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MiR-27a对海马神经元缺血缺氧保护作用及其机制的研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-9页
绪论第12-19页
    参考文献第15-19页
材料与方法第19-34页
    1 实验动物及仪器设备第19-20页
        1.1 实验动物第19页
        1.2 主要仪器第19-20页
    2 主要试剂及配置第20-24页
        2.1 细胞培养第20页
        2.2 RNA提取和实时荧光定量PCR第20-21页
        2.3 细胞活力分析第21页
        2.4 细胞凋亡分析第21-22页
        2.5 荧光素酶报告基因系统第22页
        2.6 Western blot和细胞免疫荧光第22-24页
    3 实验流程与方法第24-34页
        3.1 细胞培养第24-25页
        3.2 氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation, OGD)模型建立第25页
        3.3 MTT分析法检测OGD处理后海马神经元细胞活力的变化第25-26页
        3.4 实时荧光定量PCR分析miR-27a在OGD处理后海马神经元中的表达变化第26页
        3.5 MTT分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞活力的影响第26-27页
        3.6 流式细胞仪和TUNEL分析法miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响第27-28页
        3.7 荧光素酶报告基因系统验证FOXO1是mi R-27a调控靶基因第28-31页
        3.8 Western blot分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元中凋亡相关蛋白表达的影响第31-32页
        3.9 挽救实验验证miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的保护第32-33页
        3.10 统计学处理第33-34页
结果第34-55页
    1. 大鼠原代海马神经元氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation, OGD)建立第34-36页
        1.1 大鼠原代海马神经元培养第34-35页
        1.2 光镜下细胞形态的改变第35页
        1.3 MTT分析法检测OGD处理后海马神经元细胞活力的变化第35-36页
    2. 实时荧光定量PCR分析miR-27a在OGD处理后海马神经元中的表达变化第36-37页
    3. 转染miR-27a mimic后,实时荧光定量PCR分析miR-27a的表达变化第37-40页
    4. 转染miR-27a mimic后,MTT分析法检测miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞活力的影响第40-41页
    5. miR-27a对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响第41-44页
        5.1 流式细胞仪分析法分析MIR-27A对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响第41-42页
        5.2 TUNEL分析法分析MIR-27A对OGD处理后海马神经元细胞凋亡的影响第42-44页
    6. 验证FOXO1是miR-27a调控靶基因第44-48页
        6.1 miR-27a靶基因预测第44-46页
        6.2 miR-27a与靶基因FOXO13’-UTR互补结合位点的预测第46页
        6.3 荧光素酶报告基因系统检测FOXO1是mi R-27a的调控靶基因第46-47页
        6.4 Western blot分析法验证miR-27a对FOXO1蛋白表达的调控作用第47-48页
    7. 挽救实验验证miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的保护第48-53页
        7.1 Western blot检测FOXO1蛋白表达第48-50页
        7.2 MTT分析miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的存活第50-51页
        7.3 流式细胞仪分析法检测miR-27a通过调控FOXO1促进OGD处理后海马神经元的存活第51-53页
    8. Western blot分析miR-27a对OGD处理后海马神经元中凋亡相关蛋白表达的影响第53-55页
讨论第55-58页
结论第58-59页
参考文献第59-65页
综述 新生儿缺氧缺血性脑病研究现状及治疗进展第65-77页
    参考文献第72-77页
攻读博士期间发表的论文第77-78页
英文缩写词表第78-80页
致谢第80-81页

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