| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩写符号及中英文对照 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1 土壤盐渍化 | 第14页 |
| 2 盐胁迫对植物的影响与植物的耐盐机制 | 第14-19页 |
| ·盐胁迫对植物的影响 | 第14-17页 |
| ·盐胁迫对种子萌发的影响 | 第14-15页 |
| ·盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第15-16页 |
| ·盐胁迫对植物光合作用的影响 | 第16页 |
| ·盐胁迫对植物生理生化特性的影响 | 第16-17页 |
| ·植物的耐盐机制 | 第17-19页 |
| ·种子的形态多样性 | 第17-18页 |
| ·植株的形态多样性 | 第18页 |
| ·盐离子吸收与外排 | 第18页 |
| ·活性氧清除机制 | 第18-19页 |
| ·渗透调节机制 | 第19页 |
| ·离子稳态的调节 | 第19页 |
| 3 植物耐盐基因工程的研究 | 第19-22页 |
| ·渗透调节物质合成相关基因的研究 | 第20页 |
| ·离子通道蛋白基因的研究 | 第20-21页 |
| ·植物信号传导基因的研究 | 第21页 |
| ·转录因子与植物耐盐性 | 第21-22页 |
| 4 耐盐植物新品种的选育 | 第22-23页 |
| 5 苜蓿耐盐性研究进展 | 第23-24页 |
| ·紫花苜蓿耐盐品种的选育 | 第23-24页 |
| ·紫花苜蓿耐盐相关基因的克隆 | 第24页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 MsERF8和MsERF11基因的克隆与序列分析 | 第25-34页 |
| 1 引言 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-29页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·载体、试剂和菌株 | 第25-26页 |
| ·基因克隆与生物信息学分析 | 第26-29页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·总RNA提取 | 第26页 |
| ·总RNA纯化 | 第26-27页 |
| ·总RNA质量鉴定 | 第27页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增与目的片段回收 | 第28页 |
| ·PCR产物连接克隆载体 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态菌株DH5α转化 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆鉴定与测序 | 第29页 |
| ·生物信息学分析 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-33页 |
| ·紫花苜蓿MsERF8和MsERF11基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·紫花苜蓿总RNA提取 | 第29-30页 |
| ·紫花苜蓿MsERF8和MsERF11基因cDNA序列的扩增 | 第30页 |
| ·目的基因编码蛋白特征的分析 | 第30-33页 |
| 4 讨论 | 第33页 |
| 5 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 转录起始位点上游序列的扩增与分析 | 第34-41页 |
| 1 引言 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·试剂和菌株 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·MsERF8和MsERF11基因全长序列的获得 | 第35-36页 |
| ·紫花苜蓿DNA提取 | 第35-36页 |
| ·MsERF8和MsERF11基因全长序列的扩增 | 第36页 |
| ·转录起始位点上游序列的扩增与顺式作用元件分析 | 第36-37页 |
| ·染色体步移 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-39页 |
| ·MsERF8和MsERF11基因的结构分析 | 第37页 |
| ·MsERF8和MsERF11基因启动子的分析 | 第37-39页 |
| ·MsERF8基因启动子的顺式作用元件分析 | 第37-38页 |
| ·MsERF11基因启动子的顺式作用元件分析 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 表达分析与亚细胞定位 | 第41-51页 |
| 1 引言 | 第41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·植物材料与处理 | 第41-42页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·半定量和实时定量分析 | 第43页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第43页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第43页 |
| ·目的基因编码蛋白的亚细胞定位 | 第43-45页 |
| ·亚细胞定位载体构建 | 第43-44页 |
| ·金粉悬浮液制备 | 第44页 |
| ·子弹制备 | 第44-45页 |
| ·洋葱表皮的准备 | 第45页 |
| ·洋葱转化与检测 | 第45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-48页 |
| ·MsERF8和MsERF11基因的表达分析 | 第45-47页 |
| ·组织表达差异性 | 第45-46页 |
| ·胁迫条件下的表达特性 | 第46-47页 |
| ·激素处理条件下的表达特性 | 第47页 |
| ·亚细胞定位 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 烟草和拟南芥转化及耐盐性鉴定 | 第51-60页 |
| 1 引言 | 第51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·植物材料 | 第51-52页 |
| ·试剂、菌株和载体 | 第52页 |
| ·培养基配方 | 第52页 |
| ·烟草和拟南芥转化 | 第52-54页 |
| ·引物设计 | 第52-53页 |
| ·植物表达载体构建 | 第53页 |
| ·农杆菌感受态制备及转化 | 第53页 |
| ·烟草转化 | 第53-54页 |
| ·拟南芥转化 | 第54页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第54页 |
| ·转基因烟草和拟南芥的耐盐性分析 | 第54-55页 |
| ·种子发芽率测定 | 第54-55页 |
| ·叶片相对含水量测定 | 第55页 |
| ·丙二醛含量测定 | 第55页 |
| ·脯氨酸含量 | 第55页 |
| ·数据处理 | 第55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第55-56页 |
| ·转MsERF8基因烟草的鉴定及实时定量分析 | 第55-56页 |
| ·转MsERF11基因拟南芥的半定量RT-PCR分析 | 第56页 |
| ·转基因烟草和拟南芥的耐盐性分析 | 第56-58页 |
| ·转MsERF8基因烟草的耐盐性分析 | 第56-57页 |
| ·转MsERF11基因拟南芥的耐盐性分析 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| 第六章 MsWRKY56基因的克隆与序列分析 | 第60-67页 |
| 1 引言 | 第60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·植物材料 | 第60-61页 |
| ·菌株、试剂与载体 | 第61页 |
| ·MsWRKY56基因的克隆 | 第61页 |
| ·电子克隆 | 第61页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第61页 |
| ·生物信息学分析 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·MsWRKY56基因cDNA序列的获得 | 第62-63页 |
| ·MsWRKY56基因编码蛋白的理化性质分析 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 5 小结 | 第66-67页 |
| 第七章 结论与展望 | 第67-70页 |
| 1 全文结论 | 第67-68页 |
| ·MsERF8基因和MsERF11基因的克隆与序列分析 | 第67页 |
| ·顺式作用元件分析 | 第67页 |
| ·MsERF8基因和MsERF11基因的表达分析与亚细胞定位 | 第67-68页 |
| ·烟草和拟南芥转化及转基因植株的耐盐性 | 第68页 |
| ·MsWRKY56基因的克隆与序列分析 | 第68页 |
| 2 本研究创新点 | 第68页 |
| 3 后续工作展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
