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鸭新城疫病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及应用

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-34页
   ·NDV 一般生物学特性第13-17页
     ·病毒的分类地位与形态第13-14页
     ·NDV 理化特性第14-15页
     ·NDV 的培养特性第15页
     ·NDV 生物学活性第15-16页
     ·NDV 的毒力与致病性第16-17页
   ·NDV 分子生物学特征第17-29页
     ·NDV 的基因组第17-19页
     ·NDV 的蛋白与功能第19-27页
     ·NDV 分子流行病学第27-29页
   ·NDV 诊断研究进展第29-34页
     ·病毒分离与鉴定第29页
     ·血清学检测技术第29-31页
     ·分子生物学诊断技术第31-34页
   ·本研究的目的意义第34页
2 材料与方法第34-60页
   ·材料第34-39页
     ·主要材料及试验动物第34页
     ·试验试剂及耗材第34-35页
     ·质粒及受体菌第35-36页
     ·主要试剂配制第36-38页
     ·主要设备及仪器第38-39页
   ·方法第39-60页
     ·鸭新城疫 NP 蛋白原核表达载体构建和表达第39-48页
     ·检测抗鸭 NDV 抗体间接 ELISA(NP-ELISA)法的建立第48-50页
     ·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备第50-58页
     ·检测 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立第58-60页
3 结果第60-75页
   ·鸭 NDVNP 蛋白原核表达载体的构建第60-62页
     ·NP 基因 RT-PCR 扩增结果第60-61页
     ·重组质粒 NP-T 的酶切鉴定第61页
     ·重组表达质粒 pet28a-NP 的酶切图第61-62页
     ·N P 基因的序列测定与分析第62页
   ·重组表达蛋白的 SDS-PAGE 分析第62-64页
   ·N P 蛋白的纯化及浓度的测定第64-65页
   ·重组蛋白的 western-blot 分析第65-66页
   ·间接 ELISA 方法的建立第66-68页
     ·ELISA 反应的条件优化第66-67页
     ·ELISA 临界值的确定及结果的判定第67页
     ·重复性试验第67页
     ·特异性试验第67-68页
   ·间接 ELISA 与 HI 法的比较第68页
   ·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备第68-71页
     ·细胞融合与筛选第68-69页
     ·单克隆抗体的鉴定第69-71页
   ·检测鸭 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立第71-75页
     ·单克隆抗体纯化的结果第71-72页
     ·双抗体夹心 ELISA 方法的建立第72-75页
4 讨论第75-78页
   ·鸭 NDVNP 蛋白原核表达第75-76页
   ·抗鸭NDV 抗体间接 E L IS A 方法的建立第76-77页
   ·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备第77页
   ·检测鸭 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立第77-78页
5 结论第78-80页
参考文献第80-91页
致谢第91-92页
攻读学位期间发表论文情况第92页

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