第63-64页 |
| ·在12.5L发酵罐上的小规模放大 | 第64-67页 |
| ·高密度发酵动力学 | 第67-76页 |
| ·菌体生长模型 | 第68-70页 |
| ·产物形成模型 | 第70-72页 |
| ·基质消耗动力学 | 第72-74页 |
| ·模型的验证 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 5 重组人源胶原蛋白的分离纯化 | 第77-86页 |
| ·材料与方法 | 第77-79页 |
| ·试剂 | 第77页 |
| ·仪器 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78页 |
| ·分析方法 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-84页 |
| ·重组人源胶原蛋白二聚体与单体的分离 | 第79-80页 |
| ·重组人源胶原蛋白单体的制备 | 第80-82页 |
| ·重组人源胶原蛋白二聚体的制备 | 第82-84页 |
| ·本章小结 | 第84-86页 |
| 6 重组人源胶原蛋白的结构表征及生物活性 | 第86-103页 |
| ·材料与方法 | 第86-88页 |
| ·试剂 | 第86页 |
| ·仪器 | 第86页 |
| ·方法 | 第86-87页 |
| ·生物活性检测 | 第87-88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-101页 |
| ·重组人源胶原蛋白的结构 | 第88-97页 |
| ·重组人源胶原蛋白的水溶性 | 第97-98页 |
| ·重组人源胶原蛋白的成膜性能 | 第98-99页 |
| ·重组人源胶原蛋白的黏度 | 第99-100页 |
| ·重组人源胶原蛋白的生物活性 | 第100-101页 |
| ·本章小结 | 第101-103页 |
| 7 巴氏毕赤酵母基因工程菌的空间生物学效应 | 第103-118页 |
| ·材料与方法 | 第107-111页 |
| ·高磁场重力环境(HMGE)诱变 | 第107-109页 |
| ·低剪切力模拟微重力环境(LSMMG)的影响 | 第109-111页 |
| ·结果与讨论 | 第111-117页 |
| ·高磁场重力环境(HMGE)诱变 | 第111-113页 |
| ·低剪切力模拟微重力环境(LSMMG)的影响 | 第113-117页 |
| ·本章小结 | 第117-118页 |
| 8 重组人源胶原蛋白-壳聚糖复合物的制备与表征 | 第118-130页 |
| ·材料与方法 | 第119-120页 |
| ·试剂 | 第119页 |
| ·主要仪器及设备 | 第119页 |
| ·实验方法 | 第119-120页 |
| ·结果与讨论 | 第120-129页 |
| ·外观及物理性状 | 第120-121页 |
| ·重组人源胶原蛋白-壳聚糖复合物的结构 | 第121-129页 |
| ·本章小结 | 第129-130页 |
| 9 结论 | 第130-133页 |
| ·结论 | 第130-131页 |
| ·创新点 | 第131页 |
| ·本课题的发展趋势 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-147页 |
| 附录 | 第147-148页 |
