摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
缩略语表 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-37页 |
1 禽蛋中卵黄球蛋白简介 | 第18-22页 |
·卵黄球蛋白的种类及性质 | 第18-20页 |
·免疫球蛋白(Ig)的结构与功能 | 第20页 |
·鸡卵黄免疫球蛋白的特性 | 第20-22页 |
·IgY的热稳定性 | 第20-21页 |
·IgY的酸碱稳定性 | 第21页 |
·IgY对消化液的敏感性 | 第21页 |
·IgY对变性剂的稳定性 | 第21页 |
·IgY的免疫学特性 | 第21-22页 |
2 免疫球蛋白在禽类体内的转移过程 | 第22-23页 |
·母体血清到蛋黄中的转移 | 第22页 |
·胚胎卵囊到胚胎血液中的转移 | 第22-23页 |
3 IgY的分离纯化 | 第23-27页 |
·水溶性组分的分离 | 第23-25页 |
·IgY的分离纯化 | 第25-27页 |
4 IgY的应用研究 | 第27-30页 |
·IgY在食品中的应用 | 第27页 |
·IgY在畜禽产业中的应用 | 第27-28页 |
·IgY在临床上的应用 | 第28-29页 |
·新型饲料添加剂 | 第29-30页 |
·在人类抗生育方面的应用 | 第30页 |
5 蛋白质的PEG修饰 | 第30-34页 |
·PEG修饰技术 | 第30-32页 |
·PEG修饰对蛋白质性质和生物活性的影响 | 第32-33页 |
·PEG修饰方法 | 第33-34页 |
6 研究的目的意义及主要研究内容 | 第34-37页 |
·研究目的及意义 | 第34-35页 |
·主要研究内容 | 第35-37页 |
第二章 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的分离纯化及鉴定 | 第37-52页 |
1. 材料与方法 | 第37-42页 |
·原料于试剂 | 第37-38页 |
·仪器与设备 | 第38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·粗IgY制备 | 第38-39页 |
·水稀释法获得水溶性组分(WSF) | 第38-39页 |
·PEG沉淀蛋白 | 第39页 |
·透析 | 第39页 |
·离子交换色谱法纯化IgY | 第39页 |
·蛋白含量测定 | 第39-40页 |
·总蛋白含量测定 | 第39-40页 |
·粗IgY含量测定 | 第40页 |
·IgY纯度测定 | 第40页 |
·IgY回收率测定 | 第40页 |
·IgY活性测定 | 第40-41页 |
·脂肪含量的测定 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-51页 |
·水稀释法工艺条件对IgY分离效果的影响 | 第42-45页 |
·不同稀释倍数对IgY分离效果的影响 | 第42-43页 |
·不同pH对IgY分离效果的影响 | 第43-44页 |
·不同稀释静置时间对IgY分离效果的影响 | 第44-45页 |
·不同浓度的PEG6000对IgY沉淀效果的影响 | 第45-48页 |
·回收率的测定 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第46-48页 |
·离子交换法纯化IgY条件的确定 | 第48-50页 |
·磷酸然缓冲液(PBS)pH值确定 | 第48-49页 |
·磷酸盐缓冲液(PBS)离子强度确定 | 第49-50页 |
·产品回收率、纯度以及活性测定 | 第50-51页 |
3 小结与讨论 | 第51-52页 |
第三章 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的mPEG化学修饰 | 第52-67页 |
1 材料与方法 | 第52-58页 |
·材料 | 第52-53页 |
·原料与试剂 | 第52-53页 |
·仪器与设备 | 第53页 |
·方法 | 第53-58页 |
·mPEG的活化 | 第53-54页 |
·活化度的检测 | 第54-56页 |
·标准曲线的绘制 | 第54-55页 |
·实际样品的测定 | 第55-56页 |
·IgY的NHS-mPEG修饰 | 第56页 |
·修饰率的测定 | 第56-57页 |
·SDS-PAGE | 第57页 |
·IgY活性测定 | 第57-58页 |
·红外光谱检测 | 第58页 |
2 结果与分析 | 第58-65页 |
·mPEG活化度的测定 | 第58-59页 |
