| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 绪论 | 第12-19页 |
| 参考文献 | 第15-19页 |
| 材料与方法 | 第19-34页 |
| 1 实验动物及仪器设备 | 第19-20页 |
| 1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 主要试剂及配置 | 第20-24页 |
| 2.1 细胞培养 | 第20页 |
| 2.2 RNA提取和实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.3 细胞活力分析 | 第21页 |
| 2.4 细胞凋亡分析 | 第21-22页 |
| 2.5 荧光素酶报告基因系统 | 第22页 |
| 2.6 Western blot和细胞免疫荧光 | 第22-24页 |
| 3 实验流程与方法 | 第24-34页 |
| 3.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 3.2 氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation, OGD)模型建立 | 第25页 |
| 3.3 MTT分析法检测OGD处理后海马神经元细胞活力的变化 | 第25-26页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR分析miR-27a在OGD处理后海马神经元中的表达变化 | 第26页 |
| 3.5 MTT分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞活力的影响 | 第26-27页 |
| 3.6 流式细胞仪和TUNEL分析法miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响 | 第27-28页 |
| 3.7 荧光素酶报告基因系统验证FOXO1是mi R-27a调控靶基因 | 第28-31页 |
| 3.8 Western blot分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.9 挽救实验验证miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的保护 | 第32-33页 |
| 3.10 统计学处理 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-55页 |
| 1. 大鼠原代海马神经元氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation, OGD)建立 | 第34-36页 |
| 1.1 大鼠原代海马神经元培养 | 第34-35页 |
| 1.2 光镜下细胞形态的改变 | 第35页 |
| 1.3 MTT分析法检测OGD处理后海马神经元细胞活力的变化 | 第35-36页 |
| 2. 实时荧光定量PCR分析miR-27a在OGD处理后海马神经元中的表达变化 | 第36-37页 |
| 3. 转染miR-27a mimic后,实时荧光定量PCR分析miR-27a的表达变化 | 第37-40页 |
| 4. 转染miR-27a mimic后,MTT分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞活力的影响 | 第40-41页 |
| 5. miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响 | 第41-44页 |
| 5.1 流式细胞仪分析法分析MIR-27A对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 5.2 TUNEL分析法分析MIR-27A对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响 | 第42-44页 |
| 6. 验证FOXO1是miR-27a调控靶基因 | 第44-48页 |
| 6.1 miR-27a靶基因预测 | 第44-46页 |
| 6.2 miR-27a与靶基因FOXO13’-UTR互补结合位点的预测 | 第46页 |
| 6.3 荧光素酶报告基因系统检测FOXO1是mi R-27a的调控靶基因 | 第46-47页 |
| 6.4 Western blot分析法验证miR-27a对FOXO1蛋白表达的调控作用 | 第47-48页 |
| 7. 挽救实验验证miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的保护 | 第48-53页 |
| 7.1 Western blot检测FOXO1蛋白表达 | 第48-50页 |
| 7.2 MTT分析miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的存活 | 第50-51页 |
| 7.3 流式细胞仪分析法检测miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的存活 | 第51-53页 |
| 8. Western blot分析miR-27a对OGD处理后海马神经元中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第53-55页 |
| 讨论 | 第55-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 综述 新生儿缺氧缺血性脑病研究现状及治疗进展 | 第65-77页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第77-78页 |
| 英文缩写词表 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |