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鸡卵黄免疫球蛋白的分离纯化、mPEG修饰及其稳定性研究

摘要第1-13页
Abstract第13-17页
缩略语表第17-18页
第一章 文献综述第18-37页
 1 禽蛋中卵黄球蛋白简介第18-22页
   ·卵黄球蛋白的种类及性质第18-20页
   ·免疫球蛋白(Ig)的结构与功能第20页
   ·鸡卵黄免疫球蛋白的特性第20-22页
     ·IgY的热稳定性第20-21页
     ·IgY的酸碱稳定性第21页
     ·IgY对消化液的敏感性第21页
     ·IgY对变性剂的稳定性第21页
     ·IgY的免疫学特性第21-22页
 2 免疫球蛋白在禽类体内的转移过程第22-23页
   ·母体血清到蛋黄中的转移第22页
   ·胚胎卵囊到胚胎血液中的转移第22-23页
 3 IgY的分离纯化第23-27页
   ·水溶性组分的分离第23-25页
   ·IgY的分离纯化第25-27页
 4 IgY的应用研究第27-30页
   ·IgY在食品中的应用第27页
   ·IgY在畜禽产业中的应用第27-28页
   ·IgY在临床上的应用第28-29页
   ·新型饲料添加剂第29-30页
   ·在人类抗生育方面的应用第30页
 5 蛋白质的PEG修饰第30-34页
   ·PEG修饰技术第30-32页
   ·PEG修饰对蛋白质性质和生物活性的影响第32-33页
   ·PEG修饰方法第33-34页
 6 研究的目的意义及主要研究内容第34-37页
   ·研究目的及意义第34-35页
   ·主要研究内容第35-37页
第二章 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的分离纯化及鉴定第37-52页
 1. 材料与方法第37-42页
   ·原料于试剂第37-38页
     ·仪器与设备第38页
   ·方法第38-42页
     ·粗IgY制备第38-39页
       ·水稀释法获得水溶性组分(WSF)第38-39页
       ·PEG沉淀蛋白第39页
       ·透析第39页
     ·离子交换色谱法纯化IgY第39页
     ·蛋白含量测定第39-40页
       ·总蛋白含量测定第39-40页
       ·粗IgY含量测定第40页
     ·IgY纯度测定第40页
     ·IgY回收率测定第40页
     ·IgY活性测定第40-41页
     ·脂肪含量的测定第41-42页
 2 结果与分析第42-51页
   ·水稀释法工艺条件对IgY分离效果的影响第42-45页
     ·不同稀释倍数对IgY分离效果的影响第42-43页
     ·不同pH对IgY分离效果的影响第43-44页
     ·不同稀释静置时间对IgY分离效果的影响第44-45页
   ·不同浓度的PEG6000对IgY沉淀效果的影响第45-48页
     ·回收率的测定第45-46页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第46-48页
   ·离子交换法纯化IgY条件的确定第48-50页
     ·磷酸然缓冲液(PBS)pH值确定第48-49页
     ·磷酸盐缓冲液(PBS)离子强度确定第49-50页
   ·产品回收率、纯度以及活性测定第50-51页
 3 小结与讨论第51-52页
第三章 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的mPEG化学修饰第52-67页
 1 材料与方法第52-58页
   ·材料第52-53页
     ·原料与试剂第52-53页
     ·仪器与设备第53页
   ·方法第53-58页
     ·mPEG的活化第53-54页
     ·活化度的检测第54-56页
       ·标准曲线的绘制第54-55页
       ·实际样品的测定第55-56页
     ·IgY的NHS-mPEG修饰第56页
     ·修饰率的测定第56-57页
     ·SDS-PAGE第57页
     ·IgY活性测定第57-58页
     ·红外光谱检测第58页
 2 结果与分析第58-65页
   ·mPEG活化度的测定第58-59页
   ·NHS活化对mPEG红外光谱图的影响第59-60页
   ·不同修饰条件对修饰效果的影响第60-64页
     ·不同摩尔比对修饰效果的影响第60-61页
     ·不同反应时间对修饰效果的影响第61-62页
     ·反应pH对修饰效果的影响第62-64页
   ·IgY以及mPEG-IgY红外光谱分析第64-65页
 3 小结与讨论第65-67页
第四章 热处理对IgY以及mPEG-IgY性质的影响第67-82页
 1 材料与方法第67-69页
   ·材料第67-68页
     ·原料与试剂第67页
     ·仪器与设备第67-68页
   ·方法第68-69页
     ·温度处理第68页
     ·蛋白活性的测定第68页
     ·圆二色光谱检测第68-69页
 2 结果与分析第69-80页
   ·不同温度处理下IgY以及mPEG-IgY变性率测定结果第69-70页
   ·不同温度处理下IgY以及mPEG-IgY活性保持率测定第70-72页
   ·热动力学分析第72-79页
     ·热变性过程中不同反应级数下的相关系数的确定第72-73页
     ·热变性方程速率常数的确定第73-74页
     ·热变性过程中D值、Z值的确定第74-78页
     ·变性过程中表观活化能的确定第78-79页
     ·热变性过程中热力学参数的确定第79页
   ·CD光谱测定热处理过程中二级结构的变化第79-80页
 3 小结与讨论第80-82页
第五章 酸碱处理对IgY以及mPEG-IgY性质的影响第82-91页
 1 材料与方法第82-84页
   ·材料第82-83页
     ·原料与试剂第82页
     ·仪器与设备第82-83页
   ·试验方法第83-84页
     ·酸碱处理方法第83页
     ·蛋白活性含量的测定第83页
     ·荧光光谱检测第83页
     ·圆二色光谱检测第83-84页
 2 结果与分析第84-90页
   ·不同pH对IgY以及mPEG-IgY蛋白质活性含量的影响第84-86页
   ·不同pH对IgY以及mPEG-IgY蛋白质活性保持率的影响第86-87页
   ·不同pH对IgY以及mPEG-IgY荧光光谱的影响第87-88页
   ·不同pH对IgY以及mPEG-IgY CD光谱的影响第88-90页
 3 小结与讨论第90-91页
第六章 IgY以及mPEG-IgY在模拟消化液中稳定性研究第91-105页
 1 材料与方法第91-95页
   ·材料第91-92页
     ·原料与试剂第91-92页
     ·主要仪器第92页
   ·试验方法第92-95页
     ·模拟胃液的配置第92页
     ·模拟肠液的配制第92页
     ·胃蛋白酶、胰蛋白酶活力测定第92-93页
     ·样品消化第93页
     ·SDS-PAGE第93页
     ·低分子量寡肽成分的分离第93页
     ·低分力量寡肽含量的分析第93-94页
     ·酶解产物中低分子量寡肽组分中氨基酸成分分析第94-95页
       ·样品TAA含量的测定第94页
       ·样品FAA含量的测定第94页
       ·样品中PAA含量的测定第94-95页
 2 结果与分析第95-104页
   ·pH 4的模拟胃液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响第95-96页
   ·pH 2的模拟胃液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响第96-98页
   ·模拟肠液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响第98-100页
   ·IgY以及mPEG-IgY经两步消化后寡肽成分分析第100-101页
   ·IgY以及mPEG-IgY经两步消化后氨基酸成分分析第101-104页
 3 小结与讨论第104-105页
第七章 结论与创新点第105-108页
 1. 结论第105-107页
 2. 创新点第107-108页
参考文献第108-117页
致谢第117-118页
附录:研究生期间发表的论文列表第118页

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