·NHS活化对mPEG红外光谱图的影响 | 第59-60页 |
·不同修饰条件对修饰效果的影响 | 第60-64页 |
·不同摩尔比对修饰效果的影响 | 第60-61页 |
·不同反应时间对修饰效果的影响 | 第61-62页 |
·反应pH对修饰效果的影响 | 第62-64页 |
·IgY以及mPEG-IgY红外光谱分析 | 第64-65页 |
3 小结与讨论 | 第65-67页 |
第四章 热处理对IgY以及mPEG-IgY性质的影响 | 第67-82页 |
1 材料与方法 | 第67-69页 |
·材料 | 第67-68页 |
·原料与试剂 | 第67页 |
·仪器与设备 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-69页 |
·温度处理 | 第68页 |
·蛋白活性的测定 | 第68页 |
·圆二色光谱检测 | 第68-69页 |
2 结果与分析 | 第69-80页 |
·不同温度处理下IgY以及mPEG-IgY变性率测定结果 | 第69-70页 |
·不同温度处理下IgY以及mPEG-IgY活性保持率测定 | 第70-72页 |
·热动力学分析 | 第72-79页 |
·热变性过程中不同反应级数下的相关系数的确定 | 第72-73页 |
·热变性方程速率常数的确定 | 第73-74页 |
·热变性过程中D值、Z值的确定 | 第74-78页 |
·变性过程中表观活化能的确定 | 第78-79页 |
·热变性过程中热力学参数的确定 | 第79页 |
·CD光谱测定热处理过程中二级结构的变化 | 第79-80页 |
3 小结与讨论 | 第80-82页 |
第五章 酸碱处理对IgY以及mPEG-IgY性质的影响 | 第82-91页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
·材料 | 第82-83页 |
·原料与试剂 | 第82页 |
·仪器与设备 | 第82-83页 |
·试验方法 | 第83-84页 |
·酸碱处理方法 | 第83页 |
·蛋白活性含量的测定 | 第83页 |
·荧光光谱检测 | 第83页 |
·圆二色光谱检测 | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-90页 |
·不同pH对IgY以及mPEG-IgY蛋白质活性含量的影响 | 第84-86页 |
·不同pH对IgY以及mPEG-IgY蛋白质活性保持率的影响 | 第86-87页 |
·不同pH对IgY以及mPEG-IgY荧光光谱的影响 | 第87-88页 |
·不同pH对IgY以及mPEG-IgY CD光谱的影响 | 第88-90页 |
3 小结与讨论 | 第90-91页 |
第六章 IgY以及mPEG-IgY在模拟消化液中稳定性研究 | 第91-105页 |
1 材料与方法 | 第91-95页 |
·材料 | 第91-92页 |
·原料与试剂 | 第91-92页 |
·主要仪器 | 第92页 |
·试验方法 | 第92-95页 |
·模拟胃液的配置 | 第92页 |
·模拟肠液的配制 | 第92页 |
·胃蛋白酶、胰蛋白酶活力测定 | 第92-93页 |
·样品消化 | 第93页 |
·SDS-PAGE | 第93页 |
·低分子量寡肽成分的分离 | 第93页 |
·低分力量寡肽含量的分析 | 第93-94页 |
·酶解产物中低分子量寡肽组分中氨基酸成分分析 | 第94-95页 |
·样品TAA含量的测定 | 第94页 |
·样品FAA含量的测定 | 第94页 |
·样品中PAA含量的测定 | 第94-95页 |
2 结果与分析 | 第95-104页 |
·pH 4的模拟胃液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响 | 第95-96页 |
·pH 2的模拟胃液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响 | 第96-98页 |
·模拟肠液对IgY以及mPEG-IgY稳定性的影响 | 第98-100页 |
·IgY以及mPEG-IgY经两步消化后寡肽成分分析 | 第100-101页 |
·IgY以及mPEG-IgY经两步消化后氨基酸成分分析 | 第101-104页 |
3 小结与讨论 | 第104-105页 |
第七章 结论与创新点 | 第105-108页 |
1. 结论 | 第105-107页 |
2. 创新点 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
附录:研究生期间发表的论文列表 | 第118页 |