| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| ·维持上皮细胞极性的重要极性蛋白复合物 | 第10-15页 |
| ·Lgl/Scrib complex | 第11-13页 |
| ·Par complex | 第13-14页 |
| ·Crumb complex | 第14-15页 |
| ·细胞极性蛋白Lgl和肿瘤的关系 | 第15-17页 |
| ·细胞极性与细胞迁移 | 第17-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·试剂 | 第19-21页 |
| ·各种酶类 | 第21页 |
| ·试剂盒和其他设备 | 第21-22页 |
| ·细菌菌系 | 第22页 |
| ·哺乳动物细胞株 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·DNA的制备、分析和酶切处理 | 第22-24页 |
| ·质粒小抽 | 第24页 |
| ·质粒中抽 | 第24页 |
| ·质粒大抽 | 第24页 |
| ·细菌感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·细菌转化 | 第25页 |
| ·蛋白质的检测技术 | 第25-27页 |
| ·溶解细胞 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第26-27页 |
| ·蛋白质转到NC膜 | 第27页 |
| ·Western blot | 第27页 |
| ·二维培养的细胞的免疫荧光 | 第27-28页 |
| ·三维培养的细胞的免疫荧光 | 第28页 |
| ·愈伤实验 | 第28页 |
| ·动物细胞培养及相关技术 | 第28-31页 |
| ·细胞培养条件 | 第28-29页 |
| ·实验操作条件 | 第29页 |
| ·细胞的保存 | 第29页 |
| ·脂质体法转染动物细胞 | 第29页 |
| ·稳定细胞株的建立 | 第29页 |
| ·3D细胞培养技术 | 第29-31页 |
| 第三章 实验结果 | 第31-57页 |
| ·MDCKⅡ double stable cell line细胞株的建立以及功能研究 | 第31-54页 |
| ·构建具有EGFP tag的基因表达质粒 | 第33-36页 |
| ·first stable cell line的建立 | 第36-41页 |
| ·double stable cell line的建立 | 第41-48页 |
| ·hugl-1以及突变体功能的研究 | 第48-54页 |
| ·建立稳定sk-hep1细胞株 | 第54-57页 |
| ·建立的稳定表达Hugl-1/wt,Hugl-1/△1414-1567/1667-1959,Hugl-1/△1190-1508,Hugl-1/△153-1688 sk-hep1细胞株利用荧光初步筛选 | 第55页 |
| ·建立的稳定表达Hugl-1/wt,Hugl-1/△1414-1567/1667-1959,Hugl-1/Δ1190-1508,Hugl-1/△153-1688细胞株western blot初步筛选 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-58页 |
| ·Hugl-1肝癌组织中频繁的在发生异常剪接 | 第57页 |
| ·Hugl-1发生异常剪接的机理及规律 | 第57-58页 |
| ·异常剪接对于Hugl-1功能的影响 | 第58页 |
| 论文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第72页 |
