中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-34页 |
·NDV 一般生物学特性 | 第13-17页 |
·病毒的分类地位与形态 | 第13-14页 |
·NDV 理化特性 | 第14-15页 |
·NDV 的培养特性 | 第15页 |
·NDV 生物学活性 | 第15-16页 |
·NDV 的毒力与致病性 | 第16-17页 |
·NDV 分子生物学特征 | 第17-29页 |
·NDV 的基因组 | 第17-19页 |
·NDV 的蛋白与功能 | 第19-27页 |
·NDV 分子流行病学 | 第27-29页 |
·NDV 诊断研究进展 | 第29-34页 |
·病毒分离与鉴定 | 第29页 |
·血清学检测技术 | 第29-31页 |
·分子生物学诊断技术 | 第31-34页 |
·本研究的目的意义 | 第34页 |
2 材料与方法 | 第34-60页 |
·材料 | 第34-39页 |
·主要材料及试验动物 | 第34页 |
·试验试剂及耗材 | 第34-35页 |
·质粒及受体菌 | 第35-36页 |
·主要试剂配制 | 第36-38页 |
·主要设备及仪器 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-60页 |
·鸭新城疫 NP 蛋白原核表达载体构建和表达 | 第39-48页 |
·检测抗鸭 NDV 抗体间接 ELISA(NP-ELISA)法的建立 | 第48-50页 |
·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备 | 第50-58页 |
·检测 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立 | 第58-60页 |
3 结果 | 第60-75页 |
·鸭 NDVNP 蛋白原核表达载体的构建 | 第60-62页 |
·NP 基因 RT-PCR 扩增结果 | 第60-61页 |
·重组质粒 NP-T 的酶切鉴定 | 第61页 |
·重组表达质粒 pet28a-NP 的酶切图 | 第61-62页 |
·N P 基因的序列测定与分析 | 第62页 |
·重组表达蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第62-64页 |
·N P 蛋白的纯化及浓度的测定 | 第64-65页 |
·重组蛋白的 western-blot 分析 | 第65-66页 |
·间接 ELISA 方法的建立 | 第66-68页 |
·ELISA 反应的条件优化 | 第66-67页 |
·ELISA 临界值的确定及结果的判定 | 第67页 |
·重复性试验 | 第67页 |
·特异性试验 | 第67-68页 |
·间接 ELISA 与 HI 法的比较 | 第68页 |
·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备 | 第68-71页 |
·细胞融合与筛选 | 第68-69页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第69-71页 |
·检测鸭 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立 | 第71-75页 |
·单克隆抗体纯化的结果 | 第71-72页 |
·双抗体夹心 ELISA 方法的建立 | 第72-75页 |
4 讨论 | 第75-78页 |
·鸭 NDVNP 蛋白原核表达 | 第75-76页 |
·抗鸭NDV 抗体间接 E L IS A 方法的建立 | 第76-77页 |
·鸭 NDVNP 蛋白单克隆抗体的制备 | 第77页 |
·检测鸭 NDV 抗原双抗体夹心 ELISA 方法的建立 | 第77-78页 |
5 结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第92页 